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(山東煙臺(tái)市牟平區(qū)水道鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東 煙臺(tái) 264109)
雞球蟲病是一種比較常見的寄生性原蟲病,因?yàn)轫攺?fù)器門艾美耳是球蟲感染雞而導(dǎo)致的。全世界養(yǎng)雞業(yè)均因?yàn)榍蛳x病而受到巨大損失。
球蟲病強(qiáng)毒疫苗是人們從野外分離出來的一種強(qiáng)毒。這種疫苗的制備是直接從自然發(fā)病的雞體內(nèi)提取糞便飽和食鹽水漂浮法,對(duì)球蟲卵囊進(jìn)行收集。然后使用但卵囊分離方式,對(duì)艾美耳球蟲卵囊進(jìn)行收集和增殖,然后結(jié)合相應(yīng)比例進(jìn)項(xiàng)混合,添加相應(yīng)的穩(wěn)定劑,從而組成強(qiáng)毒活疫苗。
雞球蟲病弱毒疫苗主要是借助人工方式,對(duì)雞艾美耳球蟲致病能力減弱,但是能夠保持原有的免疫性。近年來,人們借助雞胚傳代致弱和早熟選育等方式對(duì)球蟲并弱毒疫苗進(jìn)行研制。
核酸疫苗也被稱作DNA疫苗,該疫苗主要是將外源基因參入到真核所表達(dá)的載體中,建立并且重組質(zhì)粒,然后將其直接向動(dòng)物體內(nèi)注射,通過這種方式,促使存在免疫性的二代白抗原基因可以在動(dòng)物體內(nèi)直接表達(dá)。借助這一方式而表達(dá)的蛋白和原核表達(dá)的蛋白相比,可以達(dá)到正確為的折疊,更加接近天然構(gòu)象,同時(shí)也可以被免疫系統(tǒng)進(jìn)行識(shí)別,最終實(shí)現(xiàn)免疫保護(hù)的效果[1]。
經(jīng)過研究顯示,SO7免疫雛雞之后,可以對(duì)雛雞機(jī)體進(jìn)行誘導(dǎo),從而產(chǎn)生比較強(qiáng)的免疫保護(hù)能力。此時(shí)免疫雞盲腸病變有所減輕,從而產(chǎn)生相對(duì)較強(qiáng)的免疫保護(hù)力。免疫雞盲腸病變減輕,同時(shí)其相對(duì)體重增加,均優(yōu)于活卵囊以及重組蛋白抗原免疫雞。
Hsp屬于一種相對(duì)普遍存在的糖蛋白,該種糖蛋白主要在細(xì)胞質(zhì)以及線粒體當(dāng)中,參與到蛋白質(zhì)的生物合成當(dāng)中,折疊和分泌。Hsp70是一種巨型艾美耳球蟲孢子階段抗原,其具備相對(duì)有效的免疫原性,對(duì)巨型艾美耳蟲具有良好效果。
TA4是一種子孢子表面抗原,其相對(duì)分子質(zhì)量是25 000,但是在蟲的體內(nèi),存在的相對(duì)分子質(zhì)量大約在21 000~28 000。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),TA4蛋白對(duì)于雞球蟲有較高的免疫作用和保護(hù)作用[2]。
亞單位疫苗就是將不能激發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的,或者對(duì)機(jī)體有害的成分去除,然后使用具有免疫原性的部分對(duì)疫苗進(jìn)行制備。使用配子體抗原進(jìn)行免疫,可以對(duì)球蟲病進(jìn)行有效免疫。當(dāng)下,市售配子體亞單位疫苗COX-ABIC能夠促使球蟲卵囊的產(chǎn)量下降達(dá)50%-80%,因此可以應(yīng)用在球蟲的控制中。有學(xué)者試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),SO7-沙門菌重組口腔免疫3周齡白來航雞,2周后可以監(jiān)測(cè)到SO7特異性抗體,其體內(nèi)抗體水平可以維持6周。
基因重組卡介疫苗主要是對(duì)外源基因進(jìn)行導(dǎo)入,進(jìn)入到BCG中,建立起多價(jià)疫苗,可以使用BCG活疫苗特性,對(duì)長(zhǎng)期體液免疫以及細(xì)胞免疫進(jìn)行誘導(dǎo),從而高效表達(dá)球蟲蛋白,通過這種方式能夠所表達(dá)的蛋白可以發(fā)揮較為良好的免疫能力,實(shí)現(xiàn)更好的預(yù)防擊球蟲病的目的。這種情況下,可以發(fā)展成為一種經(jīng)濟(jì)有效的新型疫苗。
在我國(guó),第一次對(duì)重組卡介疫苗應(yīng)用在雞球蟲病的昂中,對(duì)E.tenella rhomboid基因克隆島穿梭表達(dá)載體Pmv261以及整合表達(dá)載體pMV361當(dāng)中,進(jìn)一步誘導(dǎo)在BCG內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋磉_(dá),這就證明rBCG疫苗對(duì)于E.tenella 卵囊所帶來的攻擊具有較高的免疫和保護(hù)作用,同時(shí)可以在一定程度上誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞免疫以及體液免疫反應(yīng)[3]。
總而言之,經(jīng)過相應(yīng)研究人員的努力,人們對(duì)于雞驅(qū)蟲并免疫原性、宿主免疫應(yīng)答和球蟲病疫苗研制等均獲得了較為有利的保障。伴隨著分子生物學(xué)水平的不斷提升,促使球蟲體外培養(yǎng)技術(shù)和體內(nèi)生理生化研究等均得到了迅速發(fā)展。