★ 朱伶俐 徐麗 劉春玲 靳永亮 劉峰 劉華*（.江西中醫(yī)藥大學藥學院 南昌330004；．江西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 南昌 330006）

中藥豨薟草是菊科植物豨薟（Siegesbeckia orientalisL）、腺梗豨薟（Siegesbeckia pubescensMakino）和毛梗豨薟（Siegesbeckia glabrescensMakino）的干燥地上部分［1］，性寒，味辛、苦，歸肝、腎經(jīng)，可利關(guān)節(jié)、抗血栓、解毒、祛風濕等。豨薟草遍布全國，廣泛應(yīng)用于臨床，近幾年藥理研究表明豨薟草具有抗代謝綜合征、抗光老化等新的生理活性?；诒菊n題組前期的活性篩選結(jié)果，現(xiàn)就近5年豨薟草藥理活性等方面研究的新進展進行綜述，以期找到目標化合物。

1 藥理活性

1.1 抗腫瘤作用 奇任醇為豨薟草的主要活性二萜類成分之一，對人慢性髓樣白血病K562細胞具有強細胞毒作用，能夠下調(diào)Bcl-2蛋白（抑制細胞凋亡）和上調(diào)Bax、tBid蛋白（促進細胞凋亡）的表達，誘導K562細胞凋亡，達到體外抗腫瘤作用［2］。豨薟草乙醇提取液（SOE）中石竹烯與其氧化物對人子宮內(nèi)膜癌RL95-2細胞最具細胞毒性，且SOE以內(nèi)外凋亡途徑聯(lián)合誘導RL95-2細胞凋亡，且SOE可抑制子宮內(nèi)膜癌細胞的侵襲與轉(zhuǎn)移并且扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，從而達到抗腫瘤轉(zhuǎn)移與發(fā)展作用［3-4］。

豨薟草中二萜類成分一直被認為是主要的活性成分，研究相對較多。倍半萜類成分研究較少，多成內(nèi)酯，但亦具有良好的藥理作用。從毛梗豨薟中分離得到siegenolides A與siegenolides B對人結(jié)腸癌SW480細胞系和人乳腺癌MCF-7細胞系均具有顯著細胞毒性，若對藥理機制深入研究，可為目標活性抗癌先導化合物提供相關(guān)參考［5］。豨薟草中倍半萜內(nèi)酯可抑制GLI（腦膠質(zhì)瘤相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄因子）介導的胰腺癌PANC-1和AsPC-1細胞轉(zhuǎn)錄，下調(diào)GLI靶基因表達，起到抗腫瘤作用［6］。腺梗豨薟中揮發(fā)油能激活一系列促HepG2細胞凋亡蛋白，上調(diào)Bax、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-9（參與細胞凋亡起始）、Caspase-3（執(zhí)行細胞凋亡）表達，下調(diào)Bcl-2蛋白表達，從而促進HepG2細胞凋亡，達到體外抗肝癌［7］。豨薟草中揮發(fā)油中多為倍半萜類化合物，該研究表明，如果能分析出來其中確切成分，可為找到目標抗癌活性小分子化合物提供相關(guān)思考。

毛梗豨薟乙醇提取物對血管內(nèi)皮生長因子-A（VEGF-A）-介導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）具有一定的抗血管生成活性，通過滅活VEGFA/VEGFR-2 （血管內(nèi)皮生長因子受體-2）下游信號通路蛋白激酶B （AKT）和p70S6K，抑制HUVECs增殖、轉(zhuǎn)移、毛細血管樣結(jié)構(gòu)的形成［8］。惡性腫瘤血管生成密集且迅速，這一成果的發(fā)現(xiàn)為抑制腫瘤擴散與發(fā)展起到了推動作用，但尚需追蹤具體活性單體化合物。毛梗豨薟乙醇提取物可通過介導抑制局部粘著斑激酶（FAK）、細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶、AKT和p70S6k依賴型信號通路，下調(diào)受體酪氨酸激酶，起到抑制SKOV-3人體卵巢癌細胞增殖、黏附、遷移和侵襲作用［9］，與毛梗豨薟乙醇提取物抗非小細胞肺癌的作用機制相類似［10］。

1.2 抗多發(fā)性硬化癥（MS） 奇任醇對實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎小鼠具有一定的治療作用，它能夠明顯降低小鼠血清中干擾素-γ（IFN-γ）和IL-17A（白細胞介素-17A）的分泌及引流淋巴結(jié)中Th1/Th17細胞，上調(diào)Bax與下調(diào)Bcl-2蛋白表達，誘導MOG-特異性CD4+T細胞的細胞凋亡，達到抗 MS 的作用［11］。

