田志軍

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所，黑龍江 哈爾濱 150069）

重要?jiǎng)游镆卟艋瘜?duì)提高我國(guó)養(yǎng)殖水平，提高我國(guó)動(dòng)物產(chǎn)品的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力意義重大。2012年國(guó)家出臺(tái)了《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012～2020年）》，規(guī)劃提出有計(jì)劃地控制、凈化和消滅嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民群眾健康安全的動(dòng)物疫病。動(dòng)物疫病的凈化一般分為三個(gè)階段：第一階段為免疫控制階段（該階段以通過免疫降低臨床發(fā)病率、減少經(jīng)濟(jì)損失為主），第二階段為免疫凈化階段（該階段在有效控制疫病的發(fā)生后，采取逐步淘汰陽性感染動(dòng)物，建立陰性種群，達(dá)到免疫無疫狀態(tài)），第三階段為凈化根除階段（該階段以不免疫、抗體監(jiān)測(cè)為主，最終達(dá)到在一定區(qū)域內(nèi)根除該疫?。?。我國(guó)現(xiàn)階段主要?jiǎng)游镆卟〉姆揽剡€處于第一階段，而在免疫狀態(tài)下開展疫病凈化工作的主要困難是缺乏成熟的抗體鑒別診斷技術(shù)，由于缺乏抗體鑒別診斷技術(shù)，無法通過抗體檢測(cè)對(duì)疫病野毒感染狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，而只能通過活體采樣進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)來判斷疫病野毒感染狀況，而活體采樣（例如豬瘟病原學(xué)檢測(cè)需要采集豬的扁桃體）檢測(cè)方法操作困難、費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，大部分養(yǎng)殖者不愿意采取這種方法凈化疫病，且采取這種方式的疫病凈化驗(yàn)收工作也難以操作，進(jìn)而影響了養(yǎng)殖場(chǎng)開展疫病凈化工作的積極性。我國(guó)現(xiàn)階段使用的動(dòng)物疫苗中只有豬偽狂犬病疫苗具有相配套的成熟抗體鑒別診斷技術(shù)，而豬偽狂犬病也是目前免疫凈化工作開展較好的一個(gè)疫病，是我國(guó)動(dòng)物疫病凈化的一個(gè)范例。

因此我國(guó)在免疫狀態(tài)下開展動(dòng)物疫病凈化工作的最主要技術(shù)瓶頸是缺乏相應(yīng)成熟的抗體鑒別診斷技術(shù)，如何在現(xiàn)有技術(shù)條件下突破這個(gè)技術(shù)瓶頸來推動(dòng)我國(guó)動(dòng)物疫病凈化工作的開展，作者現(xiàn)將“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的原理及其替代鑒別診斷技術(shù)在動(dòng)物疫病免疫凈化中應(yīng)用的可行性作一探討，供大家參考。

1 “哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的原理

對(duì)生長(zhǎng)群動(dòng)物和后備種群動(dòng)物設(shè)定一定比例的新生動(dòng)物作為“哨兵動(dòng)物”，這些動(dòng)物不免疫某種疫病相應(yīng)的疫苗，在母源抗體消失后的1～2個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)“哨兵動(dòng)物”進(jìn)行相應(yīng)疫病的抗體監(jiān)測(cè)，此時(shí)的抗體陽轉(zhuǎn)即代表該養(yǎng)殖場(chǎng)存在相應(yīng)疫病的野毒感染，可通過此方法替代抗體鑒別診斷技術(shù)在免疫狀態(tài)下達(dá)到檢測(cè)野毒感染目的，我們建議選擇商品動(dòng)物上市前1～2周左右、后備種群動(dòng)物在配種前1～2周左右作為“哨兵動(dòng)物”抗體的監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)，最大限度發(fā)揮“哨兵動(dòng)物”的監(jiān)測(cè)時(shí)間范圍。以豬瘟為例：對(duì)育肥豬群和后備種豬群設(shè)定一定比例（5%～10%）新生仔豬作為“哨兵豬”，這些豬不免疫豬瘟弱毒疫苗，在母源抗體消失后的1～2個(gè)時(shí)間點(diǎn)（根據(jù)我們的研究一般情況下仔豬出生后8～12周，豬瘟母源抗體就基本消失了）對(duì)“哨兵豬”進(jìn)行豬瘟抗體監(jiān)測(cè)，此時(shí)的抗體陽轉(zhuǎn)即代表豬場(chǎng)存在豬瘟野毒感染，選擇商品豬出欄前1周左右、后備種豬配種前1周左右（即出生25周以后）作為“哨兵豬”豬瘟抗體的監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)，最大限度發(fā)揮“哨兵豬”的監(jiān)測(cè)豬場(chǎng)豬瘟野毒感染的時(shí)間范圍。

