李風(fēng)鈴，李沂光，孫天樂，江艷華，姚琳，張亞南，翟毓秀*

(1.農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測與評價重點實驗室，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所， 山東 青島 266071;2.青島大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院， 山東 青島 266071)

食物過敏是當(dāng)今世界第4個重大衛(wèi)生學(xué)問題，被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為21世紀(jì)應(yīng)重點防治的三大類疾病之一[1]。隨著食品加工行業(yè)的發(fā)展、飲食結(jié)構(gòu)的改變以及環(huán)境污染加劇等因素，食物過敏的發(fā)病率目前已呈現(xiàn)明顯上升趨勢。據(jù)統(tǒng)計，全世界有5%～8%的兒童和2%～3%的成人患有食物過敏性疾病[2-4]。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，90%以上的食物過敏是由牛奶、花生、雞蛋、大豆、小麥、堅果、魚類、甲殼類這八類食物引起的[5]。中國疾病預(yù)防控制中心的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，中國城市15～24歲年齡段的健康人群中，食物過敏率高達5.7%，水產(chǎn)品、牛奶和雞蛋是主要的過敏食物[6]。由水產(chǎn)品及其制品導(dǎo)致過敏的患者可能會出現(xiàn)紅腫、鼻炎、哮喘等過敏性癥狀，嚴(yán)重時還會伴有虛脫、休克，甚至危及生命，嚴(yán)重影響身體健康和生活質(zhì)量[7]。人們常食用的致敏水產(chǎn)品主要包括硬骨魚類、節(jié)肢動物類及軟體動物類等，市場上常見的易致敏水產(chǎn)品如表1所示。

水產(chǎn)品因其鮮美的味道、豐富的營養(yǎng)價值而深受人們的喜愛，是居民食物消費的重要組成部分，中國已多年居水產(chǎn)養(yǎng)殖和消費總量第一大國的地位，并保持穩(wěn)步增長的趨勢， 1981年人均水產(chǎn)品消費量約7.1 kg，2016年增長到約20.53 kg，稍高于全球人均水產(chǎn)品消費量20.5 kg。但與日韓等水產(chǎn)品消費大國相比(2015年，韓國人均水產(chǎn)品消費量為58 kg)，中國人均水產(chǎn)品的消費需求仍有較大的增長空間[8-9]。隨著中國海洋“藍(lán)色經(jīng)濟”的不斷發(fā)展，未來水產(chǎn)及水產(chǎn)制品將會有更廣闊的消費市場。

表1 易致敏水產(chǎn)品種類Tab.1 Classification of seafood groups causing allergy

作為世界上最大的水產(chǎn)品生產(chǎn)國和消費國，降低水產(chǎn)品中過敏原的食用風(fēng)險及減少過敏性疾病的發(fā)生，建立水產(chǎn)品中過敏原的檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)及評價標(biāo)準(zhǔn)，確保中國水產(chǎn)品出口貿(mào)易的穩(wěn)定發(fā)展，開展水產(chǎn)品中過敏原的監(jiān)控、風(fēng)險評價及致敏機理等方面的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用性研究尤為必要。因此，文章綜述了近年來的研究報道，以期為下一步開展水產(chǎn)品中過敏原的研究提供思路，為其安全控制指明方向。

1 水產(chǎn)品中的主要過敏原

過敏原，又稱為變應(yīng)原、過敏物、致敏原等，是指能夠使個體發(fā)生I型超敏反應(yīng)的非寄生抗原過敏。目前已發(fā)現(xiàn)并鑒定的水產(chǎn)品過敏原有小清蛋白(parvalbumin，PV)、原肌球蛋白(tropomyosin，TM)、精氨酸激酶(arginine kinase，AK)等[10]。常見致敏水產(chǎn)品中主要的過敏原及其鑒定分子量見表2。

表2 常見致敏水產(chǎn)品中主要過敏原Tab.2 The main allergens of common aquatic products

依據(jù)過敏原的品種來源，常見的水產(chǎn)品過敏原可分為3大類：硬骨魚類過敏原、甲殼類過敏原和軟體動物過敏原[10]。

1.1 硬骨魚類過敏原

在水產(chǎn)品中，魚類的消費量居于榜首，同時也是導(dǎo)致過敏反應(yīng)頻發(fā)的產(chǎn)品。其中，尤以海水魚引發(fā)的過敏事件較多，淡水魚相對較少。因此，目前國內(nèi)外針對魚類過敏原的研究主要集中在海水魚，主要的致敏品種包括狼鱸、鰹、比目魚、金槍魚、鳳尾魚、鱈、鮭等；另外，部分魚類加工品如魚粉、魚油、魚明膠等亦可引發(fā)過敏性疾病。

