王俊永，王天賜，王 丹，張 禹，王 昕

（西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，陜西楊凌 712100）

毛囊是皮膚的衍生物，因動(dòng)物種類以及生長(zhǎng)部位不同而導(dǎo)致其長(zhǎng)度和形狀有所差異，但其都有相似的基本結(jié)構(gòu)。毛囊由連接組織鞘、內(nèi)根鞘、外根鞘、毛球和毛干等構(gòu)成，大部分哺乳動(dòng)物的毛囊分為初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊。毛球內(nèi)包圍著一些密集的真皮纖維細(xì)胞，內(nèi)陷形成毛乳頭，是一個(gè)發(fā)送和接收信號(hào)誘導(dǎo)的結(jié)構(gòu)[1]。圍繞毛乳頭的部分為毛母質(zhì)，毛母質(zhì)的角質(zhì)細(xì)胞是體內(nèi)生長(zhǎng)最快的細(xì)胞，生長(zhǎng)期毛母質(zhì)細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生毛干和內(nèi)根鞘[2]。Dicer酶是miRNA形成過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵酶，特異性敲除Dicer基因?qū)е滦∈蟊砥ぶ卸喾NmiRNA減少以及小鼠的毛發(fā)生長(zhǎng)有缺陷[3]。另一項(xiàng)研究表明，miRNA的加工酶Drosha酶在小鼠的毛發(fā)生長(zhǎng)以及表皮的內(nèi)穩(wěn)態(tài)方面有著重要的作用[4]。此外，在絨山羊次級(jí)毛囊發(fā)育中，lncRNA作用于Wnt信號(hào)通路從而影響毛囊生長(zhǎng)發(fā)育[5]。越來(lái)越多的報(bào)道將miRNA、lncRNA與毛囊的生長(zhǎng)發(fā)育緊密聯(lián)系起來(lái)，而且毛囊的發(fā)育直接影響經(jīng)濟(jì)動(dòng)物毛發(fā)的品質(zhì)。因此，研究miRNA和lncRNA對(duì)毛囊發(fā)育的分子調(diào)節(jié)機(jī)理及提高絨毛的產(chǎn)量和品質(zhì)具有重要意義。

1 miRNA與lncRNA簡(jiǎn)介

miRNA是一種僅有18～25個(gè)核苷酸的單鏈非編碼RNA，廣泛存在于各類生物體內(nèi)。miRNA的形成由基因組轉(zhuǎn)錄、pri-miRNA到成熟的miRNA序列經(jīng)歷了一系列復(fù)雜的變化。miRNA的經(jīng)典作用機(jī)制是成熟的miRNA與RNA誘導(dǎo)的基因沉默復(fù)合體形成miRISC，此復(fù)合物通過(guò)miRNA特異地識(shí)別特定基因的3'非翻譯區(qū)，并與之完全互補(bǔ)或部分互補(bǔ)從而抑制或者沉默mRNA的表達(dá)。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)miRNA在轉(zhuǎn)錄后水平還可以作用于5'非翻譯區(qū)、啟動(dòng)子區(qū)，甚至可能抑制復(fù)制和轉(zhuǎn)錄水平[6]。從第1個(gè)miRNA（lin-4）發(fā)現(xiàn)至今，隨著高通量測(cè)序技術(shù)的高速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的miRNA在生物體內(nèi)扮演著不可替代的作用，并且預(yù)測(cè)miRNA參與了動(dòng)物全基因組中20%～30%基因的表達(dá)調(diào)控[7]。

LncRNA是長(zhǎng)度大于200 nt的非編碼RNA轉(zhuǎn)錄本，不同于miRNA較為單一的作用機(jī)制，lncRNA的作用機(jī)制多樣，這與其復(fù)雜的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)[8]；而且又根據(jù)其不同的亞細(xì)胞定位分為核lncRNA和質(zhì)lncRNA，前者主要通過(guò)染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄干擾等方式行使生物學(xué)功能，后者主要充當(dāng)“誘餌分子”與蛋白質(zhì)、DNA和RNA相互作用[9]。

