樊曉旭 ， 王淑娟 ， 張永強 ， 戈勝強 ， 李 林 ， 吳曉東 ， 王志亮 ， 馬洪超

(中國動物衛(wèi)生與流行病學中心 ， 山東 青島 266032)

西尼羅河熱是《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》中重點防范的外來動物疫病。目前非洲、歐洲、中東、北美洲和西南亞均有報道。該病由黃病毒科、黃病毒屬西尼羅病毒(WNV)引起，可感染蚊子，鳥類、人、馬、豬、狗、山羊、蝙蝠、貓、洗熊、野兔、鱷魚和臭融等多種動物。鳥類(烏鴉、鴿子、鶯等)是該病毒的自然宿主，病毒主要通過蚊子叮咬傳播。雖然80%的人感染后不表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，但20%的患者會發(fā)展為西尼羅河熱，出現(xiàn)發(fā)燒，頭痛，疲勞，身體疼痛，惡心，嘔吐，皮疹和淋巴節(jié)腫脹等癥狀，嚴重的會引起神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡[1]。50歲以上及免疫力低下人群，感染后的預(yù)后更差[2]。該病同樣會引起馬出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡，是我國重點防范的外來人獸共患病。

1 國際西尼羅河熱流行形勢

WNV在全球范圍呈擴散趨勢： 病毒最早在1937年從非洲烏干達尼羅河地區(qū)一名發(fā)熱成年婦女血液中分離到。1951年，埃及報道了在人血清中分離到西尼羅病毒，同年，以色列出現(xiàn)人感染W(wǎng)NV案例。1957年，以色列暴發(fā)WNF，并出現(xiàn)腦膜腦炎12例。20世紀60年代，在法國和埃及出現(xiàn)馬感染W(wǎng)NV案例，并引起小范圍流行。其中，1963年，Lucasse在中非首次分離到WNV。1964年，法國報道了在人和庫蚊中分離到WNV。1965年，在印度西部的庫蚊中也分離到該病毒。1974年，WNF在南非人群中大規(guī)模流行，感染達18 000余例。20世紀70年代中期至90年代中期，盡管WNV在非洲、亞洲、南歐、中東、澳大利亞等地時有發(fā)生，但疫情相對穩(wěn)定[3]。1991年，在馬達加斯加5～20歲青少年(3 177人)中，WNV抗體陽性率近30%。90年代中末期開始，WNV在全世界流行范圍明顯擴大：1996年，在羅馬尼亞和摩洛哥發(fā)生WNV感染病例。1997年，突尼斯和捷克發(fā)現(xiàn)了WNV。1998年，意大利托斯卡納地區(qū)首次報道WNV。1999年，WNV在美國和俄羅斯出現(xiàn)，并再次在以色列出現(xiàn)。進入21世紀，WNV在印度、從中北美、加勒比地區(qū)蔓延至南美洲，2002年，首次在加拿大和墨西哥發(fā)現(xiàn)WNV。到2006年，阿根廷報道稱在馬匹中首次分離到WNV。2010年夏，在羅馬尼亞和希臘北部感染W(wǎng)NV 150例，同年，在西班牙首次暴發(fā)WNV。2011年，在俄羅斯遠東地區(qū)野鳥中檢測到WNV中和抗體。自2011年，在上海地區(qū)抽檢的貓、狗、鳥、馬WNV抗體陽性率為14.9%、4.6%、5.3%、0.0%[7- 8]。

多個國家和地區(qū)出現(xiàn)WNV再發(fā)： 1996年，羅馬尼亞暴發(fā)WNV，確診393例，死亡17例。從1997-2009年，疫情有所緩和，人感染病例共78例。2001-2007年血清學監(jiān)測顯示，家禽WNV抗體陽性率為10.8%，野鳥16.4%，馬19.9%。由于2010年當?shù)貧夂蜃兓?，夏季比往年同期更加炎熱，蚊子大量滋生，羅馬尼亞再次暴發(fā)WNV，當年感染W(wǎng)NV病例達50例[9]。同樣，由于氣候變化，干旱導(dǎo)致鳥類與蚊子競爭水源，使其更近距離的接觸蚊子，也能提高WNV循環(huán)傳播機率，2012年，WNV在美國再次暴發(fā)，從上一年人間感染800余例驟升至5 600余例[10]。1998年，WNV首次出現(xiàn)在意大利，造成14匹馬發(fā)病，其中6匹死亡，2008年，WNV再次暴發(fā)，導(dǎo)致33匹馬發(fā)病，其中5例死亡[11]。此外，摩洛哥繼1996年出現(xiàn)WNV，于2003年再次出現(xiàn)疫情。繼2000年后，法國南部卡瑪格地區(qū)2004年夏末再次出現(xiàn)WNV[12]。

