蘇湘暉,孫 昂,粟玉萍,陳 敏,譚 濤

(湖南省岳陽市中心血站輸血研究室 414000)

到目前已發(fā)現(xiàn)人類有36個血型系統(tǒng)，對臨床輸血最為重要的是ABO和Rh血型系統(tǒng)。Rh血型是血型系統(tǒng)中最復雜、最具多態(tài)性的血型系統(tǒng)，其臨床意義僅次于ABO血型系統(tǒng)，可引起嚴重的輸血反應和新生兒輸血反應。為了給臨床醫(yī)院提供及時、有效、安全的血液，筆者對2013-2017年410例初篩為Rh(D)陰性的血液進行確認試驗，并對其表型、D變異型、不規(guī)則抗體篩查及抗體鑒定進行調(diào)查。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2013-2017年岳陽地區(qū)第1次無償獻血者[第1次做過Rh(D)陰性確認試驗的獻血者，第2次獻血不被納入此試驗]在用單克隆IgM類抗-D常規(guī)檢測初篩為Rh(D)陰性的血液進行確認試驗。

1.2試劑和儀器 單克隆IgM類抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e,IgG類抗-D,抗人球蛋白試劑(IgG，C3d)，篩選細胞均由上海血液生物公司提供。 IgM+IgG類抗-D由Bioscot公司提供，譜細胞由Reagens公司提供。細胞洗滌離心機(KA-2200型，日本久保田公司),顯微鏡(CX41型，Olympus公司)。

1.3方法

1.3.1Rh(D)陰性篩查及確認 用單克隆IgM類抗-D試劑對所有標本進行初篩，常規(guī)鑒定為Rh(D)陰性的標本再分別用另一廠家的單克隆IgM類抗-D，IgM+IgG類抗-D，IgG類抗-D 3種試劑進行確認，如果3種試劑均為陰性，則判斷為Rh(D)陰性。如果IgM+IgG類抗-D，IgG類抗-D與抗人球蛋白試劑進行間接抗人球蛋白試驗有1管陽性，則判斷為D變異型(弱D表型或部分D表型)，如果3管全都為陰性，則確認為陰性血。

1.3.2Rh(D)陰性血清學表型鑒定 將初篩為Rh(D)陰性分別用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑對Rh(D)陰性標本進行試管法血清學表型分型。

1.3.3不規(guī)則抗體篩選及鑒定 將初篩為Rh(D)陰性的獻血者血清與篩選細胞和自身細胞用鹽水法、凝聚胺法和抗人球法進行不規(guī)則抗體篩查。篩查結(jié)果為陽性的標本再與譜細胞和自身細胞進行抗體鑒定，確定其特異性。

2 結(jié) 果

2.1Rh(D)陰性獻血者的血清學表型分布情況 410例無償獻血者初篩為Rh(D)陰性，確認為Rh(D)陰性的391例(95.37%),ccdee 219例(56.01%),Ccdee 125例(31.97%),CCdee 27例(6.91%),ccdEe 16例(4.09%),CcdEe 3例(0.77%),CCdEe 1例(0.25%)。

2.2RhD變異型的血清學表型分布情況 410例無償獻血者初篩為Rh(D)陰性經(jīng)過確認，D變異型共19例(4.80%)，其中表型為ccDuEe 4例(21.05%),CCDuee 3例(15.80%),CcDuee 7例(36.84%),CcDuEe 5例(26.31%)。

2.3血清學不規(guī)則抗體篩查及鑒定 391例Rh(D)陰性無償獻血者血清中查出不規(guī)則抗體陽性共4例，均為IgG類抗-D抗體(1.02%)。19例D變異型獻血者血清中檢出1例gG類抗-D抗體(5.26%)。

3 討 論

Rh血型系統(tǒng)是所有血型系統(tǒng)最復雜的血型系統(tǒng)，從臨床上講，除ABO血型系統(tǒng)外D抗原具有最重要的血型多態(tài)性。D抗原是Rh抗原中免疫原性最強的抗原，也是最具有臨床意義的抗原[1]。根據(jù)紅細胞上D抗原的有無，分為Rh陽性和Rh陰性。本調(diào)查的410例初篩為RhD陰性獻血者經(jīng)間接抗人球蛋白試驗確認391例為RhD陰性(95.37%)，19例為D變異型(4.80%)。Rh血型系統(tǒng)其他重要的抗原有C、c、E、e，岳陽地區(qū)的RhD陰性人群以ccdee和Ccdee為主。與岳陽地區(qū)Rh血型表型調(diào)查相符[2]。

由于D抗原是由1號染色體短臂上的Rh基因表達，D基因重組、缺失、點突變、無意義突變以及mRNA的表達水平下降均會導致紅細胞出現(xiàn)弱D表型或部分D表型的變異型抗原[3]。弱D紅細胞帶有完整的D抗原，只是表達減弱，并且具有所有的D表位，所以不產(chǎn)生抗-D，而部分D即有本部分D表位的缺失，剩下的D表位表達又減弱，可產(chǎn)生同種抗-D[3]。本調(diào)查的391例確認為RhD陰性獻血者經(jīng)不規(guī)則抗體篩查和抗體鑒定共檢出IgG類抗-D抗體4例(1.02%)。19例D變異型中，1例(5.26%)產(chǎn)生抗-D,此例應歸類于部分[4]。

為保證臨床輸血的有效性和安全性，初篩試驗為RhD陰性經(jīng)確認后為D變異型者，作為獻血者時，應該視為RhD陽性供血，因為D變異型只是D抗原表達減弱或者缺失部分D正常表達，如果視為RhD陰性血輸給陰性患者，就會刺激產(chǎn)生抗-D,會導致下次輸血或妊娠發(fā)生輸血反應或新生兒溶血癥。D變異型作為受血者時應視為RhD陰性接受D陰性血，因為有的部分D已產(chǎn)生抗-D,如輸入陽性血就會發(fā)生輸血反應[5]。

綜上所述，為了降低血液的報廢率，在固定RhD陰性獻血者充足的情況下，筆者對已產(chǎn)生抗-D抗體的陰性和變異型(部分D)獻血者進行屏蔽。