據(jù)研究，在魚類引發(fā)的過敏性疾病中，小清蛋白PV占據(jù)主要因素，約為95%。除此之外，魚卵蛋白(如鮭的硫酸魚精蛋白)和膠原蛋白等也可能會引發(fā)一定數(shù)量的致敏反應(yīng)。PV是一種鈣結(jié)合型水溶性蛋白，大量存在于魚類肌肉中，分α、β兩個類型，分子質(zhì)量約為12 ku，易溶于水，耐熱，不易酶解，等電點較小，偏酸性，且不同魚類中PV同源性較高[11]。某報道中發(fā)現(xiàn)了一種新的PV，其分子質(zhì)量為24、38、51 ku，但Das Dores 等[12]認(rèn)為它們分別是小清蛋白的二聚體、三聚體及四聚體。Faste等[13]發(fā)現(xiàn)鱈中還有一條與特異性IgE的結(jié)合非常強的17 ku蛋白，該蛋白可以和鱈的PV多抗相結(jié)合，在其他多種魚中也存在，研究者推斷此蛋白可能是與PV IgG存在交叉致敏反應(yīng)或者是另一種PV的聚合物。另有研究發(fā)現(xiàn)不同魚類的PV具有60%～90%的氨基酸序列相似性，可誘導(dǎo)廣泛的交叉反應(yīng)[10,14-16]。這可能與不同魚類的過敏原具有相同或相似的抗原決定簇有關(guān)，也由此會造成一種抗體可以與多種抗原發(fā)生免疫反應(yīng)。然而，PV與IgE結(jié)合位點的結(jié)構(gòu)特性具有種屬特異性，因此交叉致敏反應(yīng)的機理仍需要有進一步的研究。

在魚類過敏原的研究過程中，其他種類的過敏原蛋白也陸續(xù)得以鑒定。據(jù)報道，鱈中的主要過敏原還包括一種41 ku的蛋白[17]。Das Dores等[18]認(rèn)為41 ku的蛋白是糖基化的乙醛磷酸脫氫酶(APDH)，另外還有一種36 ku的蛋白，是未糖基化的APDH。除此之外，Nakamura等[19]認(rèn)為紅點櫻花鉤吻鮭的過敏原是分子質(zhì)量為26 ku的磷酸丙糖異構(gòu)酶。Kondo等[20]通過研究發(fā)現(xiàn)金槍魚和鯖的過敏原是分子質(zhì)量為94 ku的轉(zhuǎn)鐵蛋白。另外，還有120 ku分子量的膠原蛋白、比目魚中40 ku分子量的蛋白以及金槍魚中的46 ku分子量的蛋白[21-23]。

1.2 甲殼類過敏原

甲殼動物也屬于八大類主要過敏食品之一，易引起致敏的產(chǎn)品包括對蝦、蟹、龍蝦等，主要的過敏原有TM、AK、肌鈣結(jié)合蛋白(SCP)、肌球蛋白輕鏈(MLC)及血藍(lán)蛋白亞基(HCS)等。

TM是蝦、蟹等甲殼類動物中的主要過敏原，也是研究者早期的關(guān)注焦點。據(jù)報道，TM與肌動蛋白結(jié)合，在肌肉收縮中起關(guān)鍵作用。目前，已發(fā)現(xiàn)刀額新對蝦、中華絨螯蟹等多種蝦蟹類的主要過敏原為TM，雖分子量大小不一，但其結(jié)構(gòu)上均具有8個IgE結(jié)合位點，而每個結(jié)合位點均是由5～14個氨基酸殘基組成[24-27]。

另外，甲殼動物中還有幾類次要過敏原。AK是一類磷酸化的胍基化合物，在細(xì)胞代謝中可調(diào)節(jié)ATP與磷酸精氨酸之間的能量平衡，對無脊椎動物的能量代謝有重要作用[28]。SCP是一種EF手型鈣離子緩沖蛋白，廣泛存在于無脊椎動物體內(nèi)，具有調(diào)節(jié)肌肉收縮功能，與脊椎動物體內(nèi)的小清蛋白具有相似性[29]。MLC是組成肌小節(jié)粗肌絲的成分，可控制包括物質(zhì)運輸、肌肉收縮和細(xì)胞分裂等多種生理過程[30]。HCS是一種具有酚氧化酶活性、抗病毒和抑菌等多項功能的氧載體蛋白，近年來在無脊椎動物中多有發(fā)現(xiàn)[31]。TM、AK和HCS已被證實是蝦、蟹的共同過敏原[24]。

