梁朝霞　陸東閣　葛林　張高明　徐慶雷

【摘要】 目的 探討分析子宮頸感染人乳頭瘤病毒（HPV）的基因分布特點(diǎn)。方法 選取120例疑似子宮頸HPV感染患者作為研究對(duì)象， 使用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)對(duì)患者宮頸脫落細(xì)胞臨床樣本進(jìn)行HPV基因檢測(cè)， 觀察HPV感染率及基因分布情況， HPV感染的年齡分布情況， HPV感染率與受教育程度的關(guān)系。結(jié)果 在120例患者中共檢測(cè)出17種基因亞型， 其中檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本108例， 最常見的感染亞型：高危型：HPV16（23.15%， 25/108）、HPV52（14.81%， 16/108）、HPV53（12.04%， 13/108）、HPV59（7.41%， 8/108）、HPV18（6.48%， 7/108）；低危型：HPV11（15.74%， 17/108）、HPV81（12.96%， 14/108）。

108例陽(yáng)性標(biāo)本中單一HPV基因亞型感染77例（71.30%）， 兩種及兩種以上的HPV混合型感染31例（28.70%）。40～50歲HPV感染率最高， 占53.70%（58/108）。初中及以下學(xué)歷患者感染率最高， 占40.74%（44/108）。

結(jié)論 子宮頸感染HPV的基因亞型主要為HPV16、HPV52、HPV18、HPV53、HPV59、HPV11、HPV81，

感染年齡大多在40～50歲之間， 隨著年齡的增長(zhǎng)感染率有上升趨勢(shì)， 感染型多為單一型。

【關(guān)鍵詞】 人乳頭瘤病毒；子宮頸；感染；基因分布

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.04.032

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一， HPV是引發(fā)宮頸癌的首要因素。據(jù)相關(guān)報(bào)道， 我國(guó)女性子宮頸癌的發(fā)病率為15.3%[1]。近年來(lái)， 我國(guó)宮頸癌的發(fā)病率越來(lái)越高， 且患者趨向于年輕化。就目前而言， 已鑒定出HPV有100多種亞型， 根據(jù)地區(qū)的差異發(fā)病的幾率也不同， 國(guó)內(nèi)研究子宮頸感染HPV的基因分布特點(diǎn)已成為熱點(diǎn)， 為積極治療宮頸癌做出臨床依據(jù)。本研究以本院2016年7月～2017年5月收治的120例疑似子宮頸HPV感染患者為依據(jù)， 分析HPV感染患者的基因分布特點(diǎn)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本院2016年7月～2017年5月收治的120例疑似子宮頸HPV感染患者為研究對(duì)象， 所有患者均進(jìn)行HPV基因型檢測(cè)， 患者年齡20～60歲， 平均年齡（36.6±

7.8）歲， 文化水平：初中及以下45例、高中42例、大學(xué)及以上33例， 所有患者至少有1年性生活史、無(wú)其他內(nèi)外科疾病且24 h內(nèi)無(wú)性生活， 非經(jīng)期采集樣本。

1. 2 標(biāo)本采集與保存 樣本采集前均經(jīng)患者同意， 由固定的醫(yī)師先用消毒棉球擦拭宮頸口分泌物， 用宮頸刷在宮頸口處順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3圈以上獲得足夠多的上皮細(xì)胞， 迅速放入

3 ml宮頸細(xì)胞保存液中， 沿著刷柄折痕折斷， 擰緊瓶蓋， 標(biāo)記好樣本， 放置在4℃的環(huán)境中保存， 嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作說(shuō)明進(jìn)行[2]， 5 d內(nèi)檢驗(yàn)。

1. 3 檢測(cè)方法 按照以下步驟進(jìn)行：①采用江蘇碩世生物提取試劑盒提取DNA， 子宮脫落細(xì)胞樣本保存液500 μl， 12000 r/min離心1 min， 將上清液丟棄， 使用試劑盒提取DNA；②HPV擴(kuò)增， 使用江蘇碩世生物DNA擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行預(yù)處理， 依據(jù)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行；③使用上海宏石SLAN-96S實(shí)時(shí)熒光PCR分析儀進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)。

1. 4 觀察指標(biāo) 觀察HPV感染率及基因分布情況， HPV感染的年齡分布情況， HPV感染率與受教育程度的關(guān)系。

2 結(jié)果

2. 1 HPV感染率及基因分布情況 在120例患者中共檢測(cè)出17種基因亞型， 其中檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本108例， 最常見的感染亞型：高危型：HPV16（23.15%， 25/108）、HPV52（14.81%， 16/108）、HPV53（12.04%， 13/108）、HPV59（7.41%， 8/108）、HPV18（6.48%， 7/108）；低危型：HPV11（15.74%， 17/108）、HPV81

