龔發(fā)萍，石卓功，黃佳聰，楊晏平，陳世祥

（1.西南林業(yè)大學(xué)，云南 昆明 650224；2.保山市林業(yè)技術(shù)推廣總站，云南 保山 678000；3.保山市隆陽區(qū)東祥林產(chǎn)品有限公司，云南 保山 678000）

滇橄欖Phyllanthus emblica Linn.又名余甘子，為大戟科葉下珠屬落葉喬木，分布于中國南部、西南部省區(qū)和印度、東南亞國家及中南半島[1]，野生資源以云南省最為豐富[2-3]。滇橄欖為生態(tài)經(jīng)濟兼用型樹種。其果實藥食同源，風(fēng)味獨特，具有良好的食用、保健及藥用價值，食用時先酸澀而后甘甜爽口，《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》、《藏藥標(biāo)準(zhǔn)》及《中國藥典》中均有收載，具有清熱利咽，潤肺化痰，健胃消食，收斂止瀉，護肝解酒毒，抗衰老，抗腫瘤，抗菌消炎，抗氧化，降脂減肥，降血壓及護膚養(yǎng)顏等功用[4-6]，商品利用價值較高。同時，滇橄欖具有經(jīng)濟壽命長，抗旱耐瘠薄，生長快結(jié)果早，豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，綠化效果好等優(yōu)良性狀，適宜干熱河谷地區(qū)造林綠化[7-9]。

國外滇橄欖育種研究工作早于國內(nèi)。1901年前后，美國、澳大利亞和古巴等對滇橄欖進行引種；印度對滇橄欖的研究比較深入，已篩選培育了一批良種在生產(chǎn)上推廣[10]。1980年以來，中國林業(yè)科學(xué)院資源昆蟲研究所及亞熱帶林業(yè)研究所、福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、云南省保山市林業(yè)技術(shù)推廣總站等單位在滇橄欖品種選育方面做了大量的研究工作；姚小華等[11]對滇橄欖的生物學(xué)特性進行了初步研究，李昆等[12]對野生滇橄欖果實類型及其分布特點進行了研究，吳建花等[8]、陳進等[13]對滇橄欖自然居群果實經(jīng)濟性狀變異進行了研究，龔發(fā)萍等[7]對云南省主要栽培的高黎貢山糯滇橄欖優(yōu)良無性系（云R-SC-PE-069-2013）進行了研究報道，陳敏等[4]等對福建、廣東、廣西等省區(qū)廣泛種植的粉甘、人面子、赤白、棗甘等進行了報道。尚未見較為系統(tǒng)的滇橄欖優(yōu)樹選擇及其優(yōu)樹無性系測定方面的研究報道。截至2016年，怒江流域干熱河谷地區(qū)滇橄欖栽培面積1.4萬hm2，滇中、滇西干熱河谷地區(qū)群眾種植滇橄欖的熱情高漲，滇橄欖產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為該地區(qū)的新興農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)，并且滇橄欖成為造林成效明顯的樹種之一。為此，自2011年9月筆者開展怒江流域滇橄欖優(yōu)樹選擇及其無性系測定，以期為滇橄欖種質(zhì)資源評價、良種選育及其產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供參考。

1 材料與方法

1.1 優(yōu)樹選擇地域與標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 優(yōu)樹選擇的地域

滇橄欖優(yōu)樹選擇在怒江流域滇橄欖集中分布的保山市隆陽區(qū)、龍陵縣、昌寧縣、施甸縣進行。該區(qū)域海拔535～1 700 m，年均氣溫14.8～25.6 ℃，年平均降雨量700～1 100 mm，具有明顯的“冬無嚴(yán)寒，夏有酷暑，雨熱同季，干濕分明”的低緯山地季風(fēng)氣候特點。

1.1.2 優(yōu)樹選擇的標(biāo)準(zhǔn)