1.3 軟體動物過敏原

軟體動物中易造成致敏反應(yīng)的種類包括烏賊、帽貝、蚌類、蛤類、魷、章魚等。研究表明軟體動物的主要過敏原亦為TM[32]，次要過敏原主要是AK。相較于國外對軟體動物過敏原的研究，國內(nèi)在此方面的認(rèn)知還略欠缺。不同軟體動物中的主要過敏原其分子量具有明顯差異。在章魚中，35 ku的TM和38 ku的AK為其主要過敏原，同時與甲殼類AK也具有明顯的免疫交叉反應(yīng)[33]。牡蠣中的主要過敏原為分子質(zhì)量為86 ku的TM，而文蛤中的主要過敏原為90 ku的鹽溶性蛋白[34]?？O蟶中的主要過敏原是58 ku蛋白，次要過敏原包括12、28和38 ku的蛋白等[35]。

盡管近年來對水產(chǎn)品中過敏原鑒定的種類日益增多，但是國內(nèi)在此方面的研究仍偏少。此外，過敏原種類鑒定的研究多集中在水產(chǎn)品的主要過敏原，對次要過敏原的性質(zhì)研究不夠深入，對國內(nèi)水產(chǎn)品尤其甲殼類過敏患者的特異性過敏原仍不明確。過敏原的提取方法也缺乏規(guī)范性，導(dǎo)致分離得到的過敏原多為主要過敏原，次要過敏原難以涵蓋全部種類，或者不具有免疫活性，由此也限制了過敏原鑒定的準(zhǔn)確性和特異性。

2 水產(chǎn)品過敏反應(yīng)的類型及致敏機理

2.1 水產(chǎn)品過敏反應(yīng)的類型

根據(jù)過敏反應(yīng)的發(fā)生速度，發(fā)病機制及臨床特征，過敏反應(yīng)主要分為4種類型，分別為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型(表3)。其中Ⅰ～Ⅲ型過敏反應(yīng)是抗體介導(dǎo)的，血清可被動轉(zhuǎn)移，而Ⅳ型反應(yīng)則由輔助性T細(xì)胞或細(xì)胞毒T細(xì)胞介導(dǎo)，經(jīng)細(xì)胞被動轉(zhuǎn)移，故反應(yīng)較慢[36]。

水產(chǎn)品過敏反應(yīng)可因暴露于水產(chǎn)品本身或存在于水產(chǎn)品中的各種非水產(chǎn)成分引起，包括各種污染物，如寄生蟲、細(xì)菌、化學(xué)添加劑等[37-39]。其中因水產(chǎn)品本身過敏原導(dǎo)致的致敏反應(yīng)大多屬于由IgE介導(dǎo)的I型過敏反應(yīng)，其他3種類型的過敏反應(yīng)因過敏原來源復(fù)雜，且與水產(chǎn)品關(guān)聯(lián)不大，不在此文討論范圍內(nèi)。

