張 校，孫 見

（1.山東省濰坊市安丘凌河畜牧獸醫(yī)管理站，山東 濰坊 261000;2.吉林特研生物技術(shù)有限責(zé)任公司，吉林 長春 130000）

肉毒梭菌中毒癥是由肉毒梭菌感染引起的一種高度致死性疾病，肉毒梭菌是致死性較高的一種病原體之一，兩端鈍圓的短桿菌，革蘭氏陽性菌，嚴(yán)格厭氧，人和動(dòng)物食入和吸收這種毒素后，神經(jīng)系統(tǒng)將遭到破壞，出現(xiàn)眼瞼下垂、復(fù)視、斜視、吞咽困難、頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等癥狀，嚴(yán)重者可因呼吸麻痹而死亡。

水貂的胃腸道是一個(gè)良好的缺氧環(huán)境，適于肉毒桿菌居住。肉毒桿菌屬于厭氧菌，嚴(yán)格厭氧，在胃腸道內(nèi)既能分解葡萄糖、麥芽糖及果糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，又能消化分解肉渣，使之變黑，腐敗惡臭。在厭氧環(huán)境中，此菌能分泌強(qiáng)烈的肉毒毒素，能引起特殊的神經(jīng)中毒癥狀，致殘率、病死率極高。

水貂經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高，以動(dòng)物性飼料為主，主要飼料來源有魚類及畜禽下腳料，一旦水貂誤食了被肉毒梭菌感染的動(dòng)物性食品，極易造成中毒死亡。

2018年1 月2 0日，接山東省安丘市一畜主反映，家中所飼養(yǎng)水貂出現(xiàn)了大面積死亡，總共1700只的獸群，一早上傷亡200多只，送至我處進(jìn)行診療。

1 臨床癥狀

潛伏期較短，發(fā)病急，死亡快，據(jù)畜主反映，昨天晚上喂食時(shí)一點(diǎn)癥狀沒有，今早突然出現(xiàn)大面積死亡；臨床以抽搐、后肢癱瘓、對稱型麻痹為主，后期出現(xiàn)反射機(jī)能降低，肌肉緊張度降低，后肢軟散無力，吞咽困難、瞳孔放大、視覺障礙等臨床癥狀，但體溫并未升高，死亡水貂以公貂居多，并且食欲并未受影響。

2 剖檢變化

將死亡水貂剖檢可見，肺部呈現(xiàn)彌漫性出血，個(gè)別有血瘀，水腫，腸道出血嚴(yán)重，胃內(nèi)容物呈現(xiàn)煤焦油樣顏色，胃腸道黏膜出血，膀胱腫脹充盈，腎臟有出血點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 前增菌 樣品分別接種于皰肉培養(yǎng)基、TPGYT培養(yǎng)基，并分別與35、26℃培養(yǎng)7d。

3.2 分 離 培養(yǎng)7d后，染色、鏡檢，觀察菌的形態(tài)是否為典型的肉毒梭菌。取1～2mL培養(yǎng)物加等量的酒精混合（或80℃加熱10min，）后在室問溫下培養(yǎng)1h，非蛋白分解型的肉毒梭菌，因其芽孢不耐熱，不要采取熱處理的方法。

用接種環(huán)涂劃酒精處理液或熱處理的培養(yǎng)物于小牛肝卵黃瓊脂或厭氧卵黃瓊脂平板上，厭氧培養(yǎng)48h，35℃。

典型菌落是隆起或扁平，光滑或粗糙，在卵黃培養(yǎng)基上用斜光檢驗(yàn)時(shí)菌落表面通常出現(xiàn)虹暈色（iridescence），此光區(qū)稱為“珍珠層”，C、D、E型菌通常有2～4mm黃色沉淀區(qū)圍繞，A、B型菌通常顯示較小的沉淀區(qū)。挑取10個(gè)典型菌落，分別接種于皰肉培養(yǎng)基、TPGYT培養(yǎng)基，并分別與35、26℃培養(yǎng)7d。生化反應(yīng)試驗(yàn)，可以為鑒定做參考，以上肉毒梭菌的培養(yǎng)、分離、鑒定試驗(yàn)力求迅速，不要長時(shí)間接觸空氣，最好在厭氧條件下操作。

4 動(dòng)物試驗(yàn)

依據(jù)畜主反映和臨床及剖檢變化，初步可診斷為肉毒梭菌中毒，之后進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，將發(fā)病水貂胃內(nèi)容物取出，用生理鹽水進(jìn)行稀釋，并且離心取上清，對小白鼠進(jìn)行腹腔注射，對照組小白鼠注射同等劑量的生理鹽水，之后發(fā)現(xiàn)小白鼠在注射完5～12h內(nèi)相繼出現(xiàn)呼吸困難，抽搐直至最終死亡的臨床癥狀，而對照組小白鼠無變化，從而證明了水貂胃腸道內(nèi)容物含有肉毒梭菌，驗(yàn)證了肉毒梭菌中毒。之后我們又將上清液皮下注射到雞的一側(cè)眼皮內(nèi)注射。對照組注射生理鹽水，之后進(jìn)行觀察，試驗(yàn)組雞出現(xiàn)了因麻痹眼瞼閉合的臨床癥狀，而對照組無此變化。

5 治療

經(jīng)過跟畜主的大量溝通，得知其前一天剛換了飼喂水貂的毛蛋，因?yàn)橛挟愇?，所以就將其蒸煮進(jìn)行處理，其蒸煮完放在蒸箱中放置了1d，所以我們懷疑是毛蛋中毒引起。建議其立即停喂毛蛋，并且飼料飲水中加入大劑量的VC、葡萄糖和電解多維等，經(jīng)過3～5d的調(diào)理，死亡率逐漸降低直至消失。

6 防治

對有條件的水貂養(yǎng)殖場建議接種肉梭梭菌疫苗，每只接種1mL，免疫期可達(dá)半年之久。同時(shí)對飼喂水貂所用的畜禽下腳料的采購一定要慎重，一定要選擇新鮮的動(dòng)物性食品，否則極易造成發(fā)病。