王國勝，丁 寧，肖琦詩，江禮華

（河源海關（原河源出入境檢驗檢疫局），廣東 河源 517000）

氟蟲腈，英文通用名為fipronil，商品名Regent銳勁特，化學名稱：（RS）-5- 氨基 -1-（2，6- 二氯 -a，a，a- 三氟 - 對 - 甲苯基）-4-三氟甲基亞磺?；吝?3-腈，是一種苯基吡唑類殺蟲劑?；钚愿撸瑧梅秶鷱V，對半翅目、纓翅目、鞘翅目、鱗翅目等害蟲及菊酯類、氨基甲酸酯類殺蟲劑已產(chǎn)生抗性害蟲也顯示極高敏感性。因氟蟲腈為GABA-氯離子通道抑制劑，與現(xiàn)有殺蟲劑無交互抗性，對有機磷、有機氯、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯等類殺蟲劑已經(jīng)產(chǎn)生抗性的或敏感的害蟲均有較好的防治效果。多適用于水稻、香蕉、玉米、馬鈴薯、棉花、花生、甜菜等作物的病蟲害防治，對蟑螂、螞蟻等衛(wèi)生害蟲的防治效果也較為明顯。雖然氟蟲腈有較好的殺蟲效果，但其對環(huán)境極其不友好，對農(nóng)作物周圍的蝴蝶、蜻蜓等造成不良影響，研究表明，氟蟲腈在生物體脂肪內(nèi)還有富集作用，在水和土壤中降解緩慢，且該藥具有慢性神經(jīng)毒性作用，被定為C類致癌物質(zhì)。我國規(guī)定2009年10月1日起禁用氟蟲腈，目前僅有部分家庭用衛(wèi)生害蟲除蟲劑含有氟蟲腈成分。2017年8月初，歐洲被暴出“毒雞蛋”事件，全世界將矛頭再一次指向氟蟲腈。目前對于氟蟲腈的檢測主要有快速定性檢測和實驗室定量檢測兩大類。本文就氟蟲腈檢測方法的研究與進展這一問題展開深入分析。

1 氟蟲腈的快速定性分析方法

1.1 量子點免疫層析法 該方法采用水相合成法制備量子點，利用量子點本身含有的親水基團與氟蟲腈抗體結合形成量子點標記抗體，將量子點標記抗體吸附于玻璃纖維棉上，一端與固定有氟蟲腈-蛋白質(zhì)偶連物 （檢測線）和二抗 （或SPA）（質(zhì)控線）的硝酸纖維素（NC）膜相連，另一端與吸附纖維層相連。而后連同其它所需的吸水纖維、支撐材料、覆蓋材料等按照設計工藝進行制作和組裝，制成快速檢測試紙。通過在紫外光下，觀察量子點標記抗體與氟蟲腈蛋白質(zhì)偶連物反應的情況分辨待檢樣品是否存在氟蟲腈及其代謝產(chǎn)物，檢測時間僅需數(shù)分鐘。該方法還具有發(fā)光性好、分辨率高、生物兼容性強、便于操作的特點，但該方法僅適用于定性分析。

1.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA法） 酶聯(lián)免疫吸附方法是一種特異性高、靈敏度高、準確度高、操作簡單，并能用于大批量樣品快速檢測的檢測方法。目前市場有采用多克隆抗體、單克隆抗體、納米抗體的多種ELISA檢測試劑盒。該方法將經(jīng)過簡單前處理的待測樣品和抗體依次加入包被有抗原的酶標板，抗原和待測氟蟲腈相互競爭與抗體反應，由于每個孔中的抗原和加入的抗體含量均一致，因此當待測的氟蟲腈濃度高時，則被結合在抗原上的抗體少，加入的酶標二抗與被固定抗體結合量固然就少，最后在底物與顯色液的作用下，顯色反應淺，用酶標儀檢測的OD值低，表明抑制率高；反之OD值高，抑制率低。酶聯(lián)免疫方法能夠準確靈敏地檢測氟蟲腈殘留，樣品的前處理過程簡單，用時較低，但是該實驗所需抗體制備比較困難，且必須要在配備有酶標儀的實驗室進行，檢測數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性較低。

