古憶，高翔，張小兵，劉志明，夏思良

高血壓是臨床常見(jiàn)的心血管疾病，病理表現(xiàn)為靜息狀態(tài)下患者動(dòng)脈收縮壓及舒張壓異常升高。高血壓控制不良可累及心、肝、腎等器官，造成多器官功能損傷，影響患者生活質(zhì)量[1]。心室肥厚是高血壓疾病的嚴(yán)重并發(fā)癥，臨床上約有20%～40%的高血壓患者伴隨左心室肥厚，極易導(dǎo)致心力衰竭、心源性休克以及猝死等，嚴(yán)重危及患者生命安全[2]。有研究[3,4]表明，T細(xì)胞亞群、血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）及血管緊張素Ⅱ1型受體（AT1R）與心血管疾病的發(fā)生存在一定聯(lián)系。因此，本研究觀察高血壓伴左室肥厚患者外周血Th1、Th2、Th17細(xì)胞比例與AngⅡ、AT1R的變化及相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象與分組連續(xù)入選2016年5月～2017年12月于南京江北人民醫(yī)院心內(nèi)科收治的160例高血壓患者，其中男性95例，女性65例，年齡43～73（58.06±5.41）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：高血壓患者診斷依據(jù)2010版中國(guó)高血壓防治指南中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[5]，即靜息狀態(tài)下患者收縮壓大于140 mmHg（1 mmHg=0.133kPa）或舒張壓大于90 mmHg；左室肥厚判斷依據(jù)超聲檢查符合左心肥厚診治指南相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[6]，即左室重量指數(shù)（LVMI）男性大于115 g/m2，女性大于90 g/m2；同意參加本研究且依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除繼發(fā)性高血壓、高血脂、糖尿病及免疫功能障礙患者；排除甲狀腺功能異常、心肝腎等臟器異常者；排除急慢性感染及近期服用過(guò)免疫抑制劑患者；排除孕婦及哺乳期女性。根據(jù)是否伴左心室肥厚分為觀察組80例（高血壓伴左室肥厚）和單純高血壓組80例（高血壓無(wú)左室肥厚）。收集同期本院體檢的40例健康人群為對(duì)照組，男性22例，女性18例，年齡45～73（57.88±5.43）歲。本研究符合相關(guān)倫理批文，所有受試者均對(duì)本研究知情并簽署同意書。

1.2 Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例測(cè)定受試者入組后清晨空腹抽取外周靜脈血4 ml，置于肝素鈉抗凝管中保存，取ELISA板條，加入標(biāo)本液100 μl，36℃下反應(yīng)60 min后洗板，加入生物素化的Th1、Th2和Th17抗體100 μl，孵育30 min后洗板，再加入TMB反應(yīng)液100 μl孵育15 min終止反應(yīng)。在450 nm下檢測(cè)吸光值，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例。

1.3 AngⅡ及AT1R水平測(cè)定抽取受試者空腹靜脈血3 ml，3000 r/min低速離心10 min，取血清備用。取ELISA板條，加入血清100 μl，36℃孵育60 min洗板，加入生物素化抗體100 μl，孵育30 min后洗板，再加入TMB反應(yīng)液100 μl孵育15 min終止反應(yīng)。在450 nm下檢測(cè)吸光值，計(jì)算AngⅡ及AT1R水平，操作試劑盒為Bio-Swamp公司產(chǎn)品。

1.4 超聲心動(dòng)圖測(cè)定患者取左側(cè)臥位，采用飛利浦心臟超聲于安靜狀態(tài)下檢測(cè)，探頭信號(hào)為P4-2，頻率2.5～35 MHz，以50 mm/s速度掃描。二維超聲取左室長(zhǎng)軸切面測(cè)量左房?jī)?nèi)徑（LAD），M型連續(xù)掃描測(cè)定左室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)（構(gòu)成比）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；各指標(biāo)間的相關(guān)性采用Pearson分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料比較三組受試者性別構(gòu)成、年齡、體質(zhì)指數(shù)及吸煙情況等比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表1）。

表1 三組一般臨床資料比較

2.2 各組Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例比較觀察組患者外周血Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值均大于單純高血壓組和對(duì)照組，而單純高血壓組患者外周血Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值大于對(duì)照組，三組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。三組受試者外周血Th2細(xì)胞比例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表2）。

表2 各組Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例比較（±s）

表2 各組Th1、Th2和Th17細(xì)胞比例比較（±s）

注：Th1：Th1細(xì)胞；Th2：Th2細(xì)胞；Th17：Th17細(xì)胞；與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與單純高血壓組比較，bP＜0.05

項(xiàng)目 觀察組（n=80）單純高血壓組（n=80）對(duì)照組（n=40）P值Th1（%） 22.49±3.11ab 13.82±2.41a 10.15±2.33b ＜0.001 Th2（%） 1.63±0.41 1.67±0.49 1.71±0.51 0.876 Th1/Th2 14.81±4.78ab 9.29±3.75a 7.22±3.97b ＜0.001 Th17（%） 2.43±0.45ab 1.17±0.31a 0.89±0.26b ＜0.001

