施煜燕 周建波

(余姚市人民醫(yī)院消化內(nèi)科，浙江 余姚 315400)

潰瘍性結(jié)腸炎是原因不明的一種慢性非特異性炎癥性腸病，其發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量〔1〕。潰瘍性結(jié)腸炎具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，認(rèn)為主要與遺傳、免疫、環(huán)境及感染等多種因素相關(guān)〔2〕。研究顯示，炎癥因子、凝血功能和細(xì)胞免疫功能與潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)〔3～5〕。本研究探討老年潰瘍性結(jié)腸炎患者細(xì)胞炎癥因子、T淋巴細(xì)胞亞群和凝血功能的變化及意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇余姚市人民醫(yī)院于2010年1月至2014年12月收治的老年潰瘍性結(jié)腸炎患者125例作為觀(guān)察組，依據(jù)《中國(guó)炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識(shí)意見(jiàn)》〔6〕中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合潰瘍性結(jié)腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，且為活動(dòng)期；②年齡70～85歲；③自愿加入研究，簽訂知情同意書(shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并風(fēng)濕性疾病、感染、內(nèi)分泌疾病；②合并腫瘤者；③合并肺、腎、肝功能?chē)?yán)重異常者；④精神疾病者。觀(guān)察組男78例、女47例，年齡70～85〔平均(76.83±4.15)〕歲，按照病情嚴(yán)重程度分為輕度39例、中度55例、重度31例。另選同期健康體檢老年人50例作為對(duì)照組，男31例、女19例，年齡70～85〔平均(77.12±4.36)〕歲。

1.2主要試劑和儀器 ①細(xì)胞炎癥因子試劑盒：人白細(xì)胞介素(IL)-6、人腫瘤壞死因子(TNF)-α、人C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒，上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司；②外周T淋巴細(xì)胞：美國(guó)BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀配套試劑；③凝血功能指標(biāo)試劑盒：人纖維蛋白原(FIB)、人部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，南京基蛋生物科技有限公司試劑盒。全自動(dòng)生化分析儀(日立7600型)，流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD FACSCalibur)。

1.3細(xì)胞炎癥因子測(cè)定 所有研究對(duì)象于清晨空腹抽取外周靜脈血3 ml，以離心半徑15 cm，離心轉(zhuǎn)速3 000 r/min，離心時(shí)間10 min，分離血清，于24 h內(nèi)測(cè)定。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清IL-6、TNF-α和CRP含量，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定。

1.4外周血T淋巴細(xì)胞測(cè)定 所有研究對(duì)象于清晨空腹抽取外靜脈血3 ml，置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，一次加入CD3+、CD4+、CD8+抗體10 μl，放置于室溫條件下避光孵育30 min，然后加入溶血素200 μl于每管中，于室溫條件下避光放置15 min，裂解紅細(xì)胞。觀(guān)察溶液澄清透明后，加入1 ml預(yù)冷磷酸鹽緩沖液(PBS)中，再放置于室溫條件下以15 cm為離心半徑、3 000 r/min為轉(zhuǎn)速、12 min為離心時(shí)間，分離血清，然后再滴加100 μl的1%多聚甲醛溶液中固定，測(cè)定外周血T淋巴細(xì)胞亞群，應(yīng)用美國(guó)BD公司的流式細(xì)胞儀及配套試劑。

1.5凝血功能指標(biāo)測(cè)定 所有研究對(duì)象于清晨空腹抽取外周靜脈血，加入0.2 ml枸櫞酸鈉抗凝管中，以離心半徑15 cm，離心轉(zhuǎn)速3 000 r/min，離心時(shí)間10 min，分離血漿，于24 h內(nèi)測(cè)定，采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定FIB、APTT、PLT。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件行χ2、t及F檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清細(xì)胞炎癥因子水平比較 觀(guān)察組血清IL-6、TNF-α和CRP水平明顯高于對(duì)照組(均P<0.05)。重度組血清IL-6、TNF-α和CRP水平明顯高于輕度組和中度組，且中度組明顯高于輕度組(均P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 觀(guān)察組CD3+、CD4+和CD4+/CD8+明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。重度組CD3+、CD4+和CD4+/CD8+明顯低于輕度組和中度組，中度組CD3+、CD4+和CD4+/CD8+明顯低于輕度組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3兩組凝血功能指標(biāo)比較 觀(guān)察組FIB和PLT明顯高于對(duì)照組，APTT明顯低于對(duì)照組(均P<0.05)。不同嚴(yán)重程度潰瘍性結(jié)腸炎凝血功能指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表1 兩組血清細(xì)胞炎癥因子水平比較

與重度組比較：1)P<0.05；與中度組比較：2)P<0.05，下表同

表2 兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

表3 兩組凝血功能指標(biāo)比較

3 討 論

潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，認(rèn)為主要由多因素參與，本文主要從炎癥反應(yīng)、凝血功能及細(xì)胞免疫功能等方面探討〔9～11〕。IL-6是免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制及隨后的潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)腸腫瘤形成中，主要通過(guò)STAT3信號(hào)通路發(fā)揮重要作用。有研究顯示，活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎患者血清IL-6水平明顯高于非活動(dòng)性潰瘍性結(jié)腸炎，且隨著病情程度加重其水平明顯升高〔12〕。TNF-α是慢性非特異性炎癥性腸病病理進(jìn)程中的一種關(guān)鍵細(xì)胞因子，能夠通過(guò)啟動(dòng)細(xì)胞毒性、凋亡和急性期反應(yīng)及表達(dá)凝血因子和黏附分子等過(guò)程發(fā)揮重要作用。TNF-α血清水平與克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎的臨床活動(dòng)相關(guān)，近年來(lái)抗TNF抗體廣泛應(yīng)用于慢性非特異性炎癥性腸病治療，且取得良好臨床效果及證實(shí)TNF-α在結(jié)腸炎癥致病中具有關(guān)鍵意義〔13〕。CRP主要是由活化巨噬細(xì)胞分泌的一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，是機(jī)體炎癥反應(yīng)的敏感指標(biāo)。在自身免疫性疾病、心血管疾病及機(jī)體防御反應(yīng)中扮演重要角色〔14〕。本潰瘍性結(jié)腸炎患者血清IL-6、TNF-α和CRP水平明顯升高，且隨著病情加重升高越明顯。

潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，而免疫因素特別是CD4+T淋巴細(xì)胞等細(xì)胞亞群所起的重要作用廣泛認(rèn)可〔15〕。CD8+T淋巴細(xì)胞作用不明顯或者低于CD4+T淋巴細(xì)胞，一般在臨床應(yīng)用檢測(cè)水平不易被檢測(cè)出。研究報(bào)道顯示，潰瘍性結(jié)腸炎細(xì)胞免疫功能存在明顯異?！?6〕。本研究表明，潰瘍性結(jié)腸炎患者CD3+、CD4+和CD4+/CD8+水平降低，且隨著病情加重降低越明顯。

潰瘍性結(jié)腸炎常處于一種高凝狀態(tài)，其表現(xiàn)主要為微循環(huán)障礙和微血栓形成，是造成潰瘍性結(jié)腸炎惡化的一個(gè)重要原因。由于腸黏膜微血栓形成，由于缺血壞死，甚者會(huì)致使腸黏膜潰瘍的形成，加重了潰瘍性結(jié)腸炎患者結(jié)直腸黏膜的病變〔17〕。研究顯示，潰瘍性結(jié)腸炎患者纖溶和凝血異常與疾病的活動(dòng)性相關(guān)，F(xiàn)IB、APTT和PLT成為炎癥活動(dòng)程度的預(yù)測(cè)指標(biāo)，但凝血功能指標(biāo)與疾病的嚴(yán)重程度無(wú)明顯相關(guān)性〔18〕。本研究表明，潰瘍性結(jié)腸炎患者凝血功能指標(biāo)存在明顯異常，但與疾病嚴(yán)重程度無(wú)明顯相關(guān)性。綜上所述，老年潰瘍性結(jié)腸炎患者存在炎癥反應(yīng)、高凝狀態(tài)及細(xì)胞免疫功能下降，且炎癥因子和外周血T淋巴細(xì)胞亞群可對(duì)疾病病情判斷有指導(dǎo)意義。

1Feagan BG,Rutgeerts P,Sands BE,etal.Vedolizumab as induction and maintenance therapy for ulcerative colitis〔J〕.N Engl J Med,2013;369(8):699-710.

2胡 穎,范鐘麟,王學(xué)紅.潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制及臨床特征研究進(jìn)展〔J〕.醫(yī)學(xué)臨床研究,2012;29(10):2030-4.

3Feagan BG,Rutgeerts P,Sands BE,etal.Vedolizumab as induction and maintenance therapy for ulcerative colitis〔J〕.N Engl J Med,2013;369(8):699-710.

4李 梅,張?zhí)K閩.潰瘍性結(jié)腸炎病因分析及預(yù)防〔J〕.中醫(yī)學(xué)報(bào),2012;27(10):1343-5.

5董魁星,齊洪武.潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展〔J〕.臨床誤診誤治,2012;25(12):89-92.

6中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)炎癥性腸病協(xié)作組.中國(guó)炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識(shí)意見(jiàn)〔J〕.中華內(nèi)科雜志,2008;47(1):73-8.

7曹秀紅,張學(xué)彥,張曉娜.白介素在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展〔J〕.世界華人消化雜志,2011;5(30):3143-8.

8朱 立,王新月.潰瘍性結(jié)腸炎病因病機(jī)理論探討〔J〕.吉林中醫(yī)藥,2010;30(1):10-1.

9周婷婷,仝巧云.潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展〔J〕.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2012;21(12):1163-6.

10于海食,洪 纓,王玉蓉.潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010;26(2):323-5.

11李貞娟,張彩鳳,夏永華,等.潰瘍性結(jié)腸炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR4的表達(dá)及其與TNF-α和IL-6的相關(guān)性〔J〕.廣東醫(yī)學(xué),2011;32(9):1166-8.

12陳愛(ài)民,劉永芬,熊雯雯,等.芪仙湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者血清TNF-α,IL-8的影響及療效觀(guān)察〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011;17(8):255-7.

13董玉柱.潰瘍性結(jié)腸炎患者血清TNF-α、IL-8的檢測(cè)及意義〔J〕.山東醫(yī)藥,2010;50(47):97-8.

14李金奎.CRP,CA125在潰瘍性結(jié)腸炎患者血清中的水平及臨床意義〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2010;14(1):76-8.

15郭曉鶴,張彩鳳,夏永華,等.雙歧桿菌四聯(lián)活菌片聯(lián)合芪倍合劑對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者T細(xì)胞亞群及Fas/FasL系統(tǒng)表達(dá)的調(diào)節(jié)〔J〕.重慶醫(yī)學(xué),2014;5(14):1684-6.

16朱葉珊,劉 陽(yáng),李禾花.改良愈瘍湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響〔J〕.中國(guó)誤診學(xué)雜志,2012;12(12):2928-9.

17范如英,盛劍秋,楊欣艷,等.潰瘍性結(jié)腸炎患者凝血功能的改變〔J〕.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2011;20(6):530-1.

18劉聞鶯,劉欣艷,楊根妹,等.活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎凝血功能分析〔J〕.胃腸病學(xué),2013;18(10):615-8.