植株生長、結(jié)果正常，連續(xù)3 a平均冠影鮮果產(chǎn)量大于等于2 kg/m2，單果質(zhì)量大于等于10 g、可食率大于等于80%、可溶性固形物含量大于等于5%、維生素C含量大于等于2.2 mg/g，酸澀味輕、口感好、酥脆；果實特大（平均質(zhì)量大于等于18 g）或口感較好的單株可降低選擇指標(biāo)。為便于產(chǎn)業(yè)化開發(fā)，以果大、酥脆口感好、維生素C及可溶性固形物含量較高作為主要考量指標(biāo)。

1.2 優(yōu)樹選擇方法與步驟

1.2.1 初 選

2011年6—9月，將選優(yōu)標(biāo)準(zhǔn)下發(fā)到涉及區(qū)域鄉(xiāng)林業(yè)站，并在調(diào)查區(qū)域鄉(xiāng)、村集市張貼以獎代補宣傳頁（40個果質(zhì)量≥1 kg、50個果質(zhì)量≥1 kg、55個果質(zhì)量≥1 kg、65個果質(zhì)量≥1 kg的植株分別獎勵3 000、2 000、600及300元），發(fā)動群眾報優(yōu)。根據(jù)報優(yōu)情況，于10月下旬—翌年1月果實成熟期，分單株實地調(diào)查平均單果質(zhì)量、口感、實測產(chǎn)量，合格者確定為備選株，并逐項調(diào)查填寫優(yōu)樹調(diào)查表，用紅色油漆在其樹干上記號、GPS定點，以備查找。

1.2.2 復(fù) 選

分單株從備選株上采集果實樣品（約100果/株），裝入專用樣品袋并編號，帶回室內(nèi)后及時復(fù)測單果質(zhì)量、口感，檢測果實橫徑、縱徑、核質(zhì)量及果肉可溶性固形物含量，計算可食率。檢測及計算結(jié)果與選優(yōu)標(biāo)準(zhǔn)對照，達標(biāo)者即確定為復(fù)選株。

1.2.3 決 選

對確定的復(fù)選株，根據(jù)其成熟期早晚，于2012年10月—2013年1月及2013年10月—2014年1月果實充分成熟時全株實測產(chǎn)量，計算連續(xù)3 a每平方米冠影鮮果平均產(chǎn)量，符合標(biāo)準(zhǔn)者即決選為優(yōu)樹。

1.3 優(yōu)樹指標(biāo)測定與計算

以單株為單位，剔除樣品果實中畸形、病蟲害等不正常果后充分混合均勻，隨機抽取30粒，逐粒測定各項經(jīng)濟性狀指標(biāo)。利用電子天平稱取單果質(zhì)量（精度0.1 g）；剔除每粒果實的果肉后，稱取核質(zhì)量（精度0.1 g），計算可食率；利用數(shù)顯糖度計測量每粒果實的果肉可溶性固形物含量（精度0.1%）；總糖、總酸、粗纖維、維生素C含量分別按照GB/T 5009.7-2008、GB/T 12456-2008、GB/T 5009.10-2003及GB/T 6195-1986規(guī)定的方法進行測定。

可食率＝[(單果質(zhì)量－核質(zhì)量)/單果質(zhì)量]×100%。

1.4 優(yōu)樹無性系測定

1.4.1 試驗地概況

試驗地位于隆陽區(qū)潞江鎮(zhèn)勐柳村鐵場坡（東經(jīng) 98°50′49″、北緯 25°07′23″、海拔 810 m）。該地屬山地南亞熱帶季風(fēng)氣候，年均氣溫21.3 ℃，最熱月7月平均氣溫29.3 ℃，最冷月1月平均氣溫13.2 ℃，極端最高氣溫40.4 ℃，極端最低氣溫0.2 ℃；干濕季分明，雨熱同季，年均降雨量845.5 mm，6—9月為雨季，降雨量占全年的72.5%；年日照時數(shù)2 975 h，無霜期340 d以上。坡度17°，土壤為紅壤，土層厚度大于1.0 m，前茬種植作物為甘蔗。