2 miRNA在毛囊發(fā)育中的作用

2.1 miRNA在毛囊發(fā)育中的時(shí)空表達(dá) 毛囊的發(fā)育分為生長(zhǎng)期、退行期和休止期3個(gè)階段。毛囊的形成以及周期性發(fā)育是一個(gè)分子調(diào)控過(guò)程，研究miRNA在毛囊發(fā)育不同時(shí)期的表達(dá)有著重要意義。Wang等[10]在絨山羊羊絨生長(zhǎng)期和休止期共檢測(cè)到541個(gè)miRNA，其中有15個(gè)在生長(zhǎng)期表達(dá)上調(diào)，8個(gè)下調(diào)；Liu等[11]對(duì)絨山羊胎兒發(fā)育過(guò)程中皮膚毛囊發(fā)育的3個(gè)重要時(shí)期（妊娠45、55、65 d）的樣本進(jìn)行了高通量測(cè)序，發(fā)現(xiàn)oar-miR-377-3p、oar-let-7和oar-miR-200家族中的oarlet-7b/d/f和oar-miR-200b/c在55日齡和65日齡胎兒的表達(dá)量比45日齡胎兒上調(diào)，而oar-miR-106a和oarmiR-218a則明顯下調(diào)；Zhang等[12]鑒定了鴨子皮膚中的 miRNA，其中 miR-107、miR-10a、miR-17-3p、miR-31、miR-451、miR-2188以及miR-1623可能調(diào)控Wnt/β-catenin、Shh/BMP和Notch信號(hào)通路中的相關(guān)基因；赫曉燕等[13]制備了羊駝皮膚的miRNA芯片與Affymetrix多物種miRNA芯片跨物種雜交，并對(duì)耳部和背部皮膚的miRNA 進(jìn)行篩選，結(jié)果顯示在其耳部和背部皮膚中高表達(dá)差異2倍以上的miRNA有39個(gè)，對(duì)let-7b和miR-24在2個(gè)部位的q-PCR檢測(cè)結(jié)果與基因芯片結(jié)果一致，并預(yù)測(cè)它們的靶基因與毛囊生長(zhǎng)發(fā)育和毛發(fā)品質(zhì)相關(guān)；Gao等[14]檢測(cè)到包括miR-143、miR-10a和let-7在內(nèi)的14個(gè)調(diào)控湖羊毛囊發(fā)育的miRNA，其中 miR-10a、let-7i、NW_004080184.1_6326、NW_004080165.1_8572、NW_004080181.1_3961和NW_004080190.1_13733在湖羊的大波紋皮和小波紋皮中差異表達(dá)；Liu等[15]在藏綿羊毛囊中檢測(cè)到244個(gè)高表達(dá)的miRNA，其中有204個(gè)miRNA在哺乳動(dòng)物中高度保守，進(jìn)一步的分析確定了6個(gè)特異表達(dá)的miRNA可能作用于Wnt信號(hào)通路中的關(guān)鍵基因；Bai等[16]檢測(cè)了6個(gè)miRNA表達(dá)量在遼寧絨山羊毛囊生長(zhǎng)期相對(duì)高于退行期和休止期，而另外7個(gè)miRNA則在退行期和休止期表達(dá)上調(diào)；Wen等[17]篩選了159個(gè)在成年山羊和綿羊皮膚及耳緣組織中表達(dá)的miRNA，其中105個(gè)高度保守，而且let-7、miR-17、miR-30、miR-15和miR-8家族的表達(dá)頻率很高。通過(guò)以上研究可見，miRNA在不同動(dòng)物的皮膚中都有分布并表達(dá)，而且在毛囊發(fā)育的不同階段，miRNA的表達(dá)水平也存在差異，這說(shuō)明在毛囊發(fā)育過(guò)程中相關(guān)的miRNA參與了調(diào)控。同時(shí)，miRNA表達(dá)的時(shí)空特異性也更加彰顯了其在毛囊生長(zhǎng)發(fā)育中的重要地位。

