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        動物沙門氏菌病的防制

        2018-02-13 12:19:05嚴(yán)惠馨徐鶴峰佟彥林王宏軍董國英
        現(xiàn)代畜牧獸醫(yī) 2018年2期
        關(guān)鍵詞:檢測

        嚴(yán)惠馨,徐鶴峰,佟彥林,王宏軍,董國英?

        (1.北京師范大學(xué)全球變化與地球系統(tǒng)科學(xué)研究院,北京 100875;2.中國醫(yī)科大學(xué)貝爾法斯特女王大學(xué)聯(lián)合學(xué)院,遼寧 沈陽 110122;3.錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,遼寧 錦州 121001)

        沙門氏菌病(salmonellosis)是由沙門氏菌引發(fā)的一類疾病的統(tǒng)稱。動物患沙門氏菌病的情況廣泛存在,有數(shù)據(jù)顯示沙門氏菌病在家畜中的感染率一直居高不下,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失;在野生動物患病方面,美洲和歐洲禽類、刺猬均有報道感染該病[1]。因此,本文對動物感染沙門氏菌病從病原特征到防制進(jìn)行如下總結(jié)。

        1 病原特征

        沙門氏菌病又稱為副傷寒,其病原體為沙門氏菌(salmonella),是腸道菌科沙門氏菌屬的一種革蘭氏陰性短桿菌[2],可分為腸炎沙門氏菌(Salmonella enterica)和邦戈?duì)柹抽T氏菌(Salmonella bongori)兩個種[3]。目前已知沙門氏菌的血清型有2 500多種,各種血清型決定了疾病不同的流行程度,根據(jù)表面抗原的不同,可分為34個血清群,大多包括鞭毛抗原(H)、菌體抗原(O)和表面抗原(Vi),不同的抗原結(jié)構(gòu)決定了不同的功能[4]。

        大多數(shù)沙門氏菌無莢膜,有鞭毛和菌毛,能運(yùn)動,是需氧或兼性厭氧菌;少數(shù)菌體吸附于細(xì)胞表面,無鞭毛和芽孢,不能運(yùn)動。沙門氏菌對熱、過酸或過堿性等極端外界環(huán)境的耐受力弱,最適生長溫度為37℃,最適pH為7.4~7.6[5],因此在自然環(huán)境下生存力強(qiáng),還能利用污水中的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行繁殖。

        2 流行病學(xué)

        動物感染沙門氏菌病的情況比較常見,家禽最易發(fā)生感染。沙門氏菌病的主要傳染源為患該病的動物和帶有沙門氏菌的動物,一般病原體會寄生在這類動物的呼吸道、消化道和淋巴組織中,當(dāng)自身免疫力降低時,沙門氏菌活化發(fā)生內(nèi)源性感染。感染的主要途徑為:患病或帶菌家禽的乳汁、尿液、糞便、流產(chǎn)的胎兒和羊水中含有沙門氏菌,污染食物和水源,進(jìn)而導(dǎo)致同環(huán)境下的健康動物患??;通過正常交配或人工授精手段進(jìn)而使健康動物發(fā)生感染;通過鳥類和鼠類等的跨距離傳播等。

        沙門氏菌病常年發(fā)生,多雨和潮濕的環(huán)境條件下發(fā)病率高,動物發(fā)病后呈散發(fā)性或地方性流行。家禽患病主要是因?yàn)轱曫B(yǎng)環(huán)境污穢、潮濕,溫度過低或過高,飼料和飲水供應(yīng)不良,長途運(yùn)輸?shù)纫蛩亍?/p>

        3 臨床癥狀

        不同動物感染沙門氏菌病的臨床表現(xiàn)略有不同,下面以5種易感動物為例進(jìn)行簡單介紹。

        3.1 豬豬感染沙門氏菌病主要為亞急性和慢性,潛伏期從2 d到數(shù)周不等。主要癥狀為體溫升高(40.5~41.5℃),呼吸困難,食欲廢絕,精神委頓,眼有黏性或膿性分泌物,不喜運(yùn)動,消瘦,糞便呈黃白色稀狀,有惡臭味,最后身體機(jī)能衰竭死亡[6]。

        3.2 牛牛感染此病呈昏迷狀,主要表現(xiàn)為體溫升高(40~41℃),食欲不佳,眼窩下陷,呼吸困難,體重下降,后期見下痢,排出黃色帶有血絲的黏液狀糞便,犢牛多數(shù)在發(fā)病后7 d內(nèi)死亡,懷孕母牛多發(fā)流產(chǎn)現(xiàn)象,部分成年牛顯現(xiàn)隱形經(jīng)過,無明顯癥狀,在糞便中可以檢測到該菌株。

