(江蘇省泰興市畜牧獸醫(yī)中心防疫站,江蘇泰興 225400)
由于受到理念、資金以及技術(shù)等多種因素的影響,相對于畜牧養(yǎng)殖業(yè)的整體發(fā)展而言,基層的獸醫(yī)實驗室建設(shè)還是相對滯后了不好,這樣的話,就很容易導(dǎo)致疾病的診斷受到影響。由此可見,如何進(jìn)一步做好基層獸醫(yī)實驗室的建設(shè)尤為關(guān)鍵。
疫病在畜禽養(yǎng)殖過程中是不可避免的,如何做出快速、科學(xué)、準(zhǔn)確診斷,從而為后續(xù)的治療與預(yù)防奠定有力的基礎(chǔ)尤為關(guān)鍵。為此,文章針對幾種常見疫病的實驗室診斷技術(shù)展開研究。
2.1.1 口蹄疫概述
口蹄疫的主要致病病毒就是FMDV,也就是口蹄疫病毒,是一種急性的、高度接觸性質(zhì)的傳染病,在臨床上的主要癥狀表現(xiàn)就是在某些部位出現(xiàn)水泡或者是潰爛,主要就是口腔的黏膜、舌頭表面以及鼻鏡和蹄部或者是乳房等。雖然通過上述這些表面癥狀就能夠進(jìn)行初步診斷,但是要想確診,就必須結(jié)合實驗室診斷。
2.1.2 口蹄疫實驗室診斷
目前口蹄疫的實驗室診斷主要有兩種方法,一種就是血清學(xué)的診斷,一種就是ELISA診斷試劑盒。
血清學(xué)的診斷方法在對口蹄疫病毒的檢測方面效果顯著,目前應(yīng)用廣泛的就是瓊脂擴(kuò)散實驗、補體結(jié)合試驗以及中和試驗和間接血凝試驗、酶聯(lián)免疫吸附實驗等。
瓊脂擴(kuò)散實驗?zāi)軌驅(qū)Σ《镜目乖涂贵w進(jìn)行檢測,而且48h內(nèi)就可以獲取結(jié)果;補體結(jié)合實驗同樣可以對抗體和抗原進(jìn)行鑒定,而且可以實現(xiàn)定量,但是這種方法的敏感性比較差;口蹄疫反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)是適用于口蹄疫病毒的檢測、診斷以及流行病學(xué)調(diào)查。
關(guān)于診斷試劑盒,目前是應(yīng)用較為廣泛的一種檢測方法,結(jié)果準(zhǔn)確,時間段,只要嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作就可以,具體較高的實效性,對于基層動物實驗室的建設(shè)而言,是可以應(yīng)用和推廣的。
2.2.1 藍(lán)耳病概述
藍(lán)耳病也就是豬繁殖和呼吸綜合征,主要的致病病毒就是豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒,是一種傳染病,不僅僅會影響到生豬的正常生長發(fā)育,同時很容易導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,因此做好實驗室診斷是至關(guān)重要的。
2.2.2 藍(lán)耳病的實驗室診斷
目前應(yīng)用比較廣泛的診斷方式主要有:
第一種就是血清學(xué)診斷
免疫過氧化物酶單層試驗,是最好使用的檢測方法,目前應(yīng)用較為廣泛,敏感性和特異性都是比較理想的,可以用于藍(lán)耳致病病毒的抗原檢測、病毒鑒定以及血清的抗體檢測等,主要原理就是通過固相載體對于抗原的吸附,加入被檢測樣品之后,會有抗原抗體復(fù)合物的形成,再加入酶標(biāo)記的抗體后,由于底物的參與,而又顏色顯現(xiàn)。
間接酶聯(lián)免疫吸附試驗主要的原理就是酶和抗體的蛋白分子之間是能夠發(fā)生交聯(lián)的,但是無論是抗體,還是酶的活性,都不會因此喪失,依然會有特異性免疫反應(yīng)的發(fā)生,從而形成免疫復(fù)合物,通過底物的參與,加上酶的催化,出現(xiàn)顏色反應(yīng),相對于前一種方法來說,在敏感性以及特異性和符合率方面的表現(xiàn)更加理想。
中和試驗是傳統(tǒng)血清學(xué)檢測手段中敏感性和特異性最好的一種方法,可以用來血清中抗體的測定或者是病原的鑒定。