2.2 miRNA調(diào)控毛囊生長(zhǎng)發(fā)育的研究進(jìn)展 毛囊周期性發(fā)育是多基因參與、緊密聯(lián)系且相互制約的復(fù)雜生理生化過(guò)程，miRNA可以通過(guò)靶向不同的信號(hào)通路和轉(zhuǎn)錄因子，從而對(duì)毛囊不同發(fā)育階段的調(diào)控發(fā)揮作用[18]。

2.2.1 miRNA對(duì)毛乳頭細(xì)胞的影響 毛乳頭細(xì)胞是位于毛囊基底層的信號(hào)樞紐，在毛干的形成、維持毛囊的形態(tài)發(fā)生、調(diào)控毛囊周期以及毛囊的再生方面起著重要的作用。隨著毛乳頭細(xì)胞培養(yǎng)代數(shù)的增加，逐漸失去多層聚集能力；代數(shù)低的毛乳頭細(xì)胞能夠誘導(dǎo)裸鼠背部長(zhǎng)出毛發(fā)，而代數(shù)高的毛乳頭細(xì)胞不能；以miRBase 18.0為依據(jù)，通過(guò)miRNA芯片檢測(cè)到1 924個(gè)miRNA，低代數(shù)的毛乳頭細(xì)胞相對(duì)于高代數(shù)毛乳頭細(xì)胞顯著上調(diào)的有27個(gè)miRNA，下調(diào)的有106個(gè)。通過(guò)建立miRNA 和Wnt通路的網(wǎng)絡(luò)圖發(fā)現(xiàn)，miR-195-5p在mRNA水平上抑制LRP6的表達(dá)，從而調(diào)控毛乳頭細(xì)胞Wnt/β-catenin通路的活化[19]。Zhou等[20]研究發(fā)現(xiàn)，miR-125b在絨山羊皮膚毛發(fā)周期的3個(gè)階段表達(dá)量不同，基于毛乳頭細(xì)胞構(gòu)建的miR-125b的過(guò)表達(dá)模型和抑制表達(dá)模型證實(shí)了miR-125b 影 響 FGF5、IGF-1、SHH、TNF-α、MSX2、LEF-1、FGF7、NOGGIN、BMP2、BMP4、TGF-β1 和β-catenin的表達(dá)，雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了miR-125b與FGF5和TNF-α之間有著直接的作用。FGF5本身是一種生長(zhǎng)因子，主要調(diào)控毛發(fā)的長(zhǎng)度[21]；而TNF-α可能影響毛發(fā)的生長(zhǎng)速度[22]。綜上表明，miRNA通過(guò)抑制與毛囊再生相關(guān)的基因及相關(guān)信號(hào)通路的關(guān)鍵分子而調(diào)控毛囊周期以及毛囊的再生能力。

