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        人參飲品中人參皂甙含量的測定

        2018-03-12 07:16:31張佳玉劉紅梅
        現代食品 2018年2期
        關鍵詞:方法

        ◎ 龍 妍,張佳玉,劉紅梅,慈 慧

        (1.國家果酒及果蔬飲品監(jiān)督檢驗中心,吉林 通化 134001;2.吉林省產品質量監(jiān)督檢驗院,吉林 長春 130021;3.吉林市產品質量檢驗院,吉林 吉林 132013)

        在現代化的生活模式下,飲料已成為生活中不可缺少的飲品,雖說最健康的飲品還是純水,但是在很多社交場合中還是不太適合使用純水作為飲品。在生產設備和技術高速發(fā)展的今天,縱觀國內飲料市場,功能飲料、植物飲料、蛋白飲料等多類型的飲料已占主導地位,以至于很多的企業(yè)和產品都是在不斷模仿和抄襲,由此帶來的同質化的市場競爭也成了眾多經銷商對于飲料市場最大的擔憂[1]。因此,對新產品的開發(fā)也是對企業(yè)提出的新要求。

        人參飲料是最近幾年才興起的產業(yè),食用人參會提高人體免疫力是眾所周知的事情,在盛產高麗參的韓國,人參幾乎是每個韓國家庭必不可少的健身補品,許多人甚至是從小吃到大。但在中國,由于人參的價格過高,在市場上的需求還僅限于少數人群。為此,就要將人參的使用普及開來,這也是人參飲料在中國市場出現的原因。

        人參飲料是以人參或人參提取物為主要成分制成的飲料或者保健飲品,這改變了人參的食用方式,突破了傳統(tǒng)人參及其制品不便于食用、吸收率低等困局。人參飲料保持人參原有的功效,具有大補元氣、益智安神、緩解疲勞、生津止渴、延緩衰老、防癌抗癌等突出功效[2-3],并且不含咖啡因、?;撬岬扰d奮劑成分,安全性高,長期服用對身體無不良影響。我國人參飲料市場發(fā)展迅速,產品產出持續(xù)擴張,國家產業(yè)政策鼓勵人參飲料產業(yè)向高技術產品方向發(fā)展,國內企業(yè)新增項目投資逐漸增多。投資者對人參飲料市場的關注越來越密切,這使得人參飲料市場越來越受到各方的關注。長期以來,人參的功能和價值都被大多數人所接受,但是服用上的麻煩成為制約人參產品廣泛應用的主要障礙。人參飲料克服了消費者對人參食用方法上的困難。

        隨著新產品的產生,對其品質和質量進行把關和檢測的方法也應該隨之產生,這樣才能達到監(jiān)督管理的目的。作為產品質量監(jiān)督管理部門,研究出準確可靠的檢測方法對人參飲品的品質進行把關,才能維護消費者的利益,確保其身心健康。

        1 儀器與方法

        1.1 檢測儀器與試劑

        儀器:紫外可見光分光光度計,超聲波發(fā)生器,液相色譜儀(紫外檢測器)。

        試劑:甲醇、乙腈,均為色譜純;正丁醇、濃硫酸、無水乙醇、香草醛,均為分析純;人參皂甙Re、Rg1、Rb1對照品,中國藥品生物制品檢定所提供。

        1.2 樣品處理

        精確量取50 g或100 g樣品(視樣品中含量而定),置蒸發(fā)皿中,在水浴上揮去部分水分(如含酒精此過程可揮去酒精),留少量濃縮后的樣品,加入50 mL水飽和正丁醇浸泡,置于超聲發(fā)生器中超聲提取30 min,轉移至分液漏斗,取正丁醇層于蒸發(fā)皿中,沸水浴蒸干,殘渣用甲醇溶解,定容至10 mL容量瓶,備用。

        1.3 分光光度法測定人參總皂甙

        1.3.1 供試品制備

        精密量取處理后的樣品50 μL,分別置于具塞比色管中,蒸干后加入8%香草醛試液0.5 mL,72%硫酸溶液5 mL,充分搖勻后于60 ℃恒溫水浴上加熱10 min,立即用冰水冷卻10 min,搖勻。以試劑做空白,用紫外可見分光光度計于544 nm波長處分別測定吸光度。