2.2 水產(chǎn)品中過敏原的致敏機理

2.2.1 腸道屏障和黏膜免疫耐受

水產(chǎn)品中的過敏原通過口服途徑進入機體后會引發(fā)黏膜免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng)。正常情況下，黏膜屏障通過物理、化學(xué)或細(xì)胞因子阻止外來抗原的滲透。但具有完整免疫原性的水產(chǎn)品蛋白質(zhì)可通過胃黏膜的透壁通道，逃脫或抵抗蛋白酶消化，以相對完整的形式穿過腸腔，導(dǎo)致初級的免疫反應(yīng)[39]。另外，固有免疫(自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和補體等)和適應(yīng)性免疫(上皮內(nèi)和固有層淋巴細(xì)胞、派氏淋巴結(jié)、分泌型IgA等)反應(yīng)的發(fā)生亦可抵抗外源抗原。尤其是嬰幼兒的黏膜腸道屏障發(fā)育不成熟、免疫系統(tǒng)低下、sIgA分泌系統(tǒng)不成熟等情況均可增加胃腸道感染和食物過敏的發(fā)病率。然而，盡管成人擁有相對復(fù)雜、完善的黏膜屏障，但機體腸道仍會攝取大約2%的食物抗原[40-42]。不過，穿過胃腸道的食物抗原很少會引起過敏反應(yīng),這是因為成人黏膜的相關(guān)淋巴組織可產(chǎn)生免疫耐受，阻止過敏反應(yīng)的發(fā)生。含酶促因子和發(fā)炎因子的完整過敏原蛋白盡管可穿過黏膜，但會被抗原呈遞細(xì)胞APCs (巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等)捕獲，并與APCs中的泛素結(jié)合，被降解為多肽，經(jīng)組織相容性復(fù)合物II(MHC-II)呈遞，并被未經(jīng)修飾的CD4 T細(xì)胞識別，CD4 T細(xì)胞分化為Th2細(xì)胞后即可誘導(dǎo)抗體類別轉(zhuǎn)換為IgE的細(xì)胞因子，從而啟動IgE介導(dǎo)的超敏反應(yīng)[43]。

表3 過敏反應(yīng)的類型及癥狀Tab.3 Types，symptoms of allergic reactions

注：Th1(Helper T cells,Th)為輔助性T細(xì)胞，屬CD4陽性細(xì)胞，參與細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)、遲發(fā)型過敏反應(yīng)等；CTL(cytotoxic lymphocyte, CTL)為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，是白細(xì)胞的亞部，是一種特異T細(xì)胞，分泌各種細(xì)胞因子參與免疫作用。

2.2.2 I型過敏反應(yīng)機理

90%以上的水產(chǎn)食物過敏實質(zhì)是IgE介導(dǎo)的I型過敏反應(yīng)。當(dāng)引起IgE抗體抗原反應(yīng)的食物過敏原再次刺激機體時，就會發(fā)生I型過敏反應(yīng)[44]。即進入機體后的過敏原穿過黏膜，被巨噬細(xì)胞加工后遞呈給淋巴T細(xì)胞和B細(xì)胞，刺激特異性B細(xì)胞產(chǎn)生IgE抗體，該抗體結(jié)合肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的特異性受體(FcεR) 形成致敏靶細(xì)胞，此時機體進入致敏狀態(tài)。當(dāng)同一類型的過敏原再次進入機體，結(jié)合在致敏靶細(xì)胞上的IgE抗體與之發(fā)生特異性反應(yīng)，并通過一系列膜分子行為介導(dǎo)靶細(xì)胞脫顆粒，合成并釋放生物活性介質(zhì)(如組胺、白三烯、趨化因子、蛋白水解酶等)。這也是組胺釋放的主要機制。當(dāng)上述活性物質(zhì)作用于皮膚、血管、黏膜、腺體等靶器官，引起強烈的支氣管平滑肌收縮、毛細(xì)血管擴張以及通透性增加，產(chǎn)生其他炎癥介質(zhì)，最終表現(xiàn)為過敏癥。因此，組胺、白三烯和免疫球蛋白Fc段受體(FcεR)可以作為I型過敏反應(yīng)的臨床診斷指標(biāo)[45-46]。

由于過敏原種類繁多，結(jié)構(gòu)多樣，多具有交叉反應(yīng)，且其致敏活性大小與產(chǎn)品來源、攝入方式及機體狀態(tài)等因素相關(guān)，致使過敏原機理方面的研究更為復(fù)雜。另外，由于水產(chǎn)品尤其甲殼類中過敏原的重組純化及抗體制備等技術(shù)不夠規(guī)范，導(dǎo)致過敏原的純度及評價缺乏穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，使得不同過敏原的致敏機理研究不具參考性。另外，水產(chǎn)品中過敏原尤其是次要過敏原的分子機制尚不清楚，非IgE介導(dǎo)的免疫機制亦處于初步探索階段。需加強過敏的免疫調(diào)控機制研究，為減少水產(chǎn)品致敏性疾病的發(fā)生及尋找食物過敏治療新靶標(biāo)提供理論依據(jù)。

3 水產(chǎn)品過敏原檢測技術(shù)與脫敏方法

食物過敏至今尚無特異性療法，只能針對癥狀進行降低性損傷治療，但少量甚至微量的過敏原可能造成的嚴(yán)重后果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過提前處理過程的復(fù)雜性。因此，預(yù)防和減少食物過敏原對消費者的影響是最有效地途徑，其中之一是通過在對過敏原開展監(jiān)測的基礎(chǔ)上準(zhǔn)確地標(biāo)示，避免過敏患者誤食；二是將含有過敏原的食品進行脫敏，降低其致敏性以適應(yīng)市場普遍需求。