2.2.2 miRNA對(duì)表皮角化細(xì)胞的影響 皮膚表皮由角化細(xì)胞和非角化細(xì)胞構(gòu)成，其中毛是表皮角化的產(chǎn)物，主要由角化細(xì)胞緊緊排列而成。因此，研究miRNA對(duì)角化細(xì)胞增殖分化的影響對(duì)毛囊發(fā)育有著重要的作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子家族中的IGF-1R廣泛分布于毛囊中，通過(guò)與IGF結(jié)合，可以將信號(hào)傳導(dǎo)刺激毛囊細(xì)胞的增殖，而缺失IGF-1R基因的小鼠表皮變薄，角質(zhì)細(xì)胞顯著減少[23]。miR-let7a在絨山羊生長(zhǎng)期中的表達(dá)較退行期弱，而其靶基因IGF-1R在絨山羊生長(zhǎng)期中的表達(dá)較退行期高[24]，表明miR-let7a對(duì)IGF-1R具有調(diào)節(jié)作用。Yuan等[25]研究發(fā)現(xiàn)，miR-22表達(dá)量在小鼠毛囊退行期上升而在休止期達(dá)到最高；體內(nèi)研究表明，過(guò)表達(dá)miR-22促進(jìn)了毛發(fā)周期由生長(zhǎng)期向退行期的過(guò)渡，對(duì)應(yīng)的miR-22缺失體則延遲了進(jìn)入休止期的時(shí)間，并且加速了毛囊由休止期向生長(zhǎng)期的轉(zhuǎn)變，而過(guò)表達(dá)的miR-22通過(guò)抑制角化細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化同時(shí)加速細(xì)胞凋亡過(guò)程；并證實(shí)了miR-22直接抑制了多個(gè)與毛囊生長(zhǎng)分化相關(guān)的基因，包括Dlx3、Foxn1和Hoxc13等。miR-31突變體小鼠的表皮角質(zhì)細(xì)胞功能損傷，導(dǎo)致毛囊細(xì)胞異常的增殖、凋亡和變異；相反，在miR-31的缺失體中毛發(fā)生長(zhǎng)得到了促進(jìn)，而miR-31靶向作用于LATS2，LATS2則可以調(diào)控角質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)[26]。Ahmed等[27]研究表明，miR-214在小鼠皮膚的表皮表現(xiàn)出不同的表達(dá)模式，通過(guò)在角質(zhì)細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)來(lái)抑制其增殖，導(dǎo)致小鼠毛囊發(fā)育受阻、毛球數(shù)量減少以及毛發(fā)變細(xì)等現(xiàn)象。β-catenin蛋白作為Wnt信號(hào)通路中的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)開關(guān)，廣泛地參與到動(dòng)物毛囊的發(fā)育中[28]。而miR-214對(duì)毛囊發(fā)育的抑制作用主要是通過(guò)靶向調(diào)控β-catenin從而影響Wnt信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

2.2.3 miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞的影響 毛發(fā)的形成以及之后的再生需要一個(gè)持續(xù)的干細(xì)胞群來(lái)維持這一過(guò)程，而毛囊干細(xì)胞的表達(dá)有4個(gè)關(guān)鍵的調(diào)控因子，即Sox9、Tcf-3、LHx2和NFATc1[29]。已有的研究表明，TCF-3是miR-24的靶基因。 miR-24過(guò)表達(dá)使毛發(fā)變細(xì)以及改變毛發(fā)的結(jié)構(gòu)，而且改變了毛發(fā)角質(zhì)形成細(xì)胞的正常分化過(guò)程[30]。過(guò)表達(dá)miR-22也會(huì)損害毛囊干細(xì)胞群的形成能力[25]。Wang等[31]研究發(fā)現(xiàn)，miR-205的缺失會(huì)造成新生小鼠致死以及表皮、毛囊生長(zhǎng)嚴(yán)重受損的現(xiàn)象；在毛囊發(fā)育中，加速新生小鼠皮膚干細(xì)胞轉(zhuǎn)化沉默。因此，miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞的干性維持及正常的毛囊周期發(fā)育具有重要作用。

