嚴(yán)惠馨，徐鶴峰，佟彥林，王宏軍，董國英?

（1.北京師范大學(xué)全球變化與地球系統(tǒng)科學(xué)研究院，北京 100875；2.中國醫(yī)科大學(xué)貝爾法斯特女王大學(xué)聯(lián)合學(xué)院，遼寧 沈陽 110122；3.錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 121001）

沙門氏菌病（salmonellosis）是由沙門氏菌引發(fā)的一類疾病的統(tǒng)稱。動物患沙門氏菌病的情況廣泛存在，有數(shù)據(jù)顯示沙門氏菌病在家畜中的感染率一直居高不下，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失；在野生動物患病方面，美洲和歐洲禽類、刺猬均有報道感染該病[1]。因此，本文對動物感染沙門氏菌病從病原特征到防制進(jìn)行如下總結(jié)。

1 病原特征

沙門氏菌病又稱為副傷寒，其病原體為沙門氏菌（salmonella），是腸道菌科沙門氏菌屬的一種革蘭氏陰性短桿菌[2]，可分為腸炎沙門氏菌（Salmonella enterica）和邦戈?duì)柹抽T氏菌（Salmonella bongori）兩個種[3]。目前已知沙門氏菌的血清型有2 500多種，各種血清型決定了疾病不同的流行程度，根據(jù)表面抗原的不同，可分為34個血清群，大多包括鞭毛抗原（H）、菌體抗原（O）和表面抗原（Vi），不同的抗原結(jié)構(gòu)決定了不同的功能[4]。

大多數(shù)沙門氏菌無莢膜，有鞭毛和菌毛，能運(yùn)動，是需氧或兼性厭氧菌；少數(shù)菌體吸附于細(xì)胞表面，無鞭毛和芽孢，不能運(yùn)動。沙門氏菌對熱、過酸或過堿性等極端外界環(huán)境的耐受力弱，最適生長溫度為37℃，最適pH為7.4～7.6[5]，因此在自然環(huán)境下生存力強(qiáng)，還能利用污水中的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行繁殖。

2 流行病學(xué)

動物感染沙門氏菌病的情況比較常見，家禽最易發(fā)生感染。沙門氏菌病的主要傳染源為患該病的動物和帶有沙門氏菌的動物，一般病原體會寄生在這類動物的呼吸道、消化道和淋巴組織中，當(dāng)自身免疫力降低時，沙門氏菌活化發(fā)生內(nèi)源性感染。感染的主要途徑為：患病或帶菌家禽的乳汁、尿液、糞便、流產(chǎn)的胎兒和羊水中含有沙門氏菌，污染食物和水源，進(jìn)而導(dǎo)致同環(huán)境下的健康動物患??；通過正常交配或人工授精手段進(jìn)而使健康動物發(fā)生感染；通過鳥類和鼠類等的跨距離傳播等。

沙門氏菌病常年發(fā)生，多雨和潮濕的環(huán)境條件下發(fā)病率高，動物發(fā)病后呈散發(fā)性或地方性流行。家禽患病主要是因?yàn)轱曫B(yǎng)環(huán)境污穢、潮濕，溫度過低或過高，飼料和飲水供應(yīng)不良，長途運(yùn)輸?shù)纫蛩亍?/p>

3 臨床癥狀

不同動物感染沙門氏菌病的臨床表現(xiàn)略有不同，下面以5種易感動物為例進(jìn)行簡單介紹。

3.1 豬豬感染沙門氏菌病主要為亞急性和慢性，潛伏期從2 d到數(shù)周不等。主要癥狀為體溫升高（40.5～41.5℃），呼吸困難，食欲廢絕，精神委頓，眼有黏性或膿性分泌物，不喜運(yùn)動，消瘦，糞便呈黃白色稀狀，有惡臭味，最后身體機(jī)能衰竭死亡[6]。

3.2 牛牛感染此病呈昏迷狀，主要表現(xiàn)為體溫升高（40～41℃），食欲不佳，眼窩下陷，呼吸困難，體重下降，后期見下痢，排出黃色帶有血絲的黏液狀糞便，犢牛多數(shù)在發(fā)病后7 d內(nèi)死亡，懷孕母牛多發(fā)流產(chǎn)現(xiàn)象，部分成年牛顯現(xiàn)隱形經(jīng)過，無明顯癥狀，在糞便中可以檢測到該菌株。

