章海鑫 徐先棟 張燕萍 王生

(江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所，江西南昌 330039)

黃尾鲴(XenocyprisdavidiBleeker)具有易捕撈、肉厚質(zhì)實、味道鮮美和營養(yǎng)價值高等特點,是湖泊、池塘及水庫增養(yǎng)殖的理想魚類。目前，黃尾鲴的生物學(xué)特征[1-3]、食性[4]以及繁養(yǎng)殖技術(shù)[5-8]等均有大量的研究；完整的基礎(chǔ)研究和技術(shù)研究促使黃尾鲴養(yǎng)殖成為當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖品種結(jié)構(gòu)調(diào)整中首選的優(yōu)良品種之一[3]，但目前針對這一優(yōu)良的養(yǎng)殖品種尚沒有統(tǒng)一的種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。

核型(karyotype) 是指生物染色體的數(shù)目、大小和形態(tài)特征的總和,是細(xì)胞遺傳學(xué)的研究基礎(chǔ),對魚類核型進(jìn)行研究，有助于了解生物染色體組的組成、鑒定近緣物種及構(gòu)建物種間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系[9]。因此,選擇對黃尾鲴進(jìn)行核型研究,有助于補(bǔ)充黃尾鲴細(xì)胞遺傳學(xué)數(shù)據(jù)資料，制定種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，同時也為今后黃尾鲴的人工繁育和遺傳育種等工作提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗魚由萍鄉(xiāng)市水產(chǎn)科學(xué)研究所黃尾鲴良種場提供，單尾體質(zhì)量在300～600 g。暫養(yǎng)于江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中，暫養(yǎng)一周后開始試驗。

1.2 實驗方法

1.2.1 染色體標(biāo)本制備

參照王德祥和丁少雄[10，11]的方法改進(jìn)染色體標(biāo)本制備步驟：①選取3尾體格健壯、活力好的個體，按魚體重100g/mL抽取尾靜脈血后按魚體重100g/mg從胸鰭基部注射PHA后暫養(yǎng)；②暫養(yǎng)8～10h后，按魚體重100g/mg注射秋水仙素；③注射后15min 剪鰓放血,取頭腎置于生理鹽水中進(jìn)行組織破碎,制得細(xì)胞懸液后靜置10min； ④ 500r/min 離心5min后收集細(xì)胞,加入 0.075 mol/L KCl溶液后37℃水浴低滲 30 min，500r/min 離心5min后加入新配制的卡諾氏固定液室溫固定 20 min,之后重復(fù)固定 2 次；⑤再次離心后取沉淀,加入適量新配制的卡諾氏固定液重懸細(xì)胞,用吸管吸取細(xì)胞懸液滴在預(yù)冷玻片上,過酒精燈火焰 3 次,自然晾干備用。

1.2.2 核型分析

用滴管吸取10%的 Giemsa 染色液平鋪在玻片上染色20min，然后使用蒸餾水緩慢沖洗干凈,自然干燥,室溫保存。選取來自不同個體的100個分散良好的中期分裂相計數(shù),計數(shù)結(jié)果用于確定染色體總數(shù)。并對分散良好、著絲粒清晰、長度適中的染色體中期分裂相拍照,依據(jù)照片進(jìn)行測量和統(tǒng)計。 按照相對大小編號,根據(jù) Levan[12]的標(biāo)準(zhǔn)將染色體分成4 組,即①中部著絲粒染色體(metacentrics，M)；②亞中部著絲粒染色體(submetacentrics，SM);③亞端部著絲粒染色(subtelocentrics，ST);④端部著絲粒染色體(telocentrics，T) 。

2 結(jié)果

在顯微鏡下選取了100個黃尾鲴中期分裂相較好的視野進(jìn)行觀察和計數(shù)，結(jié)果如表1所示，可見黃尾鲴中期分裂相染色體總數(shù)為 48條的有81個,占分裂相總數(shù)的81%,所以判斷黃尾鲴的二倍體染色體總數(shù)為 48。從良好中期分裂相中所得的各染色體的相對長度和臂比如表2所示。黃尾鲴細(xì)胞染色體很小,最長染色體相對長度為 4.16,最短者為1.3,長度比為3.2。按Levan[12]命名法可分成3組：M型(中部著絲粒染色體)9對；SM型(亞中部著絲粒染色體)13對；T型(端部著絲粒染色體)2對。核型公式為2n=48=18M+26SM+4T，NF=92，未發(fā)現(xiàn)有異形性染色體。黃尾鲴染色體的中期分裂相和核型圖譜如圖1和圖2所示。

表1 黃尾鲴染色體數(shù)目統(tǒng)計

表2 黃尾鲴染色體相對長度與臂比

圖1 黃尾鲴中期分裂相染色體

圖2 黃尾鲴染色體核型

3 討論

試驗中得到黃尾鲴染色體數(shù)2n=48,這與前人[13]所得結(jié)果一致。黃尾鲴屬于鯉科鲴亞科，從染色體數(shù)目看其與其他鲴亞科魚類染色體數(shù)目一致，均為2n=48。這表明其與其他許多鯉科魚一樣，染色體數(shù)目在進(jìn)化上是保守的[13，14]。余先覺等[15]認(rèn)為某一分類群大多數(shù)或絕大多數(shù)種類所具有的染色體二倍數(shù)，可作為該分類群最基本的核型特征。黃尾鲴與已知鲴亞科魚類如銀鲴(2n=48)、細(xì)鱗斜頜鲴(2n=48)、逆魚(2n=48)等的二倍體數(shù)一致。除染色體外，黃尾鲴的核型與其他鲴亞科魚類的核型也一致。細(xì)鱗斜頜鲴和逆魚的核型均為18M+26SM+4T，NF=92，而銀鲴核型為20M+26SM+2T，NF=94[16-19]。根據(jù)現(xiàn)代魚類演化的理論，染色體結(jié)構(gòu)的重排可以引起 NF值的變化，在 2n值相同的分類群之間,臂數(shù)的變化是從進(jìn)化上低位類群到高位類群的表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢，即具有較多端部著絲粒染色體的類型是比較原始的,而出現(xiàn)較多中部和近中部著絲粒染色體的類型是比較進(jìn)化的[15]。因而，從核型上看黃尾鲴與細(xì)鱗斜頜鲴和逆魚處于同一進(jìn)化順序，銀鲴則進(jìn)化程度更高。上述核型多態(tài)性也可能是由于魚類的不同地理種群，不同研究者所使用的方法不同,測量染色體的時相不一致以及測量和配組誤差所造成的。