2.3 miRNA與信號(hào)通路 Wnt信號(hào)通路是眾多參與毛囊周期發(fā)育信號(hào)的重要通路之一，經(jīng)典的Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與了皮膚的生物學(xué)過(guò)程，具有調(diào)控上皮的形態(tài)發(fā)生、毛囊發(fā)育以及相關(guān)細(xì)胞分化的作用[32]。miR-31在小鼠的生長(zhǎng)期上調(diào)并且在退行期和休止期下調(diào)，而miR-31缺失導(dǎo)致毛囊生長(zhǎng)期加速發(fā)育并且改變了毛基質(zhì)細(xì)胞的分化和毛干的形成。研究表明，miR-31負(fù)調(diào)節(jié)FGF10，而FGF10是Wnt通路和BMP通路的一個(gè)信號(hào)分子[33]。李珊珊等[34]研究發(fā)現(xiàn)，miR-1623在麒麟雞皮膚中高度表達(dá)， Wnt信號(hào)通路中Wnt4基因的3'UTR存在miR-1623的結(jié)合位點(diǎn)（TGCCTG）；q-PCR以及雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于懷鄉(xiāng)雞，麒麟雞皮膚中的miR-1623表達(dá)水平顯著升高，而Wnt4 mRNA的表達(dá)水平顯著降低，因此miR-1623靶向負(fù)調(diào)控Wnt4。唐曉慧等[35]的研究結(jié)果表明，miR-184在皮膚中表達(dá)最強(qiáng)，并且在毛囊生長(zhǎng)期到退行期的表達(dá)量有上升趨勢(shì)；miR-205在多個(gè)組織中均有表達(dá)，且皮膚、肺、腎臟、小腸、直腸、瘤胃、肌肉中的表達(dá)量較高，而miR-205則表現(xiàn)出先升后降，在退行期的表達(dá)量最高，兩者的候選靶基因則可能通過(guò)Wnt信號(hào)通路調(diào)控毛囊的生長(zhǎng)周期。

TGF-β信號(hào)通路具有調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、凋亡、遷移及細(xì)胞外基質(zhì)的形成等多種重要的功能，而miR-1298-5p則通過(guò)抑制TGF-βR1間接的調(diào)控TGF-β信號(hào)通路，進(jìn)而影響毛囊的正常發(fā)育[36]。在新生小鼠皮膚中，miR-205則通過(guò)負(fù)調(diào)節(jié)pi3k信號(hào)通路來(lái)保證皮膚干細(xì)胞的正常增殖[32]。由此可見，miRNA主要通過(guò)調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路的信號(hào)分子從而影響毛囊的周期發(fā)育。

2.4 miRNA影響動(dòng)物毛色的相關(guān)進(jìn)展 毛色也是毛用動(dòng)物重要的經(jīng)濟(jì)性狀之一，哺乳動(dòng)物的毛色主要由被毛發(fā)育和黑色素種類及數(shù)量共同決定。朱芷葳等[37]檢測(cè)出20個(gè)在成年羊駝皮膚組織中高表達(dá)的miRNA，其中miR-25對(duì)色素形成關(guān)鍵基因Mitf具有調(diào)控作用，表明miR-25可能參與到羊駝毛發(fā)顏色的調(diào)控過(guò)程。

賈小云等[38]檢測(cè)了miR-663在羊駝皮膚中的表達(dá)量，并從mRNA和蛋白水平上證明miR-663能夠靶向抑制TGF-β1的表達(dá)而影響TGF-β/Smad 和 Wnt信號(hào)通路，進(jìn)而影響羊駝黑色素細(xì)胞中的黑色素合成。Wu等[39]通過(guò)對(duì)不同顏色山羊（白色和黑色）毛囊樣本的測(cè)序，檢測(cè)到6個(gè)異常表達(dá)的miRNA，其中miR-10b通過(guò)影響DVL3來(lái)調(diào)控Notch信號(hào)通路，且miR-211的表達(dá)模式與miR-10b相類似，而包括Notch和MAPK等的多個(gè)信號(hào)通路都可能調(diào)節(jié)羊毛顏色的形成，這表明miRNA在調(diào)控羊毛顏色形成上有著重要的作用。Qu等[40]研究表明，miR-202在黑色小鼠皮膚中的表達(dá)高于白色小鼠中，而且wnt5a、kit和tcf7在黑色小鼠體內(nèi)的表達(dá)與miR-202負(fù)相關(guān)，說(shuō)明miR-202在白色小鼠和黑色小鼠中有著不同的表達(dá)方式，即可能調(diào)控小鼠毛色的形成。

3 LncRNA在毛囊發(fā)育中的作用

LncRNA的作用機(jī)制多種多樣，但目前發(fā)現(xiàn)的影響毛囊發(fā)育的大部分lncRNA仍集中在通過(guò)調(diào)控相關(guān)的信號(hào)通路以及調(diào)控相關(guān)基因的甲基化等來(lái)實(shí)現(xiàn)。