3.1 過敏原的檢測技術(shù)及方法標(biāo)準(zhǔn)

目前，水產(chǎn)品中過敏原的主要檢測方法仍以蛋白質(zhì)和DNA為靶目標(biāo)，其中，以過敏原蛋白為檢測對象的免疫學(xué)技術(shù)，因具高靈敏度而成為最常用的方法。相比免疫學(xué)方法，核酸方法可通過靶序列的合理選擇和引物的優(yōu)化來減少交叉反應(yīng)的影響。然而在實際檢測中，因為過敏原種類較多，且多數(shù)存在交叉反應(yīng)，因此，需要開發(fā)可同時對多種過敏原進行篩查檢測的技術(shù)。

診斷食物過敏的方法可分為體內(nèi)激發(fā)試驗如雙盲對照食物激發(fā)實驗(double-blind placebo controlled oral food challenge，DBPCFC) 和皮膚點刺實驗(skin-prick test，SPT)[45-46]；體外檢測方法包括組胺釋放實驗(HRT)、蛋白芯片技術(shù)檢測及血清特異性IgE檢測等[45,47-48]?，F(xiàn)在應(yīng)用較多的為血清特異性IgE檢測方法。針對水產(chǎn)品中過敏原的檢測，目前實時定量PCR技術(shù)、ELISA技術(shù)以及針對組胺的檢測技術(shù)等應(yīng)用相對廣泛，另外也有利用蛋白質(zhì)微陣列技術(shù)建立了可視化的抗體微陣列檢測方法[49-50]。過敏原標(biāo)準(zhǔn)提取方法的研究是過敏病癥診斷和治療的必要手段，開發(fā)具有良好免疫活性的標(biāo)準(zhǔn)提取物質(zhì)尚缺乏良好的工作基礎(chǔ)，可考慮作為下一步研究的焦點。

目前，國際食品法典委員會和一些發(fā)達國家紛紛頒布了食品過敏原的法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)管理措施。美國和歐盟更是進入了強制實施階段。中國也已有十余個過敏原相關(guān)的食品標(biāo)準(zhǔn)，包括4項水產(chǎn)品中過敏原的方法類標(biāo)準(zhǔn)[51-54]。隨著國際社會對過敏原問題的日益重視，中國也意識到了過敏原管理的重要性，現(xiàn)已采取措施逐步加大對食品過敏原標(biāo)簽的標(biāo)識管理，并加快相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定。

3.2 過敏原的脫敏方法

過敏原具有良好的穩(wěn)定性，進入人體后，不易被消化降解。降低過敏原致敏性的方法目前主要分為物理法(加熱、輻照、超高壓等)、化學(xué)法(糖基化修飾、強酸、強堿、水解等)以及生物法(酶解、發(fā)酵、基因改良等)，可將食物中的過敏原蛋白及其抗原決定簇進行結(jié)構(gòu)性改變或破壞，進而消除或降低過敏原對人的免疫原活性[55-56]。水產(chǎn)品中過敏原的脫除技術(shù)研究起步相對較晚，脫敏效果并不理想。目前，水產(chǎn)品中相對有效的過敏原脫除方法主要有輻照、超高壓、超聲、酶解等，經(jīng)處理后可明顯降低過敏原的免疫活性及消化穩(wěn)定性，但對水產(chǎn)品的質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味破壞較大，有效的脫敏方法仍需進一步開發(fā)[57-60]。

