亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        慢性心衰大鼠心肌細(xì)胞凋亡、心肌纖維化及其相關(guān)性研究

        2018-01-24 06:31:43李慧萍甘世保李麗娟潘興華
        西南國(guó)防醫(yī)藥 2018年1期
        關(guān)鍵詞:切片心肌細(xì)胞心衰

        魏 玲,李慧萍,魏 偉,劉 茜,尹 娜,甘世保,楊 靜,李麗娟,潘興華

        心肌重構(gòu)是目前公認(rèn)的慢性心衰的病理生理機(jī)制,心肌細(xì)胞凋亡及心肌纖維化是其重要的病理基礎(chǔ)。本研究探討了慢性心衰大鼠心肌細(xì)胞凋亡及心肌纖維化的變化及其兩者的相互關(guān)系。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型建立 SPF級(jí)健康雄性SD大鼠 20 只,約 3 月齡,體重(300±30)g,由昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供[許可證號(hào):SCXK(滇)2011-0005],經(jīng)過適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后,隨機(jī)分成心衰組及正常組。心衰組連續(xù)腹腔注射異丙腎上腺素,3 mg/(kg·d),共14 d,以建立大鼠慢性心衰模型;正常組則同步腹腔注射等體積生理鹽水。末次注射后2 w,進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢測(cè),以射血分?jǐn)?shù)≦50%為造模成功[1]。

        1.2 心肌組織標(biāo)本的制備 實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一夜,全部大鼠禁食、水,實(shí)驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天稱取大鼠體重后,麻醉大鼠,剪開胸腔,取出心臟,用冰生理鹽水洗滌血污,剔除脂肪、血管等非心肌組織后,無菌紗布吸干心臟表面,取左心室部分心肌組織,用4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,制作心肌標(biāo)本石蠟切片。

        1.3 HE染色 心肌標(biāo)本采用常規(guī)HE染色法,切片經(jīng)蘇木素染色后,用伊紅液復(fù)染,在光學(xué)照相顯微鏡下觀察并采圖。

        1.4 Masson染色 心肌標(biāo)本石蠟切片常規(guī)脫蠟脫水,Weigert鐵蘇木素染色5 min,自來水洗,用1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒,流水沖洗數(shù)分鐘,麗春紅酸性品紅液染色5 min,蒸餾水快速?zèng)_洗,1%磷鉬酸水溶液處理5 min,不水洗用苯胺藍(lán)染液復(fù)染5 min,1%冰醋酸浸泡1 min,95%酒精多次脫水,無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固,顯微鏡下觀察,采集圖像分析。

        1.5 TUNEL染色 心肌標(biāo)本石蠟切片常規(guī)脫蠟脫水,用蛋白酶K工作液覆蓋組織,37℃孵育30 min。PBS沖洗3次,5 min/次。制備TUNEL染色混合液,取Tunel試劑盒內(nèi)適量 TdT和 dUTP按 2∶29混合,加到圈內(nèi)覆蓋組織,37℃孵育2 h,PBS沖洗3次,5 min/次。切片稍甩干后,每張切片加50 μl converter-POD覆蓋組織,37℃孵育30 min。PBS洗滌3次,5 min/次,切片上滴加適量DAB顯色液,顯微鏡下控制顯色時(shí)間,蘇木素復(fù)染3 min左右,自來水洗,將切片依次放入75%乙醇6 min、85%乙醇6 min、無水乙醇Ⅰ6 min、無水乙醇Ⅱ6 min、二甲苯Ⅰ5 min脫水透明,中性樹膠封片。

        1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分率表示,采用χ2檢驗(yàn),兩變量相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 模型建立 根據(jù)心臟彩超結(jié)果及判定標(biāo)準(zhǔn)(LVEF≤50%),心衰組制備心衰模型均成功。造模后2 w,正常組射血分?jǐn)?shù)為(73.56±5.12)%,顯著高于心衰組的(41.32±6.86)%(P< 0.01)。

        2.2 兩組心肌組織結(jié)構(gòu)HE染色比較 HE染色結(jié)果顯示,心衰組心肌細(xì)胞肥大、壞死、心肌纖維化伴炎性細(xì)胞浸潤(rùn),心肌細(xì)胞間隙增大伴水腫。而正常組心肌組織心肌纖維排列整齊,細(xì)胞形態(tài)正常,未見上述病理改變(圖1)。