        1.3.2 標準溶液制備

        精密稱取人參皂甙Re對照品20 mg,置10 mL容量瓶中,加甲醇適量溶解并定容,搖勻備用。

        1.3.3 標準曲線的建立

        吸取人參皂甙Re標準溶液(2.0 mg/mL)10、20、30、40、50 μL,于具塞比色管中,具體操作同1.3.1。得線性方程Y=0.005 0X+0.004 0,相關系數R2=0.998 2,表明人參皂甙Re含量在20~100 μg有良好的線性關系。標準曲線如圖1所示。

        圖1 人參皂甙Re標準曲線圖

        1.3.4 回收率試驗

        準確吸取人參皂甙Re標準溶液(2.0 mg/mL)10、25、50 μL分別置于100 mL容量瓶,用已知含量的人參飲品稀釋定容(分別含人參皂甙Re 20、50、100 μg),采用1.2中的方法對3個樣品進行處理,然后再以1.3方法測定,結果見表1。

        表1 不同含量人參皂甙Re的測定值與回收率表

        由表1可見知,本方法的回收率為92.5%~101.7%,表明采用本方法測定飲品中人參總皂甙含量的準確性較高。對同一濃度的樣品重復測定5次,以吸光度值計算其相對標準偏差CV%=4.2%

        1.4 高效液相色譜法測定人參皂甙單體Rg1、Re、Rb1含量

        參考《中華人民共和國藥典》2015版一部中高效液相色譜法測定人參中皂甙單體的方法[4],對其色譜分析條件進行改進優(yōu)化,通過對波長、流動相、流速、洗脫方式的優(yōu)化確定人參皂甙單體Rg1、Re、Rb1色譜分析條件具體如下:島津LC-20A液相色譜儀-紫外檢測器,色譜柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流動相,乙腈∶水(85∶15);梯度洗脫;檢測波長203 nm;流速1.0 mL/min;柱溫40 ℃;進樣量10 μL。

        分別將Rg1、Re、Rb1混合標準溶液和經1.2處理的樣品過0.45 μm的微孔濾膜過濾,在上述色譜條件下,得到色譜圖,如圖2、3所示。

        圖2 人參皂甙單體Rg1、Re、Rb1混標色譜圖

        圖3 供試品中人參皂甙單體Rg1、Re、Rb1色譜圖

        1.5 方法學考察

        ①精密度實驗:取供試品溶液,連續(xù)進樣5次,記錄色譜圖,相對保留時間RSD<0.8%,相對峰面積RSD為2.1%~3.3%,表明儀器精密度良好。②穩(wěn)定性實驗:取供試品溶液,分別在0、2、4、8、12、24 h進樣,記錄色譜圖,相對保留時間RSD<0.76%,相對峰面積RSD為1.78%~3.11%,表明供試品在24 h內穩(wěn)定。③重現性實驗:相同條件下,制備5份供試品溶液,進樣,記錄色譜圖,相對保留時間RSD<0.83%,峰面積RSD為2.3%~4.1%,表明方法重現性良好。④回收率實驗:已知含量的供試品溶液中,加入人參皂甙Re、Rg1、Rb1混標對照品適量,按1.4色譜條件進行色譜分析,測定人參皂甙Rg1、Re、Rb1回收率分別為95.3%、96.5%、98.9%,RSD為0.56%~3.12%。

        2 結果與討論

        本文中的方法能有效檢測人參飲品中的皂甙含量,該方法在以往方法的基礎上做了進一步的優(yōu)化,克服了高效液相色譜法出峰時間長的缺點,調整了色譜條件及流動相中有機溶劑配比,在不影響檢測結果的基礎上縮短了出峰時間,提高了工作效率。該方法具有準確高效的特點,能夠運用于人參飲品中皂苷含量的檢測和研究工作。

        [1]智研咨詢.2014—2019年中國人參飲料市場深度調查與產業(yè)競爭現狀報告[R].專業(yè)市場調研報告網站,2015.

        [2]張前進.人參的化學成分和藥理活性[J].光明中醫(yī),2011,26(2):368-369.

        [3]LW Qi,CZ Wang,CS Yuan. American ginseng:Potential structure function relationship in cancer chemoprevention[J].Biochemical Pharmacology,2010,80(7):947-954.

        [4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2015年版一部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015.

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