1.3 抗炎與祛風濕作用 豨薟草抗炎作用一直都有報道，最近Nguyen T D等［12］報道豨薟草乙醇粗提物具有抗高尿酸血癥和抗炎活性，活性強弱與粗提物中咖啡酸與黃酮類化合物含量相關(guān)，抑制了氧嗪酸誘導的高尿酸血癥大鼠體內(nèi)黃嘌呤氧化酶活性，從而抑制了大鼠體內(nèi)尿酸的生成。從腺梗豨薟中分離得到的5，3′- 二羥基-3，7，4′-三甲氧基黃酮（DTMF）具有神經(jīng)保護和抗神經(jīng)炎的活性，作用機制可能與通過轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2（Nrf2）和MAPKs（絲裂原活化蛋白激酶）活化調(diào)節(jié)血紅素加氧酶-1（HO-1）的表達信號通路相關(guān)［13］，HO-1是Nrf2的靶基因，在Nrf2被激活后，其相應(yīng)被活化，保護炎癥引發(fā)的氧化損傷，與豨薟草水提物改善尿酸鈉誘導的SD大鼠滑膜組織細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)作用機制類似［14］。從腺梗豨薟中純化得到的槲皮素3，7-O-二甲醚（QDE）可抑制炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，表現(xiàn)為在LPS-誘導的RAW 264.7細胞中，QDE下調(diào)促炎細胞因子表達水平，如 IL-6，IL-1β，腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）；在LPS-誘導的HT-29細胞（人結(jié)腸癌細胞）中，QDE降低一氧化氮合酶、環(huán)氧合酶-2表達與促炎性細胞因子IL-8的生成［15］，與奇任醇抗炎作用機制相類似［16-17］，表明QDE有望開發(fā)為治療結(jié)腸炎的藥物。

豨薟草中的活性萜類成分對關(guān)節(jié)炎具有良好的抗炎效果［18］，Lu Y等［19］研究表明奇任醇可能是一個潛在的類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）免疫抑制劑。TNF-α，IL-1 和IL-6是RA的常見細胞因子靶點，應(yīng)用AutoDock 4.2軟件與奇任醇進行分子對接時，發(fā)現(xiàn)IL-6是奇任醇的最佳藥物治療靶點［20］，在一定程度上為奇任醇抗RA提供了免疫評估通路。

豨薟草常用于治療關(guān)節(jié)腫痛，豨薟草醇提物與水提物可顯著改善尿酸鈉誘導的痛風性關(guān)節(jié)炎（GA）模型小鼠炎癥反應(yīng)［21］。為進一步研究其作用機制，徐軼爾等［22］開展實驗探索，發(fā)現(xiàn)豨薟草可抑制TNF-α誘導的滑膜細胞中NF-κB信號轉(zhuǎn)導通路的活化，導致NF-κB、IL-1β表達水平下降，有效抑制痛風性關(guān)節(jié)炎發(fā)展。后深入研究，探討豨薟草通過JNK（C-Jun氨基末端激酶）與TLR4（Toll樣受體4）信號通路對尿酸鈉致GA的影響，發(fā)現(xiàn)模型組滑膜組織JNK蛋白、PJNK蛋白、C-Jun、AP-1mRNA、NF-KB均表達上升，血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量增加，給藥組與JNK抑制劑組，其表達水平均相應(yīng)下降，減輕關(guān)節(jié)滑膜損傷，有效改善大鼠炎癥反應(yīng)；模型組大鼠滑膜組織中MyD88蛋白、TRAF-6、TBK1、NF-KB表達增強，血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量增加，給藥組其表達則相應(yīng)下降，明顯降低炎性因子的產(chǎn)生，緩解炎癥反應(yīng)［23-24］。上述研究成果表明，豨薟草有望通過改善JNK與TLR4信號通路異常激活來減緩GA炎癥損傷，但缺少目標活性化合物的追蹤。

1.4 心腦血管和肝腎保護作用 豨薟草中單體化合物豨薟精醇具有一定的抗血栓作用，其機制與降低血小板聚集度與粘附力相關(guān)［25］。豨薟草中總黃酮可降低局灶性腦缺血損傷大鼠腦組織中丙二醛（MDA）含量與腦梗死面積，提升大鼠超氧化物歧化酶清除體內(nèi)有害物質(zhì)能力及谷胱甘肽過氧化物酶活性［26］，降低大鼠氧自由基水平，減緩腦缺血損傷。豨薟草70%醇提取物能夠顯著減弱多柔比星（DOX）所引起的大鼠急性心肌損傷與急性肝腎損傷，降低肝臟組織充血腫脹，減少腎臟組織出血，改善炎細胞浸潤，兩者的作用機制可能都與加強了大鼠機體抗氧化能力相關(guān)［27-28］。在研究豨薟草醇提物對DOX致小鼠慢性心肌損傷作用時，給藥組與模型組相比，血清中肌酸激酶及同工酶、血清乳酸脫氫酶、總膽固醇、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平均有所降低，其中AST水平具有顯著性差異［29］，表明豨薟草醇提物對DOX致慢性心肌損傷小鼠具有保護作用。豨薟草提取液可減輕MPP+誘導的 PC12 細胞損傷，起到抗帕金森病效用［30］。生藥豨薟草（HS）與酒制豨薟草（WHS）預處理腎缺血/再灌注損傷（RIRI）大鼠，顯著降低血尿素氮和血清肌酐，有效提高內(nèi)源性抗氧化酶的活性，可能與調(diào)節(jié)Wnt/β-cantenin信號通路表達相關(guān)。另WHS能顯著抑制大鼠MDA釋放，表明WHS抗RIRI的療效優(yōu)于HS［31］。但這些研究均未表明確切的活性成分，尚需要深入研究。

