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        中藥苦參、白鮮皮提取工藝及劑型研究

        2018-02-12 22:48:21陶雪慧何文媛於文博
        吉林中醫(yī)藥 2018年8期
        關(guān)鍵詞:小鼠實(shí)驗(yàn)

        陶雪慧,何文媛,王 超,於文博

        (長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117)

        中藥治療過敏性皮炎以養(yǎng)血疏風(fēng)潤燥,疏風(fēng)散熱,清熱利濕為主[1]。白鮮皮有效成分是梣酮、白鮮堿和黃柏酮,具有清熱燥濕、祛風(fēng)止癢等功效[2];苦參有效成分是生物堿和黃酮類化合物,具有清熱燥濕的功效[3];蛇床子有效成分是香豆素類化合物、歐前胡素、佛手柑內(nèi)脂,具有燥濕、祛風(fēng)、殺蟲等功效。三者配伍還能夠祛濕,解毒,止癢,適用于過敏性皮炎,皮膚瘙癢,慢性皮炎濕疹等。

        本文研究治療皮炎濕疹的中藥白鮮皮、苦參、蛇床子提取工藝并探究其最佳應(yīng)用劑型。外用藥物局部涂抹,不僅可以通過皮膚達(dá)到疏通經(jīng)絡(luò)、調(diào)節(jié)氣血,在局部發(fā)揮治療作用,又可透過肌膚毛孔深入臟腑,發(fā)揮內(nèi)外兼治的作用。

        1 實(shí)驗(yàn)材料

        白鮮皮、苦參、蛇床子均購于長春宏檢大藥房,乙醇、鹽酸均購于上海朝瑞生物科技有限公司,二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、氨水、二甲苯、硫化鋇均購于長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司。實(shí)驗(yàn)用小白鼠,體質(zhì)量18~22 g,雌雄各半,購于長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司。實(shí)驗(yàn)儀器:恒溫水浴鍋(上海申生科技有限公司)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛郎儀器有限公司)、數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司)、超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

        2 實(shí)驗(yàn)與結(jié)果

        2.1 白鮮皮有效成分提取方法

        2.1.1 白鮮皮有效成分提取 取干燥的白鮮皮500 g,以1:10的料液比加入95%乙醇,浸泡30 min后,80 ℃下回流提取3次,2 h/次,合并三次濾液,將棕黃色提取物于真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮至深棕色膏狀物質(zhì)。

        2.1.2 白鮮皮有效成分純化 用1%鹽酸溶液溶解得到的乙醇提取浸膏,過濾得到酸溶解部分和酸不溶部分,其中酸溶解部分為生物堿部分,用氨水調(diào)至pH為9,用二氯甲烷(清液:二氯甲烷= 3:1)比例進(jìn)行萃取,下層為二氯甲烷層,上層為水層,將二氯甲烷層用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀真空濃縮,即得到生物堿二氯甲烷層,烘干得生物堿,放置備用。

        2.2 苦參有效成分提取方法

        2.2.1 苦參有效成分提取 取干燥的苦參粉末50 g,料液比為1:10,水回流提取3次,1 h/次,合并3次水煮液,用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去部分水分,至約250 mL。

        2.2.2 苦參有效成分純化 向產(chǎn)物中加入無水乙醇使蛋白質(zhì)、多糖、無機(jī)鹽等雜質(zhì)沉淀析出(溶液含醇量約達(dá)80%),靜置24 h,過濾,將濾液置于水浴鍋上濃縮,再次加入無水乙醇使其沉淀完全,過濾,將濾液濃縮至稠膏狀,置于水浴鍋上蒸至無醇味。將其加入400 mL水加熱溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,用乙酸乙脂萃取多次,直至乙酸乙酯層顏色接近無色,置于真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮乙酸乙酯萃取液,濃縮、烘干,放置備用。

        2.3 蛇床子中有效成分的提取

        2.3.1 蛇床子有效成分提取 取蛇床子藥材200 g,粉碎過60目篩,粉末置于45 ℃烘箱中干燥6 h后,取蛇床子粉末50 g,料液比按照1:8,加入無水乙醇400 mL,室溫(25±1 ℃)條件下采用超聲0.5 h,回流提取2次,1 h/次,過濾,得提取液。

        2.3.2 蛇床子有效成分純化 將提取液減壓回收乙醇后加3倍浸膏的氯仿回流提取1 h,過濾,提取液于水浴鍋上濃縮至稠膏狀,烘干,放置備用。

        2.4 制劑成型 依次將白鮮皮、苦參、蛇床子3種提取物按處方比合并,置于水浴鍋上加熱濃縮成稠膏狀,加入95%乙醇,使含醇量到75%以上,靜置24 h,取上清液,得復(fù)方參皮酊。另按照藥典要求制成片劑和軟膏劑。

        2.5 藥理試驗(yàn) 取小鼠60只,雌雄各半,將動物隨機(jī)分為6組,即空白組、模型組、陽性藥組、片劑實(shí)驗(yàn)組、酊劑實(shí)驗(yàn)組、軟膏劑實(shí)驗(yàn)組,各10只/組,除空白組外,其他組別用10%硫化鋇腹部脫毛(3 cm×3 cm),取二甲苯0.2 mL涂抹于腹部,1次/d,連續(xù)4 d。第5天空白組、模型組經(jīng)口給生理鹽水,陽性藥組經(jīng)口給防風(fēng)通圣丸,3個實(shí)驗(yàn)組分別給片劑、酊劑、軟膏劑,1次/d觀察小鼠狀況。

        經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)觀察,模型組小鼠腹部皮膚紅腫、潰爛,體質(zhì)量明顯下降;陽性藥組和3個實(shí)驗(yàn)組明顯好轉(zhuǎn),3種劑型對皮炎濕疹均有效。

        2.6 急性毒性試驗(yàn) 取體質(zhì)量18~22 g小鼠30只,隨機(jī)分3組,10只/組,雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前動物禁食16 h,不限飲水。3組分別灌胃苦參、白鮮皮、蛇床子處方比例產(chǎn)品0.25、0.37、0.5 g/mL,一次性灌胃。灌胃后觀察、記錄動物的中毒表現(xiàn)。每周稱重1次,觀察兩周時間,實(shí)驗(yàn)結(jié)束解剖動物進(jìn)行大體觀察。

        以20 g/kg 劑量的產(chǎn)品給予小鼠灌胃后,小鼠生長良好,未見體質(zhì)量受到影響。實(shí)驗(yàn)小鼠均未見有中毒癥狀,觀察14 d無動物死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束解剖小鼠,觀察肝、腎、脾、心、肺、胃、腸等主要臟器,均未見明顯異常改變,該產(chǎn)品的急性經(jīng)口毒性屬無毒級。

        3 結(jié)論

        良好的劑型能最大限度地發(fā)揮藥物的療效,減少不良反應(yīng)的發(fā)生[4]。要想做到合理用藥,劑型必須選擇正確。采用酊劑制劑成型成本最低,同時更加適合大工業(yè)生產(chǎn)。

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