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(涪陵區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 涪陵 408000)

0 引言

口蹄疫是一種人畜共患病，是由口蹄疫病毒引起的一種急性傳染病。該病在偶蹄動物中易發(fā)，最易感的是牛類，豬也易感，羊、山羊、駱駝，象等均有發(fā)病報告，人亦可感染，是危害世界各國畜牧業(yè)最嚴重的疫病之一。其發(fā)病顯著特征為家畜的蹄、口腔黏膜、乳房及乳頭等處形成水泡并逐步潰爛，具有傳播速度快、傳播途徑廣等特點。疫區(qū)發(fā)病率可高達100%，其中，幼畜的死亡率極高。涪陵區(qū)為生豬養(yǎng)殖大區(qū)，因此，做好口蹄疫疫病防控工作對促進涪陵區(qū)畜牧業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展具有十分重要的意義。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑

全波長酶標儀,實時熒光定量PCR儀。豬口蹄疫：口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒，均在有效期內(nèi)使用，購自上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司，4℃保存?？谔阋咄ㄓ眯筒《緹晒釸T-PCR試劑盒，購自深圳真瑞生物醫(yī)藥有限公司，-20℃保存。實驗用水均為超純水。

1.2 試驗動物分組與樣品采集

2015-2017年，實驗分為兩組，即本轄區(qū)內(nèi)規(guī)模場組與散養(yǎng)戶組。在排除傳染病、寄生蟲病、沒有肉眼可見的生殖道疾病以及先天性因素的基礎上采樣。血清采集：清晨空腹頸靜脈采取血液4 mL，采樣同時記錄耳標號與每份血樣品的免疫程序。將編號的豬血清分別移至1.5 mL滅菌EP管內(nèi)；組織采集：隨機采集散養(yǎng)戶、規(guī)模場的豬扁桃體于1.5 mL離心管中編號。置于-20℃冰箱待檢。

2 結(jié)果

2.1 試驗結(jié)果

對合格的豬血清進行豬口蹄疫O型抗體檢測，根據(jù)試劑盒說明書上的標準計算，通過3年來的不斷收集數(shù)據(jù)、整理與分析，得出試驗結(jié)果，2015年規(guī)模場和散養(yǎng)戶的合格率分別是92.71%、62.83%；2016年規(guī)模場和散養(yǎng)戶的合格率分別是93.42%、67.66%；2017年規(guī)模場和散養(yǎng)戶的合格率分別是94.14%、74.76%；病原學結(jié)果為：2015-2017年規(guī)模場陽性率為0，2015-2017年散養(yǎng)戶分別是5%、3%、1%。

2.2 結(jié)論

由結(jié)果可知，3年來涪陵區(qū)規(guī)模場免疫效果均達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準(陽性率為70%)，而散養(yǎng)戶免疫效果不理想。2015年的規(guī)模場與散養(yǎng)戶合格率差異性顯著,2016年的規(guī)模場與散養(yǎng)戶合格率差異性顯著,2017年的規(guī)模場與散養(yǎng)戶合格率差異性顯著；2015-2017年規(guī)模場的差異性不顯著，2015-2017年散養(yǎng)戶的差異性也不顯著，說明規(guī)模場的免疫水平達標且相對穩(wěn)定；散養(yǎng)戶免疫合格率2015年和2016年低于國家標準，2017年達到國家標準，3年來免疫合格率逐年上升至74.76%。

綜合血清學和病原學結(jié)果分析，規(guī)模場的免疫效果達標且相對較穩(wěn)定，涪陵區(qū)散養(yǎng)戶口蹄疫免疫效果相對較差，有散發(fā)的可能。

3 分析

3.1 散養(yǎng)戶口蹄疫免疫不理想的原因分析

3.1.1 散養(yǎng)戶豬群首免日齡隨意性大且存在免疫干擾

規(guī)模場均制定有合理的免疫程序，嚴格執(zhí)行，首免日齡在30 d左右，與其他疫苗免疫均留有7～10 d的免疫間隔期，在避開母源抗體干擾的同時不會受到其他免疫的干擾，并且不斷結(jié)合生產(chǎn)和監(jiān)測，合理調(diào)整免疫程序，而散養(yǎng)戶的生豬免疫由包片獸醫(yī)負責，免疫時間根據(jù)包片獸醫(yī)的時間而定，隨意性相對較大，且多數(shù)包片獸醫(yī)執(zhí)行豬瘟、口蹄疫苗同免，容易造成免疫干擾，影響免疫效果。

3.1.2 散養(yǎng)戶豬群免疫頻次不夠

規(guī)模場種豬每年免疫3～4次，仔豬分別在30日齡和70日齡各免疫1次；而散養(yǎng)戶種豬僅春秋防各免疫1次，仔豬30日齡免疫1次，免疫頻次相對規(guī)模場減少一半，故免疫效果相對較差。

3.2 FMDV-NSP和病原學監(jiān)測的重要意義

在FMD診斷中, 區(qū)分免疫動物和自然感染動物是一項十分重要的內(nèi)容, 鑒別自然感染動物和免疫動物也是 OIE 判定一個國家有無口蹄疫流行的依據(jù)。動物感染后,既能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)蛋白抗體,又能產(chǎn)生非結(jié)構(gòu)蛋白抗體,而疫苗免疫動物主要誘導機體產(chǎn)生口蹄疫結(jié)構(gòu)蛋白抗體反應。所以,以NSP為抗原檢測動物體內(nèi)的NSP 抗體,是一種很好的區(qū)分感染動物和疫苗免疫動物的診斷方法。今后的研究方向?qū)⑹菣z測感染抗體的方法和檢測病毒RT-PCR方法結(jié)合為一體,使其能快速、可靠地區(qū)分注苗動物和自然感染動物。

目前，涪陵區(qū)主要開展的是血清學檢測，而對NSP抗體和病原學檢測較少，已經(jīng)不能滿足涪陵區(qū)生豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求，為應對口蹄疫隱性感染，降低散發(fā)風險，同時開展血清學與病原學檢測已顯得尤其重要。