周琳+于洋

摘要：優(yōu)化干姜和丹參有效成分提取方法。方法：以提取率和有效成分含量為指標(biāo)，L9（34）正交實(shí)驗(yàn)考察液料比、溶劑濃度、提取時(shí)間和提取次數(shù)，優(yōu)化活血中藥有效成分提取條件。結(jié)果：最佳提取條件為液料比1∶16，提取75min，提取液濃度在80%，提取3次。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的提取方法穩(wěn)定、可行。

關(guān)鍵詞：干姜；丹參； 6-姜酚；丹參酮ⅡA

中圖分類號(hào)： R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.02.017

干姜（Rhizoma Zingiberis.）為姜科姜素植物的干燥根，主要含有干姜揮發(fā)油和姜辣素，具有溫中助陽，對于體虛有寒的患者或者冬季四肢冷感較甚的人群有很好的作用[1]。丹參（Salviae Miltiorrhiza Bge.）屬唇形科植物，它的干燥根和莖主要含有丹參酮，有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰，胸痹心痛，脘腹脅痛的功效[2]。干姜和丹參均味性偏溫，辛散，合用可起到活血化瘀、補(bǔ)虛、溫通經(jīng)脈的作用。提取干姜和丹參有效成分制備成便于攜帶的劑型，可減少傳統(tǒng)中藥泡腳中藥液熬制過程，方便中藥足??；制備成劑型后中藥足浴產(chǎn)品與直接用中藥材足浴相比，成品體積小易于攜帶，使用方便，保質(zhì)期更長。

1 實(shí)驗(yàn)儀器試劑

干姜、丹參飲片（四川利民中藥飲片有限公司）；乙醇（天津市永達(dá)化學(xué)試劑有限公司）安捷倫1200高效液相色譜色譜儀，C18柱（4.6mm×150mm，5μm）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 中藥有效成分的提取

按干姜：丹參（5∶1）的比例分別稱取干姜10.0g、丹參2.0g。加熱回流法提取，以提取物粉末量、提取液中6-姜酚和丹參酮ⅡA濃度分別指標(biāo)，L9（34）正交試驗(yàn)考察液料比、乙醇濃度和提取時(shí)間對提取效果的影響，優(yōu)化提取工藝[3-4]，正交試驗(yàn)因素水平見表1。

2.2 正交試驗(yàn)提取物測定方法

提取液經(jīng)濃縮后噴霧干燥，稱取粉末重量。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配置，精密稱定1.0mg 6-姜酚和0.2mg丹參ⅡA對照品，加甲醇溶解定容至10mL容量瓶中。以十八烷基鍵合硅膠為填充劑（4.6mm×150mm，5μm），甲醇-0.02 % 磷酸溶液（75∶25）為流動(dòng)相；檢測波長為270nm，流速為1.0mL/min，柱溫25℃，進(jìn)樣體積10μL，理論板數(shù)按丹參ⅡA 峰計(jì)算不應(yīng)低于4000，理論板數(shù)按6-姜酚峰計(jì)算不應(yīng)低于5000。

準(zhǔn)確稱定取1.0mL試樣溶于甲醇后定溶至10mL，取1mL稀釋后樣品轉(zhuǎn)移至離心管中，2000r/min離心2min，取上清用0.45μm微膜過濾后轉(zhuǎn)移至樣品瓶中。按上述色譜條件進(jìn)樣10μL，外標(biāo)一點(diǎn)法測定樣品中6-姜酚和丹參酮ⅡA含量。

2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

為確定該工藝的優(yōu)劣和穩(wěn)定性，據(jù)所篩選的工藝條件，進(jìn)行了3批驗(yàn)證試驗(yàn)，稱取干姜10.0g、丹參2.0g各3份。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)L9（34）試驗(yàn)分別對提取物粉末重量、6-姜酚含量和丹參酮ⅡA含量進(jìn)行測定，結(jié)果見表2，數(shù)據(jù)處理結(jié)果見表3。

由表3可知，影響干姜和丹參提取物粉末量主要因素C>D>A>B，最佳提取條件為A3B3C3D3即液料比1∶16，提取75min，提取液濃度在80%，提取三次。影響干姜6-姜酚提取率的主要因素D>A>B>C，最佳提取條件為A1B3C3D3即液料比1∶8，提取75min，提取液濃度在80%，提取三次。影響丹參酮ⅡA提取率的主要因素D>A>B>C，最佳提取條件為A3B3C3D3即液料比1∶16，提取75min，提取液濃度在80%，提取3次。根據(jù)提取物重量、6-姜酚提取率和丹參酮ⅡA提取率得出最佳提取條件為液料比1∶16，提取75min，提取液濃度在80%，提取三次。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果見表4，結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的提取方法穩(wěn)定、可行。

4 討論

在2015版《中國藥典》中干姜和丹參的色譜測定條件不同，經(jīng)過查閱文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定了C18柱（4.6mm×150mm，5μm），以甲醇- 0.02 % 磷酸溶液（75∶5）為流動(dòng)相；流速為1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長為270nm，進(jìn)樣體積為10μL的色譜條件。在該色譜條件下均能測定出較好的吸收峰，丹參酮ⅡA的最大吸收波長為270nm，6-姜酚在270nm～280nm均有較大吸收，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證檢測波長確定為270nm。本實(shí)驗(yàn)提取干姜和當(dāng)歸兩味性均偏溫，活血化瘀，溫通經(jīng)脈中藥主要有效成分，為中藥保健品加工提供參考。

參考文獻(xiàn)

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