        3.3 禽由于禽沙門氏菌病原體的抗原不同,因此禽類患病的情況復(fù)雜,主要包括雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒3種[7]。感染雞白痢的病雞中,雛雞特征明顯,主要表現(xiàn)為呼吸困難,伸頸張口,下痢,糞便呈白色稀狀,排便時會污染周圍絨毛結(jié)塊,進(jìn)而影響正常的排便。雞傷寒在雛雞中少見,成雞精神沉郁,冠和肉髯皺縮泛白,羽毛蓬亂,糞便呈黃綠色。而雛雞孵化24 d內(nèi)感染禽副傷寒并發(fā)病的可能性大,發(fā)病時表現(xiàn)為迅速死亡,成年禽初期感染無明顯癥狀,死亡率相對較低,癥狀為腹瀉[8]。

        3.4 狐狐類感染該病具有明顯的季節(jié)性和地方流行性,潛伏期為3~20 d,有的患病狐類表現(xiàn)為體溫升高(41~42℃),拒食,精神沉郁,不愛動,急性病例表現(xiàn)為嘔吐,下痢,后呈昏迷狀態(tài),多在3 d內(nèi)死亡。亞急性經(jīng)過時,主要是體溫上升(40~41℃),精神委頓,呼吸急促,食欲廢絕,消化不良,被毛松亂,失去光澤,眼球凹陷而暗淡,四肢無力,明顯消瘦,糞便為混有血絲的液體。慢性病例表現(xiàn)為腸胃機(jī)能紊亂,食欲不振,發(fā)生下痢,貧血,最終體重下降逐漸消瘦[9]。

        3.5 貉貉感染該病主要癥狀為體溫升高(40~41℃),精神沉郁,食欲廢絕,嘔吐腹瀉,糞便多為白黃色液體狀,味臭,少部分為黑色同時混有黏膜。發(fā)病后期出現(xiàn)嚴(yán)重脫水現(xiàn)象,體溫下降,全身虛脫,部分出現(xiàn)休克或抽搐癥狀,最后逐漸消瘦而死亡[10]。

        4 病理變化

        4.1 豬急性病例剖檢時主要表現(xiàn)為敗血癥,皮膚(尤其是腹部)上有血點(diǎn),色暗帶藍(lán),全身淋巴結(jié)出血腫大,肺臟變硬充血和出血。慢性病例剖檢時主要表現(xiàn)為彌漫性腸炎和盲腸炎,死亡豬的淋巴結(jié)切面有壞死灶,可見有灰黃色干酪樣結(jié)節(jié),脾稍微腫大,肝臟有黃灰色壞死小點(diǎn)。

        4.2 牛犢牛急性死亡大多出現(xiàn)敗血癥病變,典型特點(diǎn)為淋巴結(jié)出血腫大,脾臟萎縮并伴隨脫水癥狀,心壁、腹膜、腺胃、小腸和膀胱黏膜有小點(diǎn)而出血,同時膽汁混濁[11]。成年牛大多出現(xiàn)急性出血性腸炎,剖檢時表現(xiàn)為腸黏膜炎性潮紅,有局限性壞死區(qū)。腸系膜淋巴結(jié)出血水腫,膽囊壁增厚,膽汁渾濁[12]。

        4.3 禽雛雞死亡剖檢時可見肝臟充血腫大,有顆粒狀灰白色結(jié)節(jié),表面附著的纖維素性滲出物與腹膜黏連,肝壞死[7]。部分組織臟器散在點(diǎn)狀出血,輸尿管中含有大量的尿酸鹽并發(fā)生擴(kuò)張現(xiàn)象,腸腔堵塞,出現(xiàn)腹膜炎,卵黃吸收不良,內(nèi)含變性卵黃。心肌、肺部、盲腸、大腸及肌胃肌肉中有壞死灶[13]。

        4.4 狐死亡狐類剖檢時可見可視黏膜呈白色或青紫色,胃內(nèi)黏膜腫脹,充血或出血,腸系淋巴結(jié)腫大,切面呈灰色或偏紅色[14]。脾臟、膽囊增大,其中脾臟呈現(xiàn)暗紅色,膽囊充滿濃稠的液汁,心肌變性。大腦實(shí)質(zhì)水腫,側(cè)腦室液體較多[15]。

        4.5 貉死亡貉的尸體嚴(yán)重脫水,剖檢時可觀察到可視黏膜蒼白,胃腸黏膜水腫、充血或出血。十二指腸上段發(fā)生潰瘍,肝臟腫大,有散在壞死灶,脾、腎腫大,表面有出血點(diǎn),肺部出現(xiàn)水腫,有出血性炎癥,小腸后段和盲腸、結(jié)腸有輕微炎癥,糞便呈明顯的黏液性,腸內(nèi)容物有脫落的腸黏膜,呈稀薄狀[10]。

        5 診斷

        確診動物是否感染沙門氏菌需要采集發(fā)病動物標(biāo)本做分離和鑒定。不同動物所采取的診斷方法有所差異,目前主要有以下3種檢測方法。

        5.1 傳統(tǒng)檢測方法傳統(tǒng)的國標(biāo)法主要包括5個步驟,采樣增菌、分離出疑似菌落、屬種的鑒定、血清學(xué)分型、菌型的判斷。由于沙門氏菌的血清型多,運(yùn)用該法的檢測時間過長,為此技術(shù)人員在傳統(tǒng)檢測方法的基礎(chǔ)上不斷改良。根據(jù)沙門氏菌能特異的分解丙烯乙二醇產(chǎn)生酸性物質(zhì),在分離培養(yǎng)基中加入丙烯乙二醇,通過指示劑的顏色變化進(jìn)行該菌種的分離鑒定,縮短了檢測時間[16]。還可向分離培養(yǎng)基中加入無色的沙門氏菌特異性酶的底物,根據(jù)酶的特異性反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化對該菌種進(jìn)行鑒定。

