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        賽鴿感染新城疫的診斷及抗體水平檢測*

        2018-02-19 07:25:04李婷婷劉華棟陸冰洋唐娟王彩先丁樹榮詹麗娥
        中國動物保健 2018年11期
        關鍵詞:賽鴿鴿群新城疫

        李婷婷,劉華棟,陸冰洋,唐娟,王彩先,丁樹榮,詹麗娥

        (山西省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 太原 030032)

        鴿新城疫又稱鴿I型副粘病毒病或鴿瘟,是由鴿I型副粘病毒(Pigeon Paramyxovirus 1,PPMV-I)引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。鴿新城疫與雞新城疫的病原和臨床癥狀十分相似,PPMV-I傳播迅速,主要通過呼吸道和消化道傳播,一年四季均可發(fā)生,不同年齡、品種的鴿都易感,發(fā)病率100%,死亡率80%以上。主要臨床表現(xiàn)為胃腸道出血、嚴重腹瀉和神經癥狀。鴿群一旦感染PPMV-I后,其神經癥狀將嚴重影響賽鴿的飛行功能,使賽鴿失去比賽的資格。鴿新城疫對養(yǎng)鴿業(yè)造成巨大威脅和損失,是養(yǎng)鴿業(yè)重點防控的傳染病之一。

        2018年7月下旬,山西省忻州市某賽鴿公棚從一養(yǎng)殖戶處收340羽賽鴿,其中部分賽鴿陸續(xù)出現(xiàn)精神不振、采食量減少、飲水量增加、拉黃綠色水樣稀糞、扭頸、斜翅等癥狀,5d開始出現(xiàn)死亡,養(yǎng)殖戶緊急前來就診。為了及時查明該病發(fā)生的原因,減少對養(yǎng)殖戶的損失,經過流行病學、臨床癥狀、病理剖檢、PCR鑒定和抗體檢測等綜合診斷,確診為感染鴿新城疫。

        1 發(fā)病情況

        發(fā)病初期病鴿精神不振、羽毛蓬亂無光澤、食欲減退、飲水增加,部分病鴿呼嚕、咳嗽、呼吸困難,排黃綠色水樣稀便。后期個別鴿呈現(xiàn)神經癥狀,頭頸向背后扭曲、不能站立、雙翅下垂。

        表1 鴿新城疫抗體效價統(tǒng)計表

        剖檢病變主要集中在消化道,腺胃乳頭腫脹、出血,腺胃與肌胃交界處出血;十二指腸黏膜出血、水腫,盲腸扁桃體腫大、出血。呼吸道有卡他性炎癥,喉頭、氣管中有漿液性或卡他性滲出物,氣管出血。

        2 實驗室診斷

        2.1 抗體檢測

        鴿群中隨機采集21份血液進行抗體檢測,按照《新城疫診斷技術》(GB/T16550—2008)規(guī)定方法進行血凝抑制試驗(HI),檢測待檢賽鴿血清的新城疫抗體效價。HI抗體效價≥5log2時免疫效果良好,判定為合格。檢測結果由表1可知,該賽鴿公棚的新城疫抗體效價水平低且離散度大,21份被檢樣品中僅有11份樣品HI抗體效價≥5log2,免疫合格率僅為52.4%。

        2.2 RT-PCR鑒定

        根據該賽鴿公棚鴿群疫病流行特征,結合發(fā)病情況、剖檢病變及血清抗體檢測結果,采集病死鴿的肺臟、脾臟組織,使用購自北京世紀元亨生物技術有限公司的“新城疫病毒通用型RT-PCR檢測試劑盒”檢測PPMV-I。

        2.2.1 病毒RNA的提取 取肺臟、脾臟組織各1g,剪碎混勻后取0.05g混合物,加入1.5mL生理鹽水進行研磨。8,000rpm離心2min后,取上清液100μL于新的離心管中,按照試劑盒使用說明書,經過裂解、吸附、洗滌、洗脫后得到模板RNA備用。

        2.2.2 RT-PCR擴增及電泳 取無菌的PCR反應管,根據反應配置體系,分別加入RT-PCR反應液、酶混合液和模板RNA,混合均勻成20μL體系,置于熒光PCR儀中。PCR擴增程序為:42℃ 45min,94℃ 3min;循環(huán)94℃ 30s,55℃30s,72℃ 30s,共35次;最后72℃延伸7min。PCR擴增產物在110V電壓下使用1.5%的瓊脂糖凝膠電泳檢測,結果見圖1。