4 展望

中國目前是水產(chǎn)品第一生產(chǎn)和消費大國，隨著居民經(jīng)濟收入水平不斷增長和消費觀念的持續(xù)改變，高質(zhì)量水產(chǎn)品的需求必會持續(xù)增加，這就意味著大量水產(chǎn)品被食用可能會增加致敏的發(fā)病數(shù)量。因此，水產(chǎn)品過敏原的基礎(chǔ)性和應(yīng)用性研究將是未來重要的研究方向。由于水產(chǎn)品中過敏原的類型較多，作用機制各有差異，使得水產(chǎn)品中過敏原的研究較之其他食用品更為復(fù)雜。因此，未來可在以下幾個方面開展深入的研究：1)加強基于水產(chǎn)品中過敏原表型的針對性、系統(tǒng)性基礎(chǔ)研究，建立實驗動物模型，結(jié)合臨床劑量反應(yīng)數(shù)據(jù)，對過敏風(fēng)險進行逐級排序，鑒定新的過敏原種類;2)建立標(biāo)準(zhǔn)的過敏原提取方法，加強對過敏原重組表達技術(shù)研究，獲得具有免疫活性的標(biāo)準(zhǔn)提取物，拓深過敏原的診斷和治療方面的研究;3)開發(fā)建立過敏原的高靈敏、高特異性監(jiān)控技術(shù)，實施定量風(fēng)險評估，制定監(jiān)管閾值，出臺可應(yīng)對水產(chǎn)品進出口貿(mào)易限制的政策法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)，加強過敏原的標(biāo)識管理;4)完善現(xiàn)有的脫敏加工技術(shù)，建立多樣同時脫敏處理技術(shù)，研發(fā)低致敏或無致敏產(chǎn)品。

[1] 陸宗超，李振興，張立敏，等. 大菱鲆過敏原氧化后理化性質(zhì)及與IgE結(jié)合能力的變化[J]. 浙江大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版), 2013, 39 (6): 679-686.

[2] Taylor S L , Hefle S L. Food allergen labeling in the USA and Europe [J]. Curr Opin Allergy Clin Immunol, 2006, 6 (3): 186-190.

[3] Chapman J A, Bernstein I L, Lee R E, et a1. Food allergy: a practice parameter[J]. Ann Allergy Asthma Immunol, 2006, 96 (3 Suppl 2): S1-S68.

[4] Scott H, Sicherer M D, Hugh A. Food allergy [J]. J Allergy Clin Immunol, 2009, 124 (3): 116-125.

[5] Lupinek C, Wollmann E, Baar A, et al. Advances in allergen-microarray technology for diagnosis and monitoring of allergy: the MeDALL allergen-chip [J]. Methods, 2014, 66 (1): 106-119.

[6] 李玉寶，羅小平，王碧珍, 等. 在校大學(xué)生食物過敏情況調(diào)查[J]. 中國校醫(yī)， 2014, 28 (3): 185-186.

[7] Posa D, Hofmaier S, Arasi S, et al. Natural evolution of IgE responses to mite allergens and relationship to progression of allergic disease: a review [J]. Curr Allergy Asthma Rep, 2017, 17(5): 28.

[8] 劉銳，李冉，陳潔. 我國水產(chǎn)品消費特征及增長潛力[J]. 農(nóng)業(yè)展望, 2011, 7(3): 53-58.

[9] 蔡孟沿，孫琛. 基于Probit模型的人口統(tǒng)計特征指標(biāo)對水產(chǎn)品消費偏好的影響分析[J]. 海洋開發(fā)與管理, 2016, 33(6): 15-19.

[10] 劉光明, 曹敏杰, 蔡秋鳳, 等. 水產(chǎn)品過敏原的研究現(xiàn)狀和展望[J]. 中國食品學(xué)報， 2012, 12(5): 1-9.

[11] Mohamadi M, Falak R, Mokhtarian K, et al. Identification and characterization of main allergic proteins in cooked wolf herring fish[J]. Iran J Allergy Asthma Immunol, 2016, 15(5): 363-371.

[12] Das Dores S，Chopin C, Villaume C, et al. A new oligomeric parvalbumin allergen ofAtlanticcod(Gad m1) encoded by a gene distinct from that of Gad c1[J]. Allergy, 2002, 57(72): 79-83.

[13] Faste C K，Plassen C. Quantitative sandwich ELISA for the determination of fish in foods [J]. J Immunol Methods, 2008, 329 (1/2): 45-55.

[14] Bugajska S A, Elfman L, Fuchs T, et al. Parvalbumin, a cross-reactive fish allergen, contains IgE-binding epitopes sensitive to periodate treatment and Ca2+depletion [J]. J Allergy Clin Immunol, 1998, 101(1): 67-74.

[15] Van Do T，Elsayed S, Florvaag E, et al. Allergy to fish parvalbumins: studies on the cross-reactivity of allergens from 9 commonly consumed fish [J]. J Allergy Clin Immunol, 2005, 116 (6): 1314-1320.

[16] Kobayashi Y, Huge J, Imamura S, et al. Study of the cross-reactivity of fish allergens based on a questionnaire and blood testing [J]. Allergol Int, 2016, 65(3): 272-279.