（12.96%， 14/108）。108例陽(yáng)性標(biāo)本中單一HPV基因亞型感染77例（71.30%）， 其中低危型33例（42.86%）， HPV16、52、18、43在單一HPV基因亞型感染中檢出率分別為22.08%（17/77）、18.18%（14/77）、12.99%（10/77）、9.09%（7/77）；兩種及兩種以上的HPV混合型感染31例（28.70%）， 最多有五重感染；感染型多為單一型。

2. 2 HPV感染的年齡分布 40～50歲HPV感染率最高， 占53.70%（58/108）， 20～30歲組占10.19%（11/108）， 30～40歲組占17.59%（19/108）， 50～60歲組占18.52%（20/108）。

2. 3 HPV感染率與受教育程度的關(guān)系 初中及以下學(xué)歷患者感染率最高， 占40.74%（44/108）， 高中學(xué)歷占36.11%

（39/108）， 大學(xué)及以上學(xué)歷占23.15%（25/108）。

3 討論

宮頸癌是全世界女性比較常見的惡性腫瘤之一， 大量流行病學(xué)和分子生物學(xué)研究結(jié)果表明， HPV與宮頸癌及癌前病變密切相關(guān)[3-6]。在現(xiàn)階段中HPV是引發(fā)宮頸癌的明確致病因子， HPV高危型病毒幾乎存在于所有宮頸癌患者的病例樣本中。HPV的傳播方式主要以性傳播為主， 目前國(guó)內(nèi)各地區(qū)有關(guān)HPV感染與宮頸病變關(guān)系的調(diào)查研究已廣泛開

展[7]。通過(guò)HPV分型檢測(cè)技術(shù)來(lái)篩查宮頸癌， 對(duì)于宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及早期治療具有重要的臨床意義。endprint

子宮頸感染HPV由于所在的地區(qū)、所處的年齡不同感染情況存在很大的差異[8-10]。地理環(huán)境對(duì)HPV基因型的分類有直接而深刻的影響， 同時(shí)， 宮頸癌也受到HPV基因型的直接而深刻的影響。本研究顯示120例患者中檢測(cè)出HPV陽(yáng)性108例， 單一HPV基因亞型最多。因此開展宮頸癌健康知識(shí)的普及是十分有必要的。發(fā)病率以40～50歲最高， 占53.70%；其次為50～60歲， 占18.52%；宮頸癌的發(fā)病與年齡有一定的關(guān)系， 目前已經(jīng)普遍認(rèn)為該病在35～59歲高發(fā)。本研究的HPV陽(yáng)性也多集中于此年齡段。這可能和該年齡段的女性性生活狀況與生活習(xí)慣有關(guān)[3]。因此， 加強(qiáng)以上年齡段女性HPV普查工作， 對(duì)宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和早期治療具有重要意義。值得注意的是， 在20～30歲中的HPV陽(yáng)性發(fā)病率10%左右， 這可能與當(dāng)代社會(huì)的發(fā)展、性生活過(guò)早、過(guò)頻、多性伴侶及各種激素食品的食用現(xiàn)象的出現(xiàn)有關(guān)[2]。這提示宮頸癌的發(fā)病已經(jīng)逐漸年輕化。因此， 積極開展HPV感染基因亞型檢測(cè)以預(yù)防宮頸癌前病變的發(fā)生刻不容緩。本研究根據(jù)女性受教育程度的不同分類發(fā)現(xiàn)， 高學(xué)歷女性患病率較低， 原因可能是文化程度越高， 其居住環(huán)境、生活習(xí)慣、機(jī)體免疫力越強(qiáng)有關(guān)[4]。通過(guò)本次研究對(duì)于掌握本地區(qū)女性HPV感染的現(xiàn)狀與HPV型別分布狀態(tài)， 預(yù)防宮頸癌前病變和宮頸癌的發(fā)生具有重要的意義。

綜上所述， 子宮頸感染HPV的基因亞型主要為HPV16、HPV52、HPV18、HPV53、HPV59、HPV11、HPV81， 感染年齡大多在40～50歲之間， 隨著年齡的增長(zhǎng)感染率有上升趨勢(shì)， 感染型多為單一型。

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[收稿日期：2017-06-21]endprint