1.5 抗代謝綜合征與骨質(zhì)疏松 腺梗豨薟甲醇提物具有抗肥胖的作用，通過調(diào)節(jié)過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）、轉(zhuǎn)錄因子CCAAT/增強子結(jié)合蛋白（C/EBPα）的表達，顯著抑制脂肪細胞分化和脂質(zhì)堆積［32-33］。之后 Kim M B 等［34］研究表明奇任醇經(jīng)激活Wnt/β-catenin信號通路，上調(diào)低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6、散亂蛋白2、β-catenin、CCND1，下調(diào) C/ EBPα、PPARγ、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c、脂肪酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶，加強糖原合成酶激酶磷酸化，從而抑制3T3-L1脂細胞分化和脂肪形成，起到抗肥胖的作用。上述成果的發(fā)現(xiàn)提示奇任醇可開發(fā)為天然抗肥胖劑，但需要體內(nèi)研究。

豨薟草乙醇浸膏乙酸乙酯部位（SE-EA）總酚與總黃酮含量很高，具有強抗氧化活性，體現(xiàn)在DPPH自由基清除能力（IC50= 161.8±2.4μg/ml）與ABTS自由基清除能力（IC50= 13.9±1.5μg/ml）。SE-EA對晚期糖化終產(chǎn)物（AGEs）、α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶具有強抑制作用，起到抗糖基化作用。SE-EA對血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）具有良好的抑制作用，起到抗高血壓的作用。代謝綜合征與氧化應(yīng)激、AGEs和關(guān)鍵酶（包括α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、ACE等）形成密切相關(guān)，表明豨薟草SE-EA在防治代謝紊亂中具有一定的潛力作用，但缺少確切單體化合物研究［35］。

奇任醇可通過激活BMP與Wnt/β-catenin信號通路，增加成骨細胞分化標記物的表達，提高骨保護素/核因子-KB受體活化因子配體，促進MC3T3-E1細胞中成骨細胞的分化，預治骨質(zhì)疏松癥［36］。

1.6 抗菌 從豨薟草乙酸乙酯餾分中分離純化得到的對映-16β-羥基貝殼杉烷-17，19-二羧酸等二萜類化合物對微生物具有強大的抗菌活性，尤其是抗甲氧西林金黃色葡萄球菌［37］。豨薟草醇提物對魚類致病性海豚鏈球菌、蘋果炭疽病菌具有強的抑制作用，且在一定條件下可完全抑制該病菌［38-39］；毛梗豨薟乙醇提物對褐帶石斑魚副溶血性弧菌具有一定的抑制作用，其中黃酮類化合物具有抗菌活性［40］。上述研究表明，豨薟草有望開發(fā)為新型抗菌藥物。

1.7 抗光老化 毛梗豨薟水取物（SGE）和奇壬醇可通過抑制絲裂原活化蛋白激酶和核因子κb通路表達，減弱無毛小鼠和成纖維細胞UVB誘導的光老化程度，這表明SGE有潛力發(fā)展為一種天然的抗光老化保健品，但尚缺乏后期的臨床實驗［41］。

2 結(jié)語

豨薟草為我國傳統(tǒng)中草藥，用藥歷史悠久。本文通過近5年的文獻調(diào)研發(fā)現(xiàn)，豨薟草中的二萜類成分一直被認為是主要的活性組分，但更多的藥理實驗證實，倍半萜類與黃酮類的藥理作用如抗腫瘤、抗氧化等方面［5-7］也很值得深入研究。豨薟草常用于治療風濕痹痛，最新研究發(fā)現(xiàn)了一些新的藥物治療靶點［16］（如IL-6）；而且也發(fā)現(xiàn)了一些新的藥理活性，如抗光老化和多發(fā)性硬化癥等，這些藥理研究大都缺乏確切的活性成分的追蹤，作用機制也相對模糊，如果能深入探討其確切的活性成分，與已知的活性化合物之間建構(gòu)整體的構(gòu)效關(guān)系，可在一定程度上促進藥物的靶向治療開發(fā)?；诒菊n題組前期活性篩選結(jié)果，本課題組將以活性篩選作為導向，從毛梗豨薟乙醇提取物中高效快速分離純化出目標活性小分子化合物，并研究其相關(guān)的作用機制。本文旨在為中藥豨薟草的化學、藥理、臨床研究提供參考，為新藥研發(fā)提供新思路。