[17] Kuehn A, Hilger C, Lehners-Weber C, et al. Identification of enolases and aldolases as important fish allergens in cod, salmon and tuna: component resolved diagnosis using parvalbumin and the new allergens[J]. Clin Exp Allergy, 2013, 43(7): 811-822.

[18] Das Dores S, Chopin C, Romano A, et al. IgE-binding and cross-reactivity of a new 41 kDa allergen of codfish [J]. Allergy, 2002, 57(72): 84-87.

[19] Nakamura R, Satoh R, Nakajima Y, et al. Comparative study of GH-transgenic and non-transgenic amago salmon (Oncorhynchusmasouishikawae) allergenicity and proteomic analysis of amago salmon allergens [J]. Regul Toxicol Pharmacol, 2009, 55(3): 300-308.

[20] Kondo Y, Komatsubara R, Nakajima Y, et al. Parvalbumin is not responsible for cross-reactivity between tuna and marlin: A case report [J]. J Allergy Clin Immunol, 2006, 118(6): 1382-1383.

[21] Li Q, Mu L, Zhang F, et al. A novel fish collagen scaffold as dural substitute [J]. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl, 2017, 80: 346-351.

[22] Asero R, Mistrello G, Roncarolo D, et al. True monosensitivity to a tropical sole [J]. Allergy, 1999, 54(11): 1228-1229.

[23] Kobayashi Y, Yang T, Yu C T, et al. Quantification of major allergen parvalbumin in 22 species of fish by SDS-PAGE [J]. Food Chem, 2016, 194: 345-353.

[24] Huang L, Du B, Bai G, et al. Isolation and characterisation of tropomyosin from shrimp (PenaeusvannameiBoone) and its association property at high ionic strength [J]. Nat Prod Res, 2016, 30(1): 115-119.

[25] Liu G M, Cao M J, Huang Y Y, et al. Comparative study ofinvitrodigestibility of major allergen tropomyosin and other food proteins of Chinese mitten crab (Eriocheirsinensis) [J]. J Sci Food Agric, 2010, 90(10): 1614-1620.

[26] 路曉琳，陳官芝，王國英, 等. 誘發(fā)兒童特應(yīng)性皮炎的三疣梭子蟹過敏原研究[J]. 中華皮膚科雜志, 2015, 48(6): 369-372.

[27] 孫一帆，黃建芳，王彩霞, 等. 中國人的蝦、蟹致敏過敏原組分分析[J]. 中國免疫學(xué)雜志, 2014, 30(10): 1325-1329.

[28] 孫一帆，黃建芳，向軍儉, 等. 凡納濱對蝦過敏原精氨酸激酶的質(zhì)譜鑒定及其免疫交叉反應(yīng)研究[J]. 食品科學(xué), 2015, 36(1): 170-173.

[29] White A J, Northcutt M J, Rohrback S E, et al. Characterization of sarcoplasmic calcium binding protein (SCP) variants from freshwater crayfishProcambarusclarkii[J]. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol, 2011, 160 (1): 8-14.

[28] 沈海旺，陳亨莉，曹敏杰, 等. 甲殼類動物4種過敏原的序列分析、抗原表位預(yù)測及三維結(jié)構(gòu)建模 [J]. 免疫學(xué)雜志, 2012, 28 (7): 613-619.

[31] 嚴(yán)芳. 甲殼動物血藍(lán)蛋白免疫學(xué)活性及其作用機制研究[D].汕頭：汕頭大學(xué)，2011.

[32] Khora S S. Seafood-associated shellfish allergy: a comprehensive review [J]. Immunol Invest, 2016, 45(6): 504-530.

[33] 沈海旺. 章魚過敏原的研究[D]. 廈門：集美大學(xué), 2012.

[34] 劉光明, 曹敏杰, 梁銀龍, 等. 文蛤特異性過敏原免疫識別的初步研究[J]. 食品科學(xué), 2009, 30(1): 207-210.

[35] 李荔, 李啟沅, 劉志剛, 等. 縊蟶過敏原的分離鑒定與純化[J]. 深圳大學(xué)學(xué)報， 2007, 24(4): 436-440.

[36] Bartra J, García-Moral A, Enrique E. Geographical differences in food allergy [J]. Bundesgesundheitsblatt Gesundheitsforschung Gesundheitsschutz, 2016, 59 (6): 755-763.