2 實驗室定量檢測方法

2.1 氣相色譜法 氣相色譜法是指用氣體作為流動相的色譜法。由于樣品在氣相中傳遞速度快，因此樣品組分在流動相和固定相之間可以瞬間地達到平衡。另外加上可選作固定相的物質(zhì)很多，因此氣相色譜法是一個分析速度快和分離效率高的分離分析方法。氟蟲腈檢測通常采用ECD檢測器進行，該方法可以實現(xiàn)對谷物、茶葉和蔬菜水果等農(nóng)產(chǎn)品中氟蟲腈及其代謝產(chǎn)物的檢測并獲得良好的靈敏度。研究表明使用 μECD對茶葉中氟蟲腈殘留量的檢測方法定量檢出限可達到 0.0008mg/kg和而對大米中氟蟲腈殘留量的檢測方法定量檢出限可達到0.010mg/kg，其獲得的定量檢出限將能滿足各種法規(guī)標準的要求。但氣相色譜法僅通過保留時間來進行定性，在遇到干擾的情況難以進行準確定性，所以在遇到陽性樣品需要進行進一步通過其他方法進行確認。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是聯(lián)合氣相色譜對有機化合物有效的分離、分辨能力和質(zhì)譜準確鑒定化合物的能力，在計算機操控下，直接用氣相色譜分離復雜的混合物（如原油、巖石抽提物）樣品，使其中的化合物逐個地進入質(zhì)譜儀的離子源，采用多種方法使樣品中所有的化合物離子化，繼而進行檢測的技術。該方法具有較高的靈敏度和分辨能力，研究表明采用固相微萃取的方式處理后的樣品經(jīng)定性后檢測，氟蟲腈在土壤樣品的的檢出限可以到0.009mg/kg，在人體尿液中的的檢出限可以達到0.7ng/mL。出入境行業(yè)標準中樣品用混合溶劑進行洗脫，以NCI-SIM模式進行檢測，采用m/z 366，368，400，333作為特征離子，外標法定量，有效避免干擾，提高了靈敏度，氟蟲腈在0.001～0.200mg/L范圍內(nèi)線性良好，其檢測低限為0.002mg/kg。同時榮杰峰等人也采用電子轟擊（EI）源，選擇離子監(jiān)測模式進行測定，按照保留時間及監(jiān)測離子（m/z）367，369，351 的豐度比對氟蟲腈進行確證，避免了采用氣相色譜法可能因干擾而無法確證的情況，同時根據(jù)定量離子（m/z）367進行外標法定量。使用氣相色譜質(zhì)譜法具有操作簡單、檢測靈敏度高、重現(xiàn)性好、干擾小且便于推廣使用等優(yōu)點。

2.3 高效液相色譜法 高效液相法是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上，以液體為流動相，采用多種形式的固定相，在壓力的作用下，使流動相在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)?，F(xiàn)行標準多是使用高校液相色譜對農(nóng)藥原藥的成分進行分析，對與日常食品農(nóng)產(chǎn)品的檢測應用較少。

2.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法結合了液相色譜儀有效分離熱不穩(wěn)性及高沸點化合物的分離能力與質(zhì)譜儀很強的組分鑒定能力，是一種分離分析復雜有機混合物的有效手段。樣品試用乙腈提取，然后過弗羅里硅土柱進行固相萃取分離，經(jīng)二氯甲烷－甲醇 （9∶1，V/V）進行洗脫，可獲得非常好的靈敏度與回收率。

3 總結

通過科研工作者的不懈努力，已經(jīng)研發(fā)了多種適用不同需求的檢測方法，一線執(zhí)法管理部門可以采用量子點試紙法，在執(zhí)法現(xiàn)場對樣品進行現(xiàn)場初篩，方便快捷。技術水平較弱的實驗室可以采用酶聯(lián)免疫方法對氟蟲凈樣品進行半定量分析。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測靈敏度高，檢測結果穩(wěn)定可靠，但是對設備及人員技術要求較高。食品安全于天，隨著科技發(fā)展的進步，檢測方法將會更加準確、靈敏、便捷。