3.3 禽由于禽沙門氏菌病原體的抗原不同，因此禽類患病的情況復(fù)雜，主要包括雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒3種[7]。感染雞白痢的病雞中，雛雞特征明顯，主要表現(xiàn)為呼吸困難，伸頸張口，下痢，糞便呈白色稀狀，排便時會污染周圍絨毛結(jié)塊，進(jìn)而影響正常的排便。雞傷寒在雛雞中少見，成雞精神沉郁，冠和肉髯皺縮泛白，羽毛蓬亂，糞便呈黃綠色。而雛雞孵化24 d內(nèi)感染禽副傷寒并發(fā)病的可能性大，發(fā)病時表現(xiàn)為迅速死亡，成年禽初期感染無明顯癥狀，死亡率相對較低，癥狀為腹瀉[8]。

3.4 狐狐類感染該病具有明顯的季節(jié)性和地方流行性，潛伏期為3～20 d，有的患病狐類表現(xiàn)為體溫升高（41～42℃），拒食，精神沉郁，不愛動，急性病例表現(xiàn)為嘔吐，下痢，后呈昏迷狀態(tài)，多在3 d內(nèi)死亡。亞急性經(jīng)過時，主要是體溫上升（40～41℃），精神委頓，呼吸急促，食欲廢絕，消化不良，被毛松亂，失去光澤，眼球凹陷而暗淡，四肢無力，明顯消瘦，糞便為混有血絲的液體。慢性病例表現(xiàn)為腸胃機(jī)能紊亂，食欲不振，發(fā)生下痢，貧血，最終體重下降逐漸消瘦[9]。

3.5 貉貉感染該病主要癥狀為體溫升高（40～41℃），精神沉郁，食欲廢絕，嘔吐腹瀉，糞便多為白黃色液體狀，味臭，少部分為黑色同時混有黏膜。發(fā)病后期出現(xiàn)嚴(yán)重脫水現(xiàn)象，體溫下降，全身虛脫，部分出現(xiàn)休克或抽搐癥狀，最后逐漸消瘦而死亡[10]。

4 病理變化

4.1 豬急性病例剖檢時主要表現(xiàn)為敗血癥，皮膚（尤其是腹部）上有血點(diǎn)，色暗帶藍(lán)，全身淋巴結(jié)出血腫大，肺臟變硬充血和出血。慢性病例剖檢時主要表現(xiàn)為彌漫性腸炎和盲腸炎，死亡豬的淋巴結(jié)切面有壞死灶，可見有灰黃色干酪樣結(jié)節(jié)，脾稍微腫大，肝臟有黃灰色壞死小點(diǎn)。

4.2 牛犢牛急性死亡大多出現(xiàn)敗血癥病變，典型特點(diǎn)為淋巴結(jié)出血腫大，脾臟萎縮并伴隨脫水癥狀，心壁、腹膜、腺胃、小腸和膀胱黏膜有小點(diǎn)而出血，同時膽汁混濁[11]。成年牛大多出現(xiàn)急性出血性腸炎，剖檢時表現(xiàn)為腸黏膜炎性潮紅，有局限性壞死區(qū)。腸系膜淋巴結(jié)出血水腫，膽囊壁增厚，膽汁渾濁[12]。

4.3 禽雛雞死亡剖檢時可見肝臟充血腫大，有顆粒狀灰白色結(jié)節(jié)，表面附著的纖維素性滲出物與腹膜黏連，肝壞死[7]。部分組織臟器散在點(diǎn)狀出血，輸尿管中含有大量的尿酸鹽并發(fā)生擴(kuò)張現(xiàn)象，腸腔堵塞，出現(xiàn)腹膜炎，卵黃吸收不良，內(nèi)含變性卵黃。心肌、肺部、盲腸、大腸及肌胃肌肉中有壞死灶[13]。

4.4 狐死亡狐類剖檢時可見可視黏膜呈白色或青紫色，胃內(nèi)黏膜腫脹，充血或出血，腸系淋巴結(jié)腫大，切面呈灰色或偏紅色[14]。脾臟、膽囊增大，其中脾臟呈現(xiàn)暗紅色，膽囊充滿濃稠的液汁，心肌變性。大腦實(shí)質(zhì)水腫，側(cè)腦室液體較多[15]。

4.5 貉死亡貉的尸體嚴(yán)重脫水，剖檢時可觀察到可視黏膜蒼白，胃腸黏膜水腫、充血或出血。十二指腸上段發(fā)生潰瘍，肝臟腫大，有散在壞死灶，脾、腎腫大，表面有出血點(diǎn)，肺部出現(xiàn)水腫，有出血性炎癥，小腸后段和盲腸、結(jié)腸有輕微炎癥，糞便呈明顯的黏液性，腸內(nèi)容物有脫落的腸黏膜，呈稀薄狀[10]。

