施洋

（河北省固安縣畜牧獸醫(yī)局 065500）

磺胺類(lèi)藥物是一類(lèi)人工合成的抗菌藥物，對(duì)畜禽消化道細(xì)菌性疾病和球蟲(chóng)病有很好的療效。但是大量在人體累積，會(huì)對(duì)人體造成危害，所以制定了殘留限量標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法。

1 危害

大量食用含有磺胺類(lèi)藥物殘留的食物，在人體內(nèi)會(huì)引起藥物的逐漸累積，從而引起泌尿系統(tǒng)和消化系統(tǒng)損傷、血小板減少、過(guò)敏反應(yīng)，并導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，有致癌作用等。各國(guó)政府對(duì)磺胺類(lèi)藥物在動(dòng)物性食品中使用嚴(yán)格規(guī)定了最高殘留限量（MRL），目前我國(guó)將磺胺類(lèi)藥物列為動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中限制使用的藥物，規(guī)定磺胺類(lèi)藥物最高殘留限量（MRL）為0.1mg/kg。

2 藥物殘留原因

2.1 未按規(guī)定生產(chǎn)和使用獸藥

藥廠(chǎng)、飼料生產(chǎn)企業(yè)違背相關(guān)的標(biāo)簽規(guī)定，《獸藥管理?xiàng)l例》明確規(guī)定，標(biāo)簽必須寫(xiě)明獸藥的主要成分及其含量，有的商家在利益的驅(qū)使下未能明確注明，導(dǎo)致養(yǎng)殖者濫用，過(guò)量使用藥物，不能規(guī)范用藥，造成藥物殘留。

2.2 沒(méi)有按照規(guī)范使用獸藥

養(yǎng)殖者為了更好的經(jīng)濟(jì)效益，濫用和超量使用藥物。有的為了降低經(jīng)濟(jì)損失，在屠宰前使用藥物來(lái)掩蓋畜禽的臨床表現(xiàn)，不能?chē)?yán)格遵守休藥期規(guī)定，造成藥物殘留超標(biāo)。

3 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）及高效液相色譜法概述

目前，磺胺類(lèi)藥物殘留量的檢測(cè)方法有液相色譜分析法、液質(zhì)聯(lián)用分析法、免疫分析法、放射免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附法等行之有效的檢測(cè)方法。

3.1 酶聯(lián)免疫吸附法

3.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法的基本原理

磺胺類(lèi)藥物具有共同的母核機(jī)構(gòu)，通過(guò)適當(dāng)設(shè)計(jì)半抗原的分子結(jié)構(gòu)，使磺胺族藥物分子中共同的結(jié)構(gòu)暴露出來(lái)，采用此種方法得到免疫原，建立同時(shí)檢測(cè)磺胺族藥物的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）快速檢測(cè)方法。樣品中磺胺類(lèi)藥物與酶標(biāo)板上固定的抗原特異性競(jìng)爭(zhēng)抗體，加入酶標(biāo)記物，催化顯色，通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定，得出吸光度值（OD值）。

3.1.2 酶聯(lián)免疫吸附法的優(yōu)缺點(diǎn)

磺胺類(lèi)藥物殘留的酶聯(lián)免疫吸附法根據(jù)試劑盒廠(chǎng)家的不同，操作流程及步驟略有不同，總體來(lái)說(shuō)都具有方便，快捷，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，適用于大量樣品篩查。缺點(diǎn)是只能用于篩查，若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，應(yīng)用高效液相色譜法或液質(zhì)聯(lián)用等方法進(jìn)行定量確證。

3.2 高效液相色譜法概述

3.2.1 高效液相色譜法具有分離效率高，選擇性好，檢測(cè)靈敏度高，能精準(zhǔn)的檢測(cè)出試樣中藥物殘留含量等優(yōu)點(diǎn)。但與酶聯(lián)免疫吸附法相比，具有樣品處理步驟繁瑣，需用到的試劑種類(lèi)多，標(biāo)準(zhǔn)要求高，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。

3.2.2 樣品前處理

樣品前處理步驟較多，但總體分為兩大步，提取及凈化。用乙腈提取試樣中的藥物殘留成分，正己烷分配，最后經(jīng)過(guò)堿性氧化鋁SPE柱凈化后得到可供高效液相色譜儀測(cè)定的樣品。

3.2.3 上機(jī)測(cè)定

設(shè)定色譜條件后，取適量標(biāo)準(zhǔn)溶液和相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，以色譜峰面積積分值定量，得出液相色譜圖。

3.2.4 結(jié)果計(jì)算

公式 X=CV/M

X－樣品組織中磺胺類(lèi)藥物的殘留量

C－試樣溶液中對(duì)應(yīng)的磺胺類(lèi)藥物的濃度

V－試樣溶液總體積

M－樣品量