1.4.2 試驗設(shè)計

8處理、6株條狀小區(qū)、5重復(fù)隨機區(qū)組試驗設(shè)計，株行距3 m×4 m，建立優(yōu)樹無性系測定試驗林0.32 hm2。測定林采用相同的栽培技術(shù)。

1.4.3 栽培技術(shù)

2013年3—4月，溝槽狀整地，規(guī)格為寬、深各60 cm。整地結(jié)束30 d后，按每米溝槽施腐熟農(nóng)家肥10 kg、磷肥2 kg，與表層熟土混勻后回填，邊回土邊踏實，回土高度與地面持平。7月種植地徑大于等于0.3 cm且苗高大于等于25 cm的當(dāng)年生容器播種苗，種植后澆足定根水。2014年2月上旬，按試驗設(shè)計，以決選優(yōu)樹1年生枝條作為接穗，采用切接方法高接在上述實生滇橄欖砧木上，嫁接成活后適時解綁。每年3月上旬，株施尿素0.2～1.5 kg；5月下旬—6月中旬，每株施磷肥0.4～2.5 kg，鉀肥0.10～0.25 kg，尿素0.1～0.5 kg；10月每株施有機肥5～20 kg、磷肥0.5～3.0 kg。6月、10月各除草1次。以變則主干形為主要樹型，每株選留5～12 個主枝，各主枝成螺旋狀均勻分布在主干不同方向。可全年進行整形修剪，以1—2月為主；修剪主要采用摘心、短截、回縮、疏枝、除萌、曲枝、拉枝及長放等方法。適時防治病蟲害。

1.5 物候期觀測

于2015年、2016年對無性系測定林各優(yōu)樹無性系的萌芽期、展葉期、花期、果實成熟期、落葉期等主要物候期進行觀測記錄，取2 a平均值。物候期均指其起始日，其中萌芽期為有5%的芽膨大且現(xiàn)紅綠色脫落枝原始體的日期，展葉期為脫落枝伸長生長且脫落枝基部有5%的葉片展開的日期，雌花期為有5%雌花的3個柱頭向外側(cè)開張并具光澤分泌物的日期，雄花期為脫落枝伸長生長且有5%單花開放的日期，果實成熟期為果實生理成熟率達20%的日期，落葉期為葉片自然脫落達20%或脫落枝自然脫落達5%的日期。

1.6 生長結(jié)果數(shù)據(jù)觀測與處理

在2015年各優(yōu)樹無性系果實成熟期，實測單株產(chǎn)量，12月觀測樹高（精度0.1 m）、地徑（精度0.1 cm）、冠幅（精度0.1 m2）。

應(yīng)用SPSS 20.0軟件GLM 模型，分處理和單株計算2015年各無性系樹高、地徑、冠幅及果實產(chǎn)量的平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤，進行方差分析與Duncan多重比較；采用Pearson系數(shù)，對不同性狀間的相關(guān)性進行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 選優(yōu)結(jié)果

共初選確定備選株20株，復(fù)選確定復(fù)選株11株，再經(jīng)連續(xù)2 a實測果實產(chǎn)量決選優(yōu)樹8株。決選8株優(yōu)樹地理位置、立地氣候及其概況詳見表1。

表1 決選滇橄欖優(yōu)良單株概況、地理位置及立地氣候條件?Table1 Basic information, location and habitat meteorological conditions of P. emblica plus trees in final election

由表1可知：優(yōu)樹多來自海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃之間的半干熱地區(qū)。優(yōu)樹多為喬木狀（僅P3表現(xiàn)為灌木狀），優(yōu)勢木。

2.2 決選優(yōu)樹果實經(jīng)濟性狀

決選優(yōu)樹果實的經(jīng)濟性狀詳見表2。

由表2可知：8株優(yōu)樹果實經(jīng)濟性狀較為優(yōu)良，平均單果質(zhì)量14.9 g，可食率86.71%，果肉可溶性固形物含量16.81%，總糖含量2.38%，總酸含量3.64%，粗纖維含量2.89%，維生素C含量4.90 mg/g；3 a平均單位冠影面積果實產(chǎn)量3.16 kg/m2。其中，平均單果質(zhì)量15 g以上的大果型優(yōu)樹5株（P3、P4、P6、高、亮），皆分布在海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃之間的半干熱地區(qū)。