5 診斷

確診動物是否感染沙門氏菌需要采集發(fā)病動物標(biāo)本做分離和鑒定。不同動物所采取的診斷方法有所差異，目前主要有以下3種檢測方法。

5.1 傳統(tǒng)檢測方法傳統(tǒng)的國標(biāo)法主要包括5個步驟，采樣增菌、分離出疑似菌落、屬種的鑒定、血清學(xué)分型、菌型的判斷。由于沙門氏菌的血清型多，運(yùn)用該法的檢測時間過長，為此技術(shù)人員在傳統(tǒng)檢測方法的基礎(chǔ)上不斷改良。根據(jù)沙門氏菌能特異的分解丙烯乙二醇產(chǎn)生酸性物質(zhì)，在分離培養(yǎng)基中加入丙烯乙二醇，通過指示劑的顏色變化進(jìn)行該菌種的分離鑒定，縮短了檢測時間[16]。還可向分離培養(yǎng)基中加入無色的沙門氏菌特異性酶的底物，根據(jù)酶的特異性反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化對該菌種進(jìn)行鑒定。

5.2 免疫學(xué)檢測方法在沙門氏菌檢測中免疫學(xué)檢測方法發(fā)揮了重要的作用，包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、熒光免疫分析法（FIA）、免疫磁性分離法（IMS）等。

5.2.1 ELISA 是一項(xiàng)建立在抗原抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用基礎(chǔ)上的技術(shù)，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性好等的特點(diǎn)[17]。

5.2.2 FIA法其基本原理是將熒光素標(biāo)記在靶細(xì)菌特異性抗體上，使其與樣品中的靶細(xì)菌特異性結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察熒光現(xiàn)象的技術(shù)，但是成本較高。

5.2.3 IMS技術(shù) 在外加磁場的作用下，使已經(jīng)偶聯(lián)了特異性抗體的磁性顆粒與樣品中靶細(xì)菌特異性結(jié)合，進(jìn)而達(dá)到把靶細(xì)菌分離、濃縮的目的。IMS技術(shù)可直接檢測細(xì)菌，其優(yōu)點(diǎn)是特異性好，但是靈敏度還需要不斷的完善提高[18]。

5.3 分子生物學(xué)方法分子生物學(xué)方法是用于沙門氏菌檢測的最常用的方法之一，以目前廣泛應(yīng)用的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)、基因芯片技術(shù)（DNA chip）、環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)（LAMP）為代表進(jìn)行簡要的介紹[19]。

5.3.1 PCR技術(shù)是一項(xiàng)體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)，該項(xiàng)技術(shù)的特點(diǎn)為特異性強(qiáng)、敏感性高、準(zhǔn)確度高[20]。在沙門氏菌的檢測中應(yīng)當(dāng)注意引物的合理設(shè)計(jì)，同時根據(jù)特定種類的菌株設(shè)計(jì)合適的反應(yīng)條件[16]。

5.3.2 DNA chip技術(shù)是在雜交測序的基礎(chǔ)上衍生出來的一種DNA測序方法，使待測樣品與基因芯片上的探針進(jìn)行雜交，通過分析同位素法、化學(xué)熒光法等的結(jié)果，得到樣品分子的相關(guān)信息，從而判斷沙門氏菌是否存在。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是在試驗(yàn)過程中可同時檢測多種沙門氏菌，同時還會有耐藥性等結(jié)果[21]。

5.3.3 LAMP技術(shù)該項(xiàng)技術(shù)是在等溫條件下進(jìn)行的一種擴(kuò)增反應(yīng)，特異之處在于需要針對靶基因的6個區(qū)域設(shè)計(jì)4種特異性引物。該技術(shù)操作簡單，在PCR手段的基礎(chǔ)上，提高了其敏感性、特異性和時效性，結(jié)果可用肉眼可以直接觀察到。