上述方法可以說是對于基層的獸醫(yī)工作者和實際生產(chǎn)者來說,更加適用的幾種方法,更加簡便,而且準(zhǔn)確。
第二種就是分子生物學(xué)診斷
分子生物學(xué)診斷技術(shù)是近些年出現(xiàn)的檢測技術(shù),主要就是免疫膠體金技術(shù)以核酸探針原位雜交技術(shù)等,對于基層獸醫(yī)工作站來說,由于受到儀器、技術(shù)等因素的限制,在應(yīng)用和推廣方面還是面臨著不少的問題與困境。
2.3.1 羊小反芻概述
羊小反芻,也可以稱之為動物瘟,主要的致病病毒就是小反芻獸疫病毒,是一種急性的傳染病,而發(fā)熱、流鼻涕以及腹瀉則是其最為典型的癥狀表現(xiàn)。
2.3.2 羊小反芻的實驗室診斷
第一種就是病毒核酸檢測技術(shù)
病毒核酸技術(shù)可以說是一種特異性的PPR診斷方法,在敏感性、特異性以及重復(fù)性的表現(xiàn)方面都是比較理想的,最低可以檢測出30個和306個拷貝的模板,檢測快速,而且可以為后續(xù)毒株類型及群的確定提供有力的依據(jù)。
第二種就是酶聯(lián)免疫吸附試驗
這種可以說是目前應(yīng)用最為廣泛的方法,但是這種方法無法實現(xiàn)對強病毒和弱病毒感染的區(qū)分,但是在特異性和敏感性的表現(xiàn)不錯。
第三種就是間接英冠看題試驗
這種方法簡單、易于操作,結(jié)果可靠,特異性好,值得進(jìn)一步應(yīng)用與推廣。
2.4.1 雞禽流感概述
雞禽流感的致病病原及時禽流感病毒,多發(fā)生于冬春和秋冬交替的時節(jié),主要的傳播方式就是水平傳播,呼吸道和消化道則是感染的重要途徑,有急性和慢性之分。
2.4.2 雞禽流感的實驗室診斷
關(guān)于雞禽流感的實驗室診斷主要就是以禽流感病毒的分離鑒定或者是血清學(xué)的檢測結(jié)果,就可以進(jìn)行確診了,主要方法就是病原學(xué)的檢測、血清學(xué)的檢測以分子的生物學(xué)診斷技術(shù)。
在對病毒進(jìn)行分離的時候,采用式雞胚尿囊擴(kuò)增的方法和超速離心純化的方法,在進(jìn)行血凝和血凝抑制的時候,實現(xiàn)進(jìn)行16種標(biāo)準(zhǔn)HA抗血清的制備;瓊脂擴(kuò)散實驗主要就是雙向的、免疫單幅的以及對流免疫電泳等,簡單、高校、快捷是主要的特點,同時可以實現(xiàn)定性和定量的檢測。熒光抗體標(biāo)記以及沒臉棉衣不僅僅靈敏度好,而且可以進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的操作,更加便于對結(jié)果進(jìn)行深入分析;至于ELISA檢測的方法,如果是對HA進(jìn)行檢測,靈敏度可以達(dá)到100%,如果是對HI進(jìn)行檢測,靈敏度也超過了92%。
對于基層的獸醫(yī)實驗室建設(shè)而言,最為重要的就是如何有效解決資金、技術(shù)以及人員和理念的問題。
理念是先知,也是行動的先導(dǎo),隨著畜禽養(yǎng)殖發(fā)展規(guī)模的不斷擴(kuò)大,基層的獸醫(yī)實驗室作用日趨重要,因此,一定要充分意識到自己所從事工作的重要作用和積極意義,進(jìn)而以主人翁的責(zé)任感和使命感投入到各項實際工作中去,為進(jìn)一步做好各種常見疫病的實驗室診斷做出積極的努力。
另外就是對于政府部門而言,一定要在立足實際的基礎(chǔ)上,加大對基層獸醫(yī)實驗室建設(shè)的重視程度,在政策上,在資金上,給予更大的支持,能夠吸引更多的人才,這樣基層實驗室的建設(shè)進(jìn)程才能夠不斷加快,才能夠更好發(fā)揮其應(yīng)有的積極效用。
總而言之,做好基層實驗室的建設(shè)刻不容緩,只有這樣,才能針對各種常見的疫病做好實驗室診斷,才能夠更加快速對疫病進(jìn)行確診,才能為后續(xù)的治療與防控提供堅實、有力的基礎(chǔ)。
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