表2 決選8個滇橄欖優(yōu)良單株果實經(jīng)濟性狀Table2 Fruit economic characteristics of the eight P. emblica plus trees in final election

同時，選擇的8株優(yōu)樹平均單果質(zhì)量變動幅度9.8～17.5 g，果肉可溶性固形物含量變動幅度6.8%～28.1%，可食率變動幅度83.4%～90.8%，連續(xù)3 a單位冠影面積產(chǎn)果量變動幅度2.2～5.1 kg/m2，粗纖維含量變動幅度1.76%～3.92%，總糖含量變動幅度1.28%～6.80%，總酸含量變動幅度0.65%～8.71%，維生素C和口感各不相同，說明不同優(yōu)樹間果實性狀、產(chǎn)量及口感等差異性仍然較大，有必要進一步開展無性系測定、性狀觀測與評價。

2.3 優(yōu)樹無性系主要物候期

8個滇橄欖優(yōu)樹無性系在怒江流域海拔810 m地區(qū)的主要物候期見表3。

由表3可知，8個滇橄欖優(yōu)樹無性系的芽萌發(fā)期基本一致，為2月中旬；展葉期基本一致，為3月上中旬；花期一致性亦較高，為3月下旬至4月上旬，多數(shù)情況下，雌花期較雄花期早1～2 d；果實成熟期相差較大，達80 d左右。以P2果實成熟期最早，為9月20日左右；以“亮”最晚，為12月上旬成熟；多數(shù)無性系的果實成熟期為10月中旬。落葉期相差約20 d，以P1、P2、P5、P6這4個無性系落葉較早，為1月中下旬，以P3、“亮”這2個無性系落葉最晚，為2月上旬。栽培條件下，滇橄欖具有明顯的邊落葉邊萌芽特點。

表3 決選8個滇橄欖優(yōu)樹無性系的主要物候期?Table3 Main phenological periods of the eight P. emblica plus tree clones in final election

2.4 優(yōu)樹無性系早期生長情況

8個優(yōu)樹無性系各指標(biāo)的方差分析結(jié)果（見表4）表明：嫁接第2年（2015年）8個滇橄欖優(yōu)樹無性系間的樹高、地徑、冠幅生長差異達極顯著水平（P＜0.01）。嫁接第2年，8個優(yōu)樹無性系的平均樹高2.6 m、地徑6.6 cm、冠幅8.2 m2（見表5）；樹高生長值以P6最大，為2.83 m，以P5最低，為2.22 m，P5高生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）；地徑生長值以P2最大，為7.34 cm，以P4最低，為5.7 cm，P4地徑生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）；冠幅值以“高”最大，為9.15 m2，以P5最低，為6.0 m2，P5冠幅生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）（見表5）。

表4 決選8個滇橄欖優(yōu)樹無性系生長和產(chǎn)量指標(biāo)的方差分析Table4 Variance analysis of growth and yield indexes among the eight P. emblica plus tree clones in final election

表5 決選8個滇橄欖優(yōu)樹無性系生長和產(chǎn)量指標(biāo)的多重比較分析及變異系數(shù)（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤）?Table5 Multiple comparisons analysis and variation coefficients of growth and yield indexes of the eight P. emblica plus-tree clones in final election (mean±standard error)

2.5 優(yōu)樹無性系早期結(jié)實情況

方差分析結(jié)果（見表4）表明：嫁接第2年（2015年）8個滇橄欖優(yōu)樹無性系間的果實產(chǎn)量差異達極顯著水平（P＜0.01）。嫁接第2年8個優(yōu)樹無性系平均單株果實產(chǎn)量為877 g（見表5），平均單株果實產(chǎn)量以P2為最高（5 300 g），P2單株果實產(chǎn)量與P1、P3、P4、P5、P6、“高”、“亮”7個無性系單株間果實產(chǎn)量差異達顯著水平（P＜0.05），P1、P3、P4、P5、P6、“高”、“亮”7個無性系單株間單株果實產(chǎn)量差異不顯著。其中，P5少量開花未結(jié)實，P1、P3、 P6單株果實產(chǎn)量在10～20 g之間，P4、“高”和“亮”單株果實產(chǎn)量在220～540 g之間（見表5）。說明除P5外，其他7個滇橄欖優(yōu)樹無性系具有早期（嫁接第2年）結(jié)實性，尤以P2早實豐產(chǎn)性最好。