2.2 各組外周血AngⅡ及AT1R水平比較觀察組患者AngⅡ及AT1R水平明顯高于單純高血壓組和對(duì)照組，而單純高血壓組患者AngⅡ及AT1R水平又高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表3）。

表3 各組AngⅡ及AT1R水平比較（±s）

表3 各組AngⅡ及AT1R水平比較（±s）

注：AngⅡ：血管緊張素Ⅱ；AT1R：血管緊張素Ⅱ1型受體；與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與單純高血壓組比較，bP＜0.05

項(xiàng)目 觀察組（n=80） 單純高血壓組（n=80） 對(duì)照組（n=40） P值A(chǔ)ngⅡ（pg/ml） 523.35±75.68ab 438.57±73.56a 316.52±68.95b ＜0.001 AT1R（pg/ml） 2979.36±437.58ab 1825.36±352.77a 1352.76±257.65b ＜0.001

2.3 高血壓伴左室肥厚患者AngⅡ、AT1R與Th1、Th1/Th2、Th1的相關(guān)性高血壓伴左室肥厚患者外周血AngⅡ、AT1R水平與Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值均呈顯著正相關(guān)（P均＜0.05）（表4）。

3 討論

高血壓是全球性公共健康問(wèn)題，其發(fā)生受遺傳基因、環(huán)境及個(gè)體差異等因素影響。據(jù)統(tǒng)計(jì)[7]，我國(guó)目前高血壓患者約2.7億人，且隨著人們生活方式的改變和人口老齡化加劇，高血壓發(fā)生率呈明顯上升趨勢(shì)。高血壓被認(rèn)為是腦卒中、心力衰竭及心肌梗死等心腦血管疾病的重要危險(xiǎn)因素，高血壓患者心臟長(zhǎng)期處于高負(fù)荷狀態(tài)，心臟容易發(fā)生重構(gòu)性改變，導(dǎo)致左心室肥厚[8-10]。

表4 高血壓伴左室肥厚患者AngⅡ及AT1R與Th1、Th1/ Th2、Th17細(xì)胞的相關(guān)性

研究發(fā)現(xiàn)[11]，機(jī)體免疫-炎癥反應(yīng)在高血壓患者心臟重構(gòu)過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。Th類細(xì)胞處于機(jī)體免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，直接參與慢性疾病和自身免疫疾病的發(fā)生過(guò)程，Th1和Th2屬于兩種重要輔助T細(xì)胞[12]。正常狀況下，體內(nèi)Th1與Th2細(xì)胞因子相互作用，處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，若兩者之間的平衡被打破，則會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生[13]。Th17是新近發(fā)現(xiàn)的T細(xì)胞，具有促炎作用，在高血壓的發(fā)生和血管功能紊亂病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用[14]。本研究中，觀察組患者Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值均大于單純高血壓組和對(duì)照組，而單純高血壓組患者外周血Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值又大于對(duì)照組，說(shuō)明高血壓患者機(jī)體處于免疫失衡狀態(tài)，Th1、Th17細(xì)胞因子的激活不僅參與高血壓的病理過(guò)程，且與患者心肌肥厚存在一定關(guān)系，而Th類細(xì)胞在高血壓及心肌肥厚發(fā)病過(guò)程中的具體作用機(jī)制有待深入研究。

AngⅡ是一種血管收縮活性因子，通過(guò)與1型受體（AT1R）的結(jié)合，產(chǎn)生大量自由基，激活下游信號(hào)傳導(dǎo)，從而參與心室肥厚過(guò)程[15]。病理情況下，大量表達(dá)的AngⅡ會(huì)引起血管舒張功能障礙，導(dǎo)致高血壓的發(fā)生；同時(shí)AngⅡ的高表達(dá)又可激活A(yù)T1R，促進(jìn)心肌細(xì)胞生長(zhǎng)，從而造成左室肥厚[16,17]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者血清AngⅡ及AT1R水平明顯高于單純高血壓組和對(duì)照組，而單純高血壓組患者AngⅡ及AT1R水平又高于對(duì)照組，證實(shí)AngⅡ是導(dǎo)致高血壓疾病和左室肥厚的重要因子。

另外本研究發(fā)現(xiàn)，高血壓伴左室肥厚患者外周血AngⅡ、AT1R水平與Th1、Th17細(xì)胞比例及Th1/Th2值均呈顯著正相關(guān)，表明T細(xì)胞亞群和AngⅡ在高血壓伴左心肥厚病理過(guò)程中存在一定關(guān)聯(lián)。其原因可能是Th類細(xì)胞影響巨噬細(xì)胞的激活，促進(jìn)機(jī)體炎癥反應(yīng)和產(chǎn)生自由基，造成血管上皮和內(nèi)皮損傷，最終導(dǎo)致高血壓及心室肥厚等疾病，而AngⅡ會(huì)加重血管炎癥，促進(jìn)Th類細(xì)胞的表達(dá)。

綜上所述，高血壓伴左室肥厚患者外周血T細(xì)胞亞群和AngⅡ水平明顯升高，兩者相互作用，共同參與高血壓和左心肥厚的發(fā)生過(guò)程。然而在臨床上能否通過(guò)改善機(jī)體免疫狀態(tài)和拮抗血管緊張素受體來(lái)緩解高血壓伴左室肥厚患者病情尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。