        2.3 兩組心肌組織結(jié)構(gòu)Masson染色比較 正常組心肌組織纖維排列整齊,僅見少量的膠原纖維增生。心衰組心肌纖維化明顯,大量心肌細(xì)胞壞死被膠原纖維替代,殘留的心肌細(xì)胞排列紊亂。心衰組膠原容積比(CVF%)為(55.23±3.55)%,較正常組的(0.32±0.09)%顯著增加(P< 0.01)。

        2.4 兩組心肌細(xì)胞凋亡比較 正常組心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量很少,而心衰組心肌細(xì)胞凋亡率為(44.36±4.17)%,較正常組的 (1.25±0.66)%顯著增加(P<0.01,圖 3)。

        2.5 心肌膠原容積比與心肌細(xì)胞凋亡率的相關(guān)性分析 心衰組心肌膠原容積比與心肌細(xì)胞凋亡率資料均呈正態(tài)分布,Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,心肌膠原容積比與心肌細(xì)胞凋亡呈顯著正相關(guān)(r=0.893,P< 0.01)。

        3 討論

        心臟重構(gòu)是指心臟受到缺血損傷、神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)過度激活、血流動(dòng)力學(xué)改變等慢性刺激后,以心肌細(xì)胞肥大、心肌細(xì)胞凋亡及心肌纖維化為特征的病理表現(xiàn),導(dǎo)致心臟外觀、大小和功能變化,既是心力衰竭發(fā)生發(fā)展的決定機(jī)制,也是心功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1]。心肌細(xì)胞死亡包括心肌細(xì)胞自噬、壞死及凋亡3種形式,其發(fā)生在各種心血管疾病,如心力衰竭、心肌梗死、心肌缺血再灌注的急性及慢性期,其中心肌細(xì)胞凋亡即是心肌細(xì)胞死亡的主要形式[2]。成人心肌細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞,當(dāng)心肌組織遭受缺血、缺氧、氧化應(yīng)激及壓力超負(fù)荷時(shí),結(jié)果會(huì)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞受損傷,心肌細(xì)胞凋亡,心肌細(xì)胞數(shù)量減少和心肌纖維化[3]。

        圖1 兩組心肌組織結(jié)構(gòu)HE染色比較(400×)

        圖2 兩組心肌組織結(jié)構(gòu)Masson染色比較(400×)

        圖3 兩組心肌細(xì)胞凋亡比較(400×,TUNEL染色)

        心肌細(xì)胞凋亡是代償性心肌重構(gòu)轉(zhuǎn)向心力衰竭的關(guān)鍵環(huán)節(jié),是心臟功能進(jìn)行性惡化及最終死亡的重要基礎(chǔ)[4]。紐約心臟病協(xié)會(huì)報(bào)道,心功能Ⅲ、Ⅳ的心衰患者的心肌凋亡比占心肌組織的0.12%~0.70%,而正常心肌組織只占0.001%~0.01%[5]。Van等[6]研究發(fā)現(xiàn),如果某心肌組織中的心肌細(xì)胞凋亡率>0.1%時(shí),該心肌組織每年會(huì)有近37%的心肌細(xì)胞死亡。研究報(bào)道,自發(fā)性高血壓大鼠發(fā)生心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡時(shí),其心肌細(xì)胞凋亡數(shù)是正常組的4倍[7]。心肌纖維化是心功能障礙、心臟驟停及心律失常的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素,也是心臟重構(gòu)的一大病理特征[8]。根據(jù)有無心肌細(xì)胞壞死及心肌瘢痕組織形成,心肌纖維化分為反應(yīng)性纖維化及修復(fù)性纖維化。反應(yīng)性纖維化又分為間質(zhì)纖維化及血管周圍纖維化,其不出現(xiàn)心肌細(xì)胞壞死及瘢痕的形成;修復(fù)性纖維化心肌組織將出現(xiàn)心肌細(xì)胞壞死及瘢痕組織。心肌纖維化導(dǎo)致心臟僵硬度增加、順應(yīng)性降低,心臟傳導(dǎo)阻滯,心臟收縮及舒張功能障礙,最終導(dǎo)致心力衰竭的發(fā)生[9]。

        本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,心衰組心肌纖維化較正常組顯著增加,存在心肌細(xì)胞廣泛壞死、心肌纖維斷裂溶解、心肌間質(zhì)膠原纖維過度沉積,大片狀瘢痕組織增生,心肌組織結(jié)構(gòu)紊亂,且心肌細(xì)胞凋亡率也顯著升高,提示慢性心衰大鼠存在心肌細(xì)胞凋亡率與心肌纖維化,且二者之間的變化呈顯著正相關(guān)。

        [1] Li X,Han J,Li L,et al.Effect of farnesyltransferase inhibition on cardiac remodeling in spontaneously hypertensive rats[J].International Journal of Cardiology,2013,168(4):3340-3347.

