何沅莉，單 葵，曹雨微，陳 偉（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科，重慶400016）

慢性蕁麻疹（CU）是皮膚科常見(jiàn)的變態(tài)反應(yīng)性疾病，因反復(fù)發(fā)作伴劇烈瘙癢，常嚴(yán)重影響患者正常工作和生活。其發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明，可能與免疫功能異常相關(guān)。有研究表明，輔助性T細(xì)胞（Th17）與部分自身免疫疾病有關(guān)[1]。本研究擬通過(guò)檢測(cè)與Th17細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子[白細(xì)胞介素-17（IL-17）、IL-23、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β（TGF-β）]水平，探討 Th17細(xì)胞在 CU 中的診斷作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2015年7月至2016年11月重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科收治的72例CU患者作為觀察組，其中男35例，女37例；年齡19～57歲，平均（39.16±10.27）歲。另選取健康體檢者20例作為對(duì)照組，其中男 10例，女 10例；年齡 25～53歲，平均（38.43±9.87）歲。兩組研究對(duì)象性別、年齡等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）風(fēng)團(tuán)反復(fù)發(fā)作6周以上，且每周至少2次或2 d癥狀發(fā)作。（2）排除其他物理性蕁麻疹。（3）無(wú)嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病，并在4周內(nèi)未使用過(guò)糖皮質(zhì)激素及其他免疫抑制劑，7 d內(nèi)未使用過(guò)抗組胺藥物治療。

1.1.2 試劑與儀器 IL-17酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒、IL-23 ELISA試劑盒、TGF-β ELISA試劑盒均選購(gòu)自依科賽生物科技（大倉(cāng)）有限公司，采用Spectra-Max plus384酶標(biāo)檢測(cè)。

1.2 方法 采集研究對(duì)象肘靜脈約5 mL置于肝素鈉抗凝管中，留取標(biāo)本30 min內(nèi)分離血漿，1 500 r/min離心8 min，用移液槍將血清移至EP管中，將EP管編號(hào)，置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)，采用雙抗體夾心ELISA測(cè)定血清中IL-17、IL-23、TGF-β水平，嚴(yán)格按照試劑盒的操作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)分析變量滿足正態(tài)分布時(shí)采用Pearson直線相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β水平比較 觀察組患者血清 IL-17、IL-23、TGF-β水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比較（±s）

表1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比較（±s）

注：-表示無(wú)此項(xiàng)

組別 IL-17（pg/mL）觀察組對(duì)照組IL-23（pg/mL）23.85±19.76 9.66±2.49 5.605 0.000 n 72 20 tP--3.32±1.27 1.89±0.74 6.232 0.000 TGF-β（ng/mL）39.95±17.90 25.55±12.77 3.362 0.001

2.2 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間相關(guān)性分析 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。見(jiàn)表 2。

表2 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間相關(guān)性分析

3 討 論

CU主要表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的風(fēng)團(tuán)和（或）血管性水腫，常伴明顯瘙癢，病程超過(guò)6周。CU可見(jiàn)于任何年齡，多發(fā)于20～40歲青年人，超過(guò)1/2的CU患者伴中度以上瘙癢，1/5患者可伴血管性水腫，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[2]。CU病因復(fù)雜，可能病因?yàn)榧毙耘c慢性感染，食物、藥物過(guò)敏及自身免疫異常等。有研究發(fā)現(xiàn)，CU患者血清中不僅存在甲狀腺自身抗體，同時(shí)存在抗高親和力血清免疫球蛋白E（IgE）受體自身抗體和功能性IgE抗體[3-4]，越來(lái)越多學(xué)者認(rèn)為，CU為自身免疫性疾病。而KRYCZEK等[5]發(fā)現(xiàn)，Th1和Th17細(xì)胞可協(xié)同作用于人類自身免疫性疾病。本研究擬通過(guò)檢測(cè)與Th17細(xì)胞密切相關(guān)的IL-17、IL-23、TGF-β水平，探討Th17細(xì)胞在CU的診斷作用。