WNV跨境傳播風險高。

候鳥因素： 由于以色列地處候鳥在非洲和歐亞大陸之間遷移路線上，在WNV全球傳播擴散過程中扮演重要角色。1999年，美國紐約首次出現(xiàn)人感染W(wǎng)NV病例，分離毒株NY99經(jīng)系統(tǒng)進化分析發(fā)現(xiàn)與以色列毒株高度同源，懷疑WNV可能從以色列傳入美國。2000年以來，在法國、西班牙發(fā)生的WNV推測由于飛抵的候鳥曾在非洲越冬接觸WNV所致。2004年在匈牙利蒼鷹分離到的譜系II毒株(源自非洲南部)，提示由候鳥將新的WNV帶入歐洲[13]。

獻血、器官移植因素： 在美國曾有在獻血、器官移植過程中導(dǎo)致WNV傳播的報道。自2001年，陸續(xù)在法國、加拿大、美國、突尼斯、意大利、波多黎各、土耳其、黎巴嫩、伊朗、奧地利、俄羅斯、西班牙獻血者中發(fā)現(xiàn)WNV抗體陽性率為0.5%～46.2%[14- 15]。因此，外國游客獻血、境外器官移植等存在著WNV跨境傳播風險。

旅游、貿(mào)易因素: 雖然人和馬是WNV終末宿主，但隨著經(jīng)濟的發(fā)展，交通愈來愈便利，來自WNV流行地區(qū)人員出訪旅游、跨境馬匹貿(mào)易甚至走私馬匹等，都具有潛在的WNV傳播風險。例如，2009年，在澳大利亞發(fā)現(xiàn)了1例來自以色列WNV輸入性病例[16]。2010年，在荷蘭發(fā)現(xiàn)了2例來自以色列WNV輸入性病例[17]。2013年，烏克蘭的馬WNV血清陽性率為13.5%[18]，2014年，約旦的馬血清陽性率為24.9%[19]，從上述國家進口馬匹具有較高的WNV傳播風險。

2 WNV防控技術(shù)研究現(xiàn)狀

監(jiān)測方面，根據(jù)WNV的傳播特點，德國、西班牙、希臘、伊朗、塞爾維亞等國開展了對候鳥、濕地棲息野鳥、蚊子的WNV監(jiān)測。在美國，由CDC牽頭、聯(lián)合地方衛(wèi)生、食品等部門，于2000年啟動了ArboNET監(jiān)測系統(tǒng)，監(jiān)控WNV的流行情況。地方將人、馬病例、蚊子與鳥類樣品檢測結(jié)果及時上報，該系統(tǒng)通過美國地質(zhì)勘探局(USGS)網(wǎng)站繪制、更新流行分布圖，監(jiān)測系統(tǒng)由將有關(guān)信息及時反饋給全國各地區(qū)。例如，每周按期在不同地點采集家禽樣本，若WNV感染率升高，即開展全面滅蚊工作，通過主動監(jiān)測、滅蚊預(yù)防控制WNV進一步傳播擴散[20]。加拿大一些省通過加拿大公共衛(wèi)生情報網(wǎng)(CNPHI)，整合地理信息系統(tǒng)(GIS)，收集整合監(jiān)測數(shù)據(jù)制成WNV流行分布圖。2004年，魁北克省開發(fā)了西尼羅病毒公共衛(wèi)生監(jiān)測集成系統(tǒng)(ISPHM-WNV)，是實時監(jiān)測西尼羅河病毒的公共衛(wèi)生監(jiān)測地理信息系統(tǒng)，包括對鴉科、蚊子、人、馬、氣候信息的整合，以及采取相應(yīng)滅蟲工作。該系統(tǒng)具有空間在線分析處理(SOLAP)功能，可改進設(shè)施提高分析速度。系統(tǒng)在2004年共收集到2 277條鳥監(jiān)測報告，分析了其中866條，確認陽性為112例。搜集蚊子棲息水塘8 452個，確認21個為WNV陽性。并確認人感染3例、馬感染0例、其他動物感染2例[21]。

診斷方面，目前，世界衛(wèi)生組織(WHO)及世界動物衛(wèi)生組織(OIE)推薦使用細胞培養(yǎng)方法分離血液、腦脊液中的病毒，使用RT-PCR方法檢測病原。通過ELISA方法(檢測IgM、IgG)，蝕斑減少中和試驗(PRNT)檢測人、馬、鳥類的WNV抗體。隨著技術(shù)的發(fā)展，二代測序、巢式PCR、PCR-質(zhì)譜、熒光定量PCR、LAMP方法也用于了WNV檢測，其中Cao等將LAMP與垂直流動可視化試紙條結(jié)合檢測WNV E基因，耗時42分鐘，最低可分別檢出101.5TCID50/ml的細胞毒101.33TCID50/ml的腦組織毒[22]。