        由圖1可見,陽性對照出現(xiàn)362bp擴增帶。被檢測樣品1與陽性對照一致,在362bp出現(xiàn)擴增帶,可判定為鴿I型副粘病毒陽性。

        3 結果與診斷

        通過PCR鑒定,結合臨床癥狀、病理剖檢變化和抗體水平檢測得出,該賽鴿公棚感染鴿新城疫。

        4 防治措施

        4.1 賽鴿公棚采取的緊急措施

        針對試驗結果,迅速將發(fā)病鴿群進行隔離飼養(yǎng),淘汰出現(xiàn)神經癥狀的重病鴿,無害化處理所有病死鴿、淘汰鴿及其糞便和飼料。并應用1/100濃度的百毒殺和1/25濃度的碘伏兩種消毒劑,每天輪流對養(yǎng)殖環(huán)境和養(yǎng)殖工具進行全面徹底的噴灑消毒,用以殺滅細菌,抑制病毒增殖,防治疫情擴散和蔓延。待病情控制后,改為1周消毒1次。

        同時,全棚賽鴿緊急接種新城疫克隆C30株疫苗2倍劑量點眼。發(fā)病鴿群飼料中添加丁胺卡那霉素,飲水中交替添加黃芪多糖及電解多維,以提高鴿群免疫力,預防繼發(fā)感染,使用至疫情得到控制為止。

        經過該方案治療5d后,鴿群沒有再出現(xiàn)死亡現(xiàn)象,臨床癥狀較輕的賽鴿癥狀也逐漸減輕。11d后全群采食正常,精神狀態(tài)良好,疫情得到控制,鴿群基本痊愈。

        4.2 平日預防工作

        賽鴿公棚要做好平時衛(wèi)生防疫工作。定期對鴿舍、飼養(yǎng)場地和飼養(yǎng)用具開展消毒。新收賽鴿應作好檢疫工作,并隔離觀察2周以上。飼養(yǎng)人員進出鴿場必須嚴格消毒,飼料和飲水也應定期檢測。

        建立合理的免疫程序和免疫監(jiān)測制度。選擇正確的疫苗,并定期檢測鴿群的新城疫抗體水平,對于抗體水平較低或者抗體水平參差不齊的情況要及時補種。

        5 討論

        隨著我國養(yǎng)鴿業(yè)不斷擴展,鴿I型副粘病毒病在全國多地都有流行發(fā)生,肉鴿、信鴿和賽鴿等各類鴿子均可感染發(fā)病,不同年齡的鴿都有感染性,而乳鴿的易感性最高,其發(fā)病率和死亡率都很高。新城疫在世界上曾有過四次大流行,其中第三次大流行始于20世紀70年代末的中東地區(qū),后迅速傳播到歐洲并造成20世紀80年代初的大流行,主要為嗜神經型,而這次流行正是由種鴿傳播引起的。鴿Ⅰ型副粘病毒被認為是經典新城疫病毒的變異株,最近幾年,該病毒在全世界范圍內很多國家分離到,說明自從20世紀80年代以來該病毒已經在全世界范圍內長期存在和流行[1]。因此,鴿Ⅰ型副粘病毒的流行對養(yǎng)鴿業(yè)甚至養(yǎng)禽業(yè)都有巨大的威脅和損失,成為危害禽類的一種最主要的疾病。

        賽鴿公棚的養(yǎng)殖模式與種鴿或肉鴿場不同,每年春季或秋季會從不同養(yǎng)殖戶收購幼鴿,集中飼養(yǎng)、訓練后參加秋季或春季的比賽。多數賽鴿養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖的種鴿或幼鴿免疫工作不到位,抗體水平參差不齊,造成鴿新城疫潛伏感染嚴重。本試驗中該賽鴿公棚不關注免疫效果,在收購幼鴿后用LaSota滅活疫苗免疫鴿群后未檢測抗體效價,從而造成免疫失敗,未能起到有效的保護作用。因此,賽鴿公棚需嚴格執(zhí)行合理的免疫程序和免疫監(jiān)測制度,定期檢測鴿群的新城疫抗體水平。

        圖1 新城疫RT-PCR檢測結果

        目前,鴿新城疫的防治主要依靠免疫接種疫苗,但是在實際應用中,大量養(yǎng)殖戶用雞新城疫疫苗免疫鴿群。雖然,鴿副粘病毒病和雞新城疫病毒存在著很高的交叉反應,但是有研究表明,現(xiàn)有的雞新城疫疫苗株并不能有效的保護鴿群免受PPMV-I的感染。因此,實際應用中亟待研發(fā)專用的鴿新城疫疫苗,有效防治鴿新城疫感染?!?/p>

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