6 防制

沙門氏菌病的防控可以概括為3個方面：首先要控制傳染源，一旦發(fā)現(xiàn)疫情，應(yīng)及時建立隔離區(qū)，對陽性動物進(jìn)行處理，對受到污染的場地及時消毒。其次要切斷傳播途徑，對可能發(fā)病的地區(qū)進(jìn)行定期消毒和檢疫，在養(yǎng)殖過程中要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，供給動物新鮮、高品質(zhì)的飼料，同時保持飼養(yǎng)環(huán)境清潔等。第三要進(jìn)行免疫預(yù)防，主要是疫苗的使用，其中針對特定菌株制成的單價滅活疫苗療效良好，而通用疫苗效果一般。必要時可采取藥物防治手段，一般多采用西藥治療方法中的抗生素治療，該方法要根據(jù)具體動物的患病情況來選擇使用。由于抗生素的大范圍長時間使用，導(dǎo)致動物出現(xiàn)了不同程度的耐藥現(xiàn)象，因此在條件允許的情況下，可以從患病動物體內(nèi)分離出沙門氏菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，選擇治療效果最好的抗生素類型。目前對于豬沙門氏菌病常用的抗生素為氟哌酸、阿莫西林、恩諾沙星等[22]；牛沙門氏菌病一般使用金霉素、鏈霉素、慶大霉素等[11]，以及磺胺類藥物進(jìn)行治療；對于雞沙門氏菌病常用的有頭孢噻呋、土霉素和磺胺類藥物[23]；對于狐沙門氏菌病常用鏈霉素、紅霉素和青霉素；貉感染沙門氏菌病一般使用鏈霉素和新霉素等。在使用抗生素的同時，還可輔之以注射補(bǔ)液和樟腦油等。

[1]郭秀艷，王樹成.野生動物疾病現(xiàn)狀[J].中國獸醫(yī)雜志，1998，（12）：51.

[2]Mitra K, Zhou D, Galán J E. Biophysical characterization of SipA, an actin ‐ binding proteinfrom Salmonella enterica[J]. FEBS letters,2000, 482(1-2): 81-84.

[3]TTorpdahl M, Skov M N, Sandvang D, et al. Genotypiccharacterization of Salmonella by multilocussequence typing, pulsed-field gel electrophoresisand amplified fragment lengthpolymorphism[J]. Journal of MicrobiologicalMethods, 2005, 63(2): 173-184.

[4]趙貴明.食品微生物實(shí)驗(yàn)室工作指南[M].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005：123-142.

[5]Yan S S,Pendrak M L,Abela-Ridder B,et al.Anoverview of Salmonellatyping:public health perspectives[J].Clinical and Applied Immunology Reviews,2004,4(3):189-204.

[6]黃嬙，劉衛(wèi)國，馬飛，等.沙門氏菌病的防控[J].畜牧與飼料科學(xué)，2010，31（Z2）：163-165.

[7]崔衛(wèi)星，丁民.雛雞沙門氏菌病的診斷與治療[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30（05）：191.

[8]曾廣軍.雞沙門氏菌病的綜合防治[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2017，（3）：32-33.

[9]高彩艷.狐沙門氏菌病的診斷及防治措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2011，（9）：222.

[10]李建軍，李豐宜，呂春艷，等.貉沙門氏菌病的診治[J].中國畜牧獸醫(yī)，2007，（2）：125-126.

[11]魏永艷.牛沙門氏菌病及防治[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30（3）：135.

[12]田美湛.畜禽沙門氏菌病的病原特點(diǎn)與病理變化[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧，2012，(1):156.

[13]楊志生.蛋雞沙門氏菌病的防治[J].飼料博覽，2017，（9）：53-54.

[14]李亞龍.北極狐沙門氏菌病的診治[J].現(xiàn)代農(nóng)村科技，2014，（1）：39.

[15]MEYER C,Fredriksson-Ahomaa M,Kokott K,et al.Salmonella Ohio in Schweinefleisch[J].Fleischwirtschaft,2012,92(9):105-108.

[16]劉喆，張書蕭，王少輝，等.沙門氏菌的檢測技術(shù)進(jìn)展[J].2012，（2）：81-86.

[17]郭立明，張雪，厲華明.沙門氏菌檢測方法的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)世界，2014，（9）：97.

[18]金宇良.PCR技術(shù)的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012，（10）：47-48.

[19]許會會，雷連城，謝芳，等.沙門氏菌PCR檢測方法的建立[J].中國畜牧獸醫(yī)，2010，37（4）：94-97.

[20]張江英.沙門氏菌檢測方法的研究進(jìn)展[J].家禽科學(xué)，2012，（10）：47-50.

[21]李志強(qiáng).LAMP技術(shù)在微生物檢測中的應(yīng)用[J].生命科學(xué)儀器，2009，7（7）：3-6.

[22]馮旭東.豬沙門氏菌病的診斷與中西醫(yī)療法[J].現(xiàn)代畜牧科技，2016，（1）：117.

[23]李質(zhì)權(quán).雞沙門氏菌病的防治技術(shù)[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2017，（2）：102.