[37] Scheurer S, Toda M, Vieths S.What makes an allergen[J]. Clin Exp Allergy, 2015, 45 (7): 1150-1161.

[38] Tanaka Y, Sugihara M, Tsumagari S, et al. Food-dependent exercise-induced anaphylaxis due to ingestion of mikan (Citrusunshiu) [J]. Arerugci, 2017, 66(8): 1011-1015.

[39] Fu L, Wang C, Wang Y. Seafood allergen-induced hypersensitivity at the microbiota-mucosal site: implications for prospective probiotic use in allergic response regulation [J]. Crit Rev Food Sci Nutr, 2017, 13: 1-14.

[40] Perrier C, Corthésy B. Gut permeability and food allergies [J]. Clin Exp Allergy, 2011, 41(1): 20-28.

[41] Wang Y H. Developing food allergy: a potential immunologic pathway linking skin barrier to gut [J]. F1000Res, 2016, 10: 5.

[42] Ruiter B, Shreffler W G. Innate immunostimulatory properties of allergens and their relevance to food allergy [J]. Semin Immunopathol, 2012, 34(5): 617-632.

[43] Lee J B. Regulation of IgE-mediated food allergy by IL-9 producing mucosal mast cells and type 2 innate lymphoid cells [J]. Immune Netw, 2016, 16(4): 211-218.

[44] Carrard A, Rizzuti D, Sokollik C. Update on food allergy [J]. Allergy, 2015, 70 (12): 1511-1520.

[45] Larsen L F, Juel-Berg N, Hansen K S, et al. A comparative study on basophil activation test, histamine release assay, and passive sensitization histamine release assay in the diagnosis of peanut allergy[J]. Allergy, 2017. doi: 10.1111/all.13243.

[46] Sternheim L C, Fisher M, Harrison A, et al. Predicting intolerance of uncertainty in individuals with eating disorder symptoms [J]. J Eat Disord, 2017, 5 (1) :26.

[47] Zivanovic M, Atanaskovi -Markovi M, Medjo B, et al. Evaluation of food allergy in children by skin prick tests with commercial extracts and fresh foods, specific IgE and, open oral food challenge-our five years experience in food allergy work-up [J]. Iran J Allergy Asthma Immunol, 2017, 16(2): 127-132.

[48] Mathelier-Fusade P. Interest of allergy tests in urticaria [J]. Ann Dermatol Venereol, 2014, 141(3): S565-S569.

[49] 李嬋. 梭子蟹過敏原分析及原肌球蛋白關(guān)鍵抗原表位重組表達[D]. 天津：天津醫(yī)科大學(xué), 2013.

[50] 李小燕, 李振興, 林洪, 等. 菲律賓蛤仔過敏原可視化抗體微陣列玻片的檢測方法[J]. 水產(chǎn)學(xué)報, 2010 (3): 422 - 427.

[51] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. SN/T 4417—2016中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[52] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. SN/T 4419.22—2016中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[53] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. SN/T 1961.10—2013中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2013.

[54] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. SN/T 1961.14—2013中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2013.

[55] 高永艷，陳欽再，郭桂萍, 等. 南美白對蝦主要過敏原原肌球蛋白的低過敏性處理方法研究[J]. 食品與生物技術(shù)學(xué)報, 2015, 34 (4): 413-419.

[56] 李穎暢, 王克超, 王亞麗. 水產(chǎn)品過敏原及其消減方法研究進展[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報, 2014, 5(4): 1033-1038.

[57] Li Z X, Lin H, Cao L M, et al. The influence of gamma irradiation on the allergenicity of shrimp (Penaeusvannamei) [J]. J Food Eng, 2007, 79(3): 945-949.

[58] 劉光明，余惠琳，黃秀秀, 等. 加工處理方式對蟹類原肌球蛋白的消化穩(wěn)定性和過敏原性的影響[J]. 中國食品學(xué)報, 2011, 11 (4): 14-22.

[59] Wu Z, Lian J, Zhao R, et al. Ara h 2 cross-linking catalyzed by MTGase decreases its allergenicity [J]. Food Funct, 2017, 8(3): 1195-1203.

[60] Abramovitch J B, Lopata A L, O’Hehir R E, et al. Effect of thermal processing on T cell reactivity of shellfish allergens - discordance with IgE reactivity [J]. PLoS One, 2017, 12 (3): e0173549.