3.1 毛囊生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的lncRNA的鑒定 Wang等[10]通過(guò)高通量測(cè)序鑒定了絨山羊毛囊發(fā)育的生長(zhǎng)期和休止期的1 108個(gè)lncRNA，與休止期相比，其中有41個(gè)lncRNA表達(dá)量在生長(zhǎng)期上調(diào)，157個(gè)lncRNA表達(dá)量下調(diào)；同時(shí)檢測(cè)了lncRNA對(duì)其靶基因cis和trans的影響，推測(cè)這些lncRNA在毛囊發(fā)育和毛囊周期調(diào)控中具有一定的功能。郭楊等[41]對(duì)羊絨生長(zhǎng)期和休止期顯著差異表達(dá)lncRNA進(jìn)行了篩選及qRT-PCR驗(yàn)證，并對(duì)其中的5個(gè)lncRNA（lncRNA9686、lncRNA14672、lncRNA19457、lncRNA15479和lncRNA13025）構(gòu)建了過(guò)表達(dá)載體，為進(jìn)一步研究lncRNA的功能和探討特異性lncRNA在羊絨生長(zhǎng)中的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。Yue等[42]研究分析了大量lncRNA以及編碼RNA在毛囊形成過(guò)程中的作用，其中只有Wnt2、FGF20在Wnt、Shh、Notch和BMP信號(hào)通路中差異顯著，而lncRNA表達(dá)譜的分析共檢測(cè)到15個(gè)顯著差異表達(dá)的lncRNA，其中6個(gè)上調(diào)，9個(gè)下調(diào)。這些關(guān)鍵的差異表達(dá)基因和lncRNA可能調(diào)節(jié)毛囊發(fā)育的起始分子機(jī)制。毛囊的起始階段是毛囊形成的第一個(gè)也是最重要的階段。Zhu等[43]分離了來(lái)自遼寧絨山羊次級(jí)毛囊的lncRNA-H19轉(zhuǎn)錄物，其中生長(zhǎng)期lncRNA-H19轉(zhuǎn)錄本的相對(duì)表達(dá)量顯著高于休止期和退行期，表明lncRNA-H19轉(zhuǎn)錄本可能在山羊絨纖維的形成和生長(zhǎng)中起重要作用。甲基化分析表明，H19基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化可能參與了遼寧絨山羊次級(jí)毛囊的轉(zhuǎn)錄抑制。

3.2 LncRNA調(diào)控毛囊生長(zhǎng)發(fā)育的研究進(jìn)展 劉陽(yáng)[19]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA與Wnt通路中的mRNA存在3種關(guān)系：一是兩者呈正相關(guān)（約占79%），二是兩者呈負(fù)相關(guān)，三是mRNA不隨lncRNA的上調(diào)或下調(diào)而出現(xiàn)差異表達(dá)現(xiàn)象。而在上調(diào)的基因中，H19有5個(gè)轉(zhuǎn)錄 本（ENST00000442037、uc001lva.4、uc021qbz.1、ENST00000439725和 ENST00000417089）， 它 們 是位于11號(hào)染色體上的lncRNA，microarray 顯示上調(diào)倍數(shù)在56～12倍，而相關(guān)研究顯示 H19能夠促進(jìn)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的激活[44]；差異表達(dá)的WIF1的mRNA下調(diào)了25.036 993倍，而WIF1是Wnt/β-catenin信號(hào)通路的關(guān)鍵抑制因子，因而猜測(cè)毛乳頭細(xì)胞中的lncRNA通過(guò)促進(jìn)WIF1的甲基化來(lái)激活Wnt/β-catenin通路。Lin等[45]通過(guò)lncRNA微陣列發(fā)現(xiàn)，相較于第10代毛乳頭細(xì)胞，第4代毛乳頭細(xì)胞中有1 683個(gè)lncRNA上調(diào)以及1 773個(gè)下調(