TGF-β是單核-巨噬細(xì)胞分泌的具有多種生物活動(dòng)的多肽調(diào)節(jié)因子，在機(jī)體免疫防御中有重要作用。初始CD4+T細(xì)胞接受抗原刺激后，在血清中TGF-β單獨(dú)存在的條件下被誘導(dǎo)分化為T(mén)reg細(xì)胞，在TGF-β和IL-6共同存在的條件下被誘導(dǎo)分化為T(mén)h17細(xì)胞[6]。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)TGF-β與CU的關(guān)系鮮有報(bào)道。TAVAKOL等[7]觀察到TGF-β基因的遺傳變異與CU的發(fā)病有關(guān)，而CU患者基因型傾向于高產(chǎn)TGF-β。本研究發(fā)現(xiàn)，CU患者血清中TGF-β水平明顯高于對(duì)照組，從側(cè)面證實(shí)了的 TAVAKOL 等[7]的研究結(jié)果。ALASANDAGUTTI等[8]、KASPERSKA-ZAJAC等[9]觀察到CU患者血清中IL-6及IL-6受體水平明顯升高?？赏茰y(cè)TGF-β通過(guò)誘導(dǎo)初始CD4+T細(xì)胞分化為T(mén)h17細(xì)胞參與了CU的發(fā)生。

IL-23是巨噬細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，是Th17細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)程中的關(guān)鍵性細(xì)胞因子，對(duì)其存活及功能維持起至關(guān)重要作用，而對(duì)Treg細(xì)胞則具有抑制作用[10-12]。有研究顯示，一些自身免疫性疾病的發(fā)病與IL-23的升高有關(guān)，如銀屑病、皮肌炎、炎癥性腸病等[13-15]。IL-23主要通過(guò)維持Th17細(xì)胞功能及誘導(dǎo)IL-17的產(chǎn)生，從而促進(jìn)炎性反應(yīng)的發(fā)生[16-17]。IL-17由Th17細(xì)胞分泌，可以通過(guò)NF-кB通路刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生前列腺素E2、IL-6、IL-8等細(xì)胞因子和趨化因子，直接或間接引起變態(tài)反應(yīng)。同時(shí)，IL-17可以與腫瘤壞死因子α、干擾素γ等產(chǎn)生協(xié)同作用以放大炎性反應(yīng)，誘導(dǎo)自身免疫性疾病和慢性過(guò)敏性疾病的發(fā)生[18]。在健康人的血清中可以檢測(cè)到低水平的IL-17、IL-23，而在一些變態(tài)反應(yīng)性疾病中卻顯著增加，如變應(yīng)性鼻炎[19]、特應(yīng)性皮炎[20]等，其外周血中Th17細(xì)胞IL-17水平均高于健康對(duì)照組，且與疾病的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性。而ATWA等[21]也發(fā)現(xiàn)，CU患者血清中IL-17、IL-23水平高于對(duì)照組，且與疾病嚴(yán)重程度成正比，與本研究結(jié)果相符。

綜上所述，Th17 細(xì)胞通過(guò) IL-17、IL-23、TGF-β 3 種細(xì)胞因子參與了CU的發(fā)病過(guò)程，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CU患者用藥前后3種因子及Th17細(xì)胞的變化，也許將來(lái)可以此作為靶點(diǎn)為CU的治療提供新的方向或?qū)⑵溆米髋袛郈U的預(yù)后。本研究也存在一些缺陷，如未對(duì)觀察組進(jìn)行病情程度分級(jí)并分析其是否與3種因子存在相關(guān)性，兩組人數(shù)差距大，大多數(shù)患者既往用藥不詳，不能徹底排除藥物對(duì)IL-17、IL-23、TGF-β的影響等，有待今后擴(kuò)大樣本進(jìn)一步深入研究。

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