2.6 優(yōu)樹無性系生長、結(jié)實性狀間的相關(guān)性

為探討參試8個滇橄欖優(yōu)樹無性系生長與結(jié)實性狀間的相互影響，分析其樹高、地徑、冠幅與結(jié)實量之間的相關(guān)性（見表6）。結(jié)果表明：8個滇橄欖優(yōu)樹無性系早期樹高、地徑、冠幅三者間呈極顯著正相關(guān) （P＜0.01）；單株結(jié)實量與地徑極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與冠幅顯著相關(guān)（P＜0.05），與樹高生長的相關(guān)性不顯著（P≥0.05）。

3 結(jié)論與討論

通過制定優(yōu)樹選擇標(biāo)準(zhǔn)，按照初選、復(fù)選、決選的工作步驟，初選優(yōu)樹20株，復(fù)選11株，決選8株。決選的8株優(yōu)樹中，平均單果質(zhì)量15 g以上的大果型優(yōu)株5株，皆分布在海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃的半干熱河谷區(qū)，這與吳建花等[8]開展滇西地區(qū)滇橄欖自然居群果實經(jīng)濟性狀變異研究結(jié)論一致，說明怒江流域海拔1 300 m左右的中海拔半干熱河谷地區(qū)有利于培育大果型滇橄欖，在產(chǎn)業(yè)基地規(guī)劃建設(shè)中應(yīng)重視這一點并加以利用。

表6 決選8個滇橄欖優(yōu)樹無性系生長結(jié)實性狀間的相關(guān)性?Table6 Correlationship of growth and yield characteristics of the eight P. emblica plus-tree clones in final election

優(yōu)樹選擇結(jié)果表明，廣泛宣傳、以獎代補、群眾報優(yōu)是發(fā)現(xiàn)資源量巨大、分布范圍較廣的滇橄欖優(yōu)良變異單株快速且有效的方法之一；怒江流域具有分布廣泛而保存完好的滇橄欖原生林分[14]，在其長期異花授粉雜交繁衍過程中產(chǎn)生和保存了大量的遺傳變異[15]，調(diào)查、發(fā)掘和利用這些變異，是對滇橄欖進行遺傳改良、選育良種的捷徑。

優(yōu)樹無性系對保存優(yōu)樹性狀具有較高的可靠性[16-17]。決選的8株優(yōu)樹在單果質(zhì)量、可溶性固形物含量、可食率、產(chǎn)量等方面存在的明顯遺傳差異，是建設(shè)種質(zhì)資源收集圃，進一步開展種質(zhì)評價、選育良種的遺傳基礎(chǔ)；同時，優(yōu)樹無性系收集為長期保存優(yōu)樹種質(zhì)，系統(tǒng)開展其營養(yǎng)生長及生殖生長節(jié)律與果實經(jīng)濟性狀觀測評價，及雜交育種工作創(chuàng)造了條件。

8個滇橄欖優(yōu)樹無性系早期（嫁接第2年）樹高、地徑、冠幅三者間呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；單株結(jié)實量與地徑呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與冠幅顯著相關(guān)（P＜0.05），與樹高生長的相關(guān)性不顯著（P≥0.05）；研究結(jié)果與王明懷等[18]對油茶無性系及楊艷等[19]對黃梔子生長結(jié)果規(guī)律的研究結(jié)果一致。說明促進主干增粗及增加冠幅是滇橄欖栽培早結(jié)實、多結(jié)實的關(guān)鍵因素之一。

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