2 “哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的可行性

“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的應(yīng)用范圍主要包括某種疫病經(jīng)過多年免疫，發(fā)病率較低（如豬瘟、雞新城疫等疫?。?，免疫的疫苗不存在水平傳播能力或傳播能力低（滅活疫苗：口蹄疫滅活疫苗、雞新城疫滅活疫苗、禽流感滅活疫苗；弱毒疫苗：豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗等）以上這些疫病適用于“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)開展疫病凈化工作。以豬瘟為例：我國(guó)目前豬瘟免疫密度高（規(guī)?；i場(chǎng)免疫接近100%）、發(fā)病率低，豬瘟弱毒疫苗幾乎沒有水平傳播能力。因此豬場(chǎng)即使預(yù)留5%～10%的非免疫豬，豬群的總體免疫密度仍大于80%，“哨兵豬”群暴發(fā)豬瘟概率較低，哨兵豬前期受母源抗體保護(hù)，過了監(jiān)測(cè)期繼續(xù)使用的種豬可免疫豬瘟疫苗，因此豬場(chǎng)內(nèi)對(duì)豬瘟易感的“哨兵豬”數(shù)量相對(duì)有限；另外豬場(chǎng)制定相應(yīng)的預(yù)案，“哨兵豬”群如有豬瘟發(fā)生可緊急處置?；谝陨显颉吧诒鴦?dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的應(yīng)用具有可行性。

3 “哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)在凈化中的應(yīng)用

3.1 指導(dǎo)養(yǎng)殖場(chǎng)根據(jù)野毒的流行狀況制定免疫程序

通過“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)定期監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)某種疫病野毒的流行狀況，根據(jù)野毒流行狀況將養(yǎng)殖場(chǎng)分為野毒流行場(chǎng)、野毒低流行場(chǎng)和野毒不流行場(chǎng)，不同狀況采取不同的免疫程序，使疫苗的免疫強(qiáng)度與野毒的流行強(qiáng)度一致。由于缺乏疫病野毒流行狀況的監(jiān)測(cè)技術(shù)，目前我國(guó)大部分養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)某種疫病免疫程序的制定并不是根據(jù)疫病野毒在養(yǎng)殖場(chǎng)流行狀況來制定的，許多養(yǎng)殖場(chǎng)存在過度免疫的現(xiàn)狀，表現(xiàn)為疫苗免疫種類過多、免疫次數(shù)過頻，浪費(fèi)了許多人力和物力?！吧诒鴦?dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)可以指導(dǎo)養(yǎng)殖場(chǎng)根據(jù)野毒的流行狀況制定針對(duì)性的免疫程序，將大大節(jié)省養(yǎng)殖場(chǎng)的疫苗使用量，達(dá)到“減針減負(fù)”目的。另外通過對(duì)野毒在養(yǎng)殖場(chǎng)流行強(qiáng)度的監(jiān)測(cè)來評(píng)價(jià)疫苗的免疫效果，當(dāng)疫病得到有效控制一段時(shí)間后，指導(dǎo)養(yǎng)殖場(chǎng)由免疫控制階段向免疫凈化階段轉(zhuǎn)變。