疫苗方面，目前無人用WNV疫苗獲批，但已開發(fā)、使用了馬WNV疫苗，包括全病毒滅活疫苗、重組病毒滅活疫苗和金絲雀痘病毒載體活疫苗，并在美國、加拿大、歐洲等國獲批應(yīng)用。其中，痘病毒載體活疫苗對兩個譜系有較好的交叉保護效果。最近研究的嵌合減毒W(wǎng)NV疫苗rWN/DEN4Delta30，對WNV抵抗力相對較弱的中老年人群仍安全有效[23]。利用新城疫病毒做載體，研制的病毒載體疫苗rLa-WNV-PrM/E，免疫小鼠、馬、雞、鴨、鵝均產(chǎn)生了中和抗體和針對E蛋白的細胞免疫應(yīng)答[24]。人們還嘗試了使用黃病毒(YFV 17D)、改良型痘苗病毒安卡拉株(MVA)、日本乙腦疫苗株(SA14-14-2)、麻疹疫苗作為載體開發(fā)病毒載體疫苗，研發(fā)亞單位疫苗、DNA疫苗、植物疫苗等，并使用TLR-4受體激活劑、超分子多肽水凝膠、CpG寡聚脫氧核苷酸、顆粒皂苷佐劑MatriX-M作為佐劑，應(yīng)用于WNV疫苗免疫[25]。在我國，Tang等嘗試用乙腦減毒活疫苗(SA14-14-2)免疫人群，并使用蝕斑減少中和試驗(PRNT)檢測WNV抗體水平發(fā)現(xiàn)乙腦疫苗免疫未產(chǎn)生抗WNV中和抗體，提示同屬黃病毒屬的乙腦疫苗對WNV的交叉保護效果不甚理想[26]。

治療方面，目前正在研究蛋白酶抑制劑WNFNS2B-NS3的抗病毒效果。在治療WNV引起的腦炎、神經(jīng)性疾病方面，腺苷酸抑制劑NITD008 、組蛋白脫乙酰酶抑制劑Vorinostat、治療性抗體MGAWN1、高免γ球蛋白具有較好的效果[27]。

3 未來我國防控應(yīng)對思考

當前，我國成功消滅了牛傳染性胸膜肺炎、牛瘟疫情，并將牛海綿狀腦病、癢病、非洲豬瘟、非洲馬瘟、水泡性口炎、裂谷熱等外來動物疫病拒之國門之外。我國有20多種蚊子能夠傳播WNV，其中，實驗證實三帶喙庫蚊感染和傳播WNV能力最高[28]。隨著經(jīng)濟的發(fā)展，國家之間的交流更加緊密，旅游、貿(mào)易更加頻繁，加之走私、野生動物跨境活動等因素，對WNV的防控變得更加復(fù)雜。盡管針對西尼羅河熱制定了標準、規(guī)范，并由國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)出《防止西尼羅病毒傳入我國》的公告，但仍缺少清晰、系統(tǒng)的防控戰(zhàn)略、法律法規(guī)、監(jiān)測和控制體系。結(jié)合西尼羅病毒流行形式、防控研究進展、借鑒國外的先進防控經(jīng)驗、特提出未來我國防控應(yīng)對WNV措施如下：

明確戰(zhàn)略目標，通過立法提高認識，加強執(zhí)行力。外來人獸共患病防控應(yīng)著眼全球，其關(guān)系到國家穩(wěn)定、公共衛(wèi)生、經(jīng)濟貿(mào)易等多方面，應(yīng)通過立法，在法律框架下，建立外來人獸共患病防控體系，在該體系下，確定組成部門，包括主導(dǎo)和各參與部門，分配任務(wù)、規(guī)定權(quán)責，更新修訂應(yīng)急反應(yīng)預(yù)案，聯(lián)合組織演練，確保信息互通和有效協(xié)作。

整合人醫(yī)、獸醫(yī)資源，建立專門的國家外來病機構(gòu)。提升研究平臺，突出研究優(yōu)勢，進行外來病病原結(jié)構(gòu)、進化衍變、流行病學、致病機制、病原宿主相互作用、宿主免疫應(yīng)答等方面的基礎(chǔ)研究，從事外來病檢測、預(yù)防(疫苗)、治療(藥物)相關(guān)應(yīng)用研究，做好全國各地接觸外來病工作的人員培訓。

建設(shè)外來病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。需要國家多部門共同參與，涵蓋人、家養(yǎng)動物、野生動物、媒介昆蟲、氣候等信息，并納入互聯(lián)網(wǎng)大數(shù)據(jù)資源，做出早期預(yù)警。

鼓勵研究及相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)。通過政策，支持、鼓勵科研院所、高校、企業(yè)參與外來人獸共患診斷、疫苗等產(chǎn)品的研發(fā)和轉(zhuǎn)化，重點開展現(xiàn)場快速檢測、高通量檢測、可區(qū)分WNV與JEV抗體的診斷試劑盒，提高口岸、邊境的工作效率，并做好WNV疫苗、治療藥物的開發(fā)、儲備。

加強國際聯(lián)系與合作。密切關(guān)注各國人、動物衛(wèi)生信息，分析評估傳入風險和危害，及時作出預(yù)警和應(yīng)急反應(yīng)。并與各參考實驗室建立長期合作，推動外來病的研究和相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)。

綜上，WNV等人獸共患外來病防控，首先應(yīng)在國家層面提高重視，在法律法規(guī)、體系建設(shè)、機構(gòu)設(shè)置上做好部署，才能形成長效、連鎖反應(yīng)，以確保我國應(yīng)對外來人獸共患病系統(tǒng)高效運作，反應(yīng)及時、判斷準確，防控得力。

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