        [2] 劉啟壽,劉景群.充血性心力衰竭患者心肌纖維化變化的研究[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥,2014,21(31):42-45.

        [3] Grazia Maria Virzi,Anna Clementi,Claudio Ronco,et al.Celluar apotosis in the Cardiorenal axis[J].Springer Science,2016,21(2):177-189.

        [4] 王紅英,曹雪濱.心力衰竭與心肌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2008,14(18):2727-2730.

        [5] Amabel M,Orogo,Asa B,et al.Cell death in the myocardium:my heart won't go on[J].IUBMB Life,2013,65(8):651-656.

        [6] Van Empel VP,Bertrand AT,Hofstra L,et al.Myocyte apoptosis in heart failure[J].Cardiovasc Res,2005,67(1):21-29.

        [7] Mani K.Programmed cell death in cardiac myocytes:strategies to maximize post-ischemic salvage[J].Heart Fail Rev,2008,13(2):193-209.

        [8] Hu SS,Kong LZ,Gao RL,et al.Outline of the report on cardiovascular disease in China[J].Biomed Environ Sci,2012,25(3):251-256.

        [9] Davide Lazzeroni,Ornella Rimoldi,Paolo G Camici.From left ventricular hypertrophy to dysfunction and failure[J].Circulation Journal,2016,80(3):555-564.

        猜你喜歡
        切片心肌細(xì)胞心衰
        國(guó)外心衰患者二元關(guān)系的研究進(jìn)展
        左歸降糖舒心方對(duì)糖尿病心肌病MKR鼠心肌細(xì)胞損傷和凋亡的影響
        睡眠質(zhì)量與心衰風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)
        中老年保健(2021年2期)2021-12-02 00:50:10
        活血解毒方對(duì)缺氧/復(fù)氧所致心肌細(xì)胞凋亡的影響
        討論每天短時(shí)連續(xù)透析治療慢性腎臟病合并心衰
        基于SDN與NFV的網(wǎng)絡(luò)切片架構(gòu)
        心肌細(xì)胞慢性缺氧適應(yīng)性反應(yīng)的研究進(jìn)展
        腎穿刺組織冷凍切片技術(shù)的改進(jìn)方法
        槲皮素通過抑制蛋白酶體活性減輕心肌細(xì)胞肥大
        冰凍切片、快速石蠟切片在中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值比較
        国产精品久久久久尤物| 亚洲不卡av二区三区四区| 丝袜美腿视频一区二区| 伊人久久大香线蕉av色| 999久久久免费精品国产| 99成人无码精品视频| 久久久久国产精品四虎| 男的和女的打扑克的视频| 中文字幕亚洲精品久久| 亚洲中文字幕久久精品无码a| 国产真实夫妇交换视频| 无码片久久久天堂中文字幕| 婷婷成人亚洲综合国产| 麻豆成人久久精品二区三区免费| 黑人大群体交免费视频| 无码尹人久久相蕉无码| 成年人黄视频大全| 亚洲欧美在线视频| 国产一区二区三区18p| 欧美丰满老熟妇aaaa片| 女人大荫蒂毛茸茸视频| 丰满人妻AV无码一区二区三区| av在线免费观看麻豆| 亚洲av精品一区二区三区| 亚洲一区二区三区偷拍女厕| 99久久精品国产自在首页| 久久精品av在线视频| 国产精品国产三级国产av品爱| 国产精品无码午夜福利| 日韩欧美在线播放视频| 精品日韩在线观看视频| 老熟女的中文字幕欲望| 精品人妻va出轨中文字幕| 色www亚洲| 日本高清一区二区不卡| 蜜臀av无码人妻精品| 性夜夜春夜夜爽aa片a| 久久精品国产亚洲av高清蜜臀| 大香蕉国产av一区二区三区 | 十四以下岁毛片带血a级| 亚洲欧洲中文日韩久久av乱码|