3.2 指導(dǎo)制定以“野毒抗體監(jiān)測(cè)為主，病原學(xué)檢測(cè)為輔”為主導(dǎo)的疫病凈化驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，推動(dòng)疫病凈化工作的開展

科學(xué)、合理的制定疫病凈化驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)對(duì)推動(dòng)疫病凈化工作的開展十分重要，如果一個(gè)疫病凈化標(biāo)準(zhǔn)以“病原學(xué)檢測(cè)、高合格率免疫抗體指標(biāo)為主”，那么該疫病凈化方案的實(shí)施及凈化驗(yàn)收的可操作性就比較差，進(jìn)而影響?zhàn)B殖場(chǎng)開展凈化工作和凈化驗(yàn)收的積極性。而“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)由于有效解決了養(yǎng)殖場(chǎng)監(jiān)測(cè)野毒感染的難題，使疫病凈化標(biāo)準(zhǔn)制定得以向“野毒抗體監(jiān)測(cè)為主、制定合理的免疫抗體合格指標(biāo)”為主導(dǎo)的指標(biāo)轉(zhuǎn)變，這種凈化指標(biāo)可操作性強(qiáng)、省時(shí)、省力、凈化結(jié)果易于判定，養(yǎng)殖場(chǎng)易于接受，隨著“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的完善和推廣將極大促進(jìn)和推動(dòng)養(yǎng)殖場(chǎng)疫病凈化的積極性。

以豬瘟為例，現(xiàn)有豬瘟免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)：（1）生產(chǎn)母豬、后備種豬抽檢，豬瘟病毒抗體陽性率90%以上（由于豬瘟疫苗免疫抗體與強(qiáng)毒抗體之間存在較大差異，豬瘟弱毒疫苗（C株）誘導(dǎo)抗體能力弱，在沒有豬瘟野毒感染情況下，豬場(chǎng)要獲得豬瘟疫苗抗體的高合格率（≥90%）只有經(jīng)過頻繁、大劑量多次免疫才能獲得；而在一個(gè)沒有豬瘟野毒感染的豬場(chǎng)，通過高強(qiáng)度免疫來獲得免疫抗體的高合格率是不可取的，我們凈化豬瘟的目的是少打疫苗，做到“減針減負(fù)”目的，因此需要制定合理的豬瘟免疫抗體合格指標(biāo)）；（2）種公豬、生產(chǎn)母豬和后備種豬抽檢，豬瘟病原學(xué)檢測(cè)均為陰性；（3）連續(xù)2年以上無臨床病例。

而應(yīng)用“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)后豬瘟免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)可以定義為：（1）連續(xù)2年以上“哨兵豬”血清抗體監(jiān)測(cè)陰性，無臨床病例或疑似豬瘟病例病原學(xué)檢測(cè)陰性；（2）生產(chǎn)母豬、后備種豬抽檢，豬瘟病毒抗體陽性率（合理的指標(biāo)）。該豬瘟凈化驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)將使豬瘟凈化方案的可操作性增強(qiáng)，凈化成本降低，將極大提高豬場(chǎng)凈化豬瘟的積極性。

“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)的創(chuàng)新應(yīng)用是我們近幾年在疫病凈化實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)問題后經(jīng)過研究、總結(jié)后提出的，并在一定范圍內(nèi)進(jìn)行了實(shí)踐，該技術(shù)尚有許多不足和待完善之處，還未經(jīng)過大范圍應(yīng)用和檢驗(yàn)。動(dòng)物疫病凈化工作已是未來我國(guó)獸醫(yī)工作的重點(diǎn)，我們希望“哨兵動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)法”技術(shù)能夠?qū)氖聞?dòng)物疫病凈化的獸醫(yī)工作者和管理者提供一些有益的幫助，在疫病凈化中不斷改進(jìn)和完善該技術(shù)。