        5.2 免疫學(xué)檢測方法在沙門氏菌檢測中免疫學(xué)檢測方法發(fā)揮了重要的作用,包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、熒光免疫分析法(FIA)、免疫磁性分離法(IMS)等。

        5.2.1 ELISA 是一項(xiàng)建立在抗原抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用基礎(chǔ)上的技術(shù),具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性好等的特點(diǎn)[17]。

        5.2.2 FIA法其基本原理是將熒光素標(biāo)記在靶細(xì)菌特異性抗體上,使其與樣品中的靶細(xì)菌特異性結(jié)合,在熒光顯微鏡下觀察熒光現(xiàn)象的技術(shù),但是成本較高。

        5.2.3 IMS技術(shù) 在外加磁場的作用下,使已經(jīng)偶聯(lián)了特異性抗體的磁性顆粒與樣品中靶細(xì)菌特異性結(jié)合,進(jìn)而達(dá)到把靶細(xì)菌分離、濃縮的目的。IMS技術(shù)可直接檢測細(xì)菌,其優(yōu)點(diǎn)是特異性好,但是靈敏度還需要不斷的完善提高[18]。

        5.3 分子生物學(xué)方法分子生物學(xué)方法是用于沙門氏菌檢測的最常用的方法之一,以目前廣泛應(yīng)用的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)、基因芯片技術(shù)(DNA chip)、環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)為代表進(jìn)行簡要的介紹[19]。

        5.3.1 PCR技術(shù)是一項(xiàng)體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù),該項(xiàng)技術(shù)的特點(diǎn)為特異性強(qiáng)、敏感性高、準(zhǔn)確度高[20]。在沙門氏菌的檢測中應(yīng)當(dāng)注意引物的合理設(shè)計(jì),同時根據(jù)特定種類的菌株設(shè)計(jì)合適的反應(yīng)條件[16]。

        5.3.2 DNA chip技術(shù)是在雜交測序的基礎(chǔ)上衍生出來的一種DNA測序方法,使待測樣品與基因芯片上的探針進(jìn)行雜交,通過分析同位素法、化學(xué)熒光法等的結(jié)果,得到樣品分子的相關(guān)信息,從而判斷沙門氏菌是否存在。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是在試驗(yàn)過程中可同時檢測多種沙門氏菌,同時還會有耐藥性等結(jié)果[21]。

        5.3.3 LAMP技術(shù)該項(xiàng)技術(shù)是在等溫條件下進(jìn)行的一種擴(kuò)增反應(yīng),特異之處在于需要針對靶基因的6個區(qū)域設(shè)計(jì)4種特異性引物。該技術(shù)操作簡單,在PCR手段的基礎(chǔ)上,提高了其敏感性、特異性和時效性,結(jié)果可用肉眼可以直接觀察到。

        6 防制

        沙門氏菌病的防控可以概括為3個方面:首先要控制傳染源,一旦發(fā)現(xiàn)疫情,應(yīng)及時建立隔離區(qū),對陽性動物進(jìn)行處理,對受到污染的場地及時消毒。其次要切斷傳播途徑,對可能發(fā)病的地區(qū)進(jìn)行定期消毒和檢疫,在養(yǎng)殖過程中要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,供給動物新鮮、高品質(zhì)的飼料,同時保持飼養(yǎng)環(huán)境清潔等。第三要進(jìn)行免疫預(yù)防,主要是疫苗的使用,其中針對特定菌株制成的單價滅活疫苗療效良好,而通用疫苗效果一般。必要時可采取藥物防治手段,一般多采用西藥治療方法中的抗生素治療,該方法要根據(jù)具體動物的患病情況來選擇使用。由于抗生素的大范圍長時間使用,導(dǎo)致動物出現(xiàn)了不同程度的耐藥現(xiàn)象,因此在條件允許的情況下,可以從患病動物體內(nèi)分離出沙門氏菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選擇治療效果最好的抗生素類型。目前對于豬沙門氏菌病常用的抗生素為氟哌酸、阿莫西林、恩諾沙星等[22];牛沙門氏菌病一般使用金霉素、鏈霉素、慶大霉素等[11],以及磺胺類藥物進(jìn)行治療;對于雞沙門氏菌病常用的有頭孢噻呋、土霉素和磺胺類藥物[23];對于狐沙門氏菌病常用鏈霉素、紅霉素和青霉素;貉感染沙門氏菌病一般使用鏈霉素和新霉素等。在使用抗生素的同時,還可輔之以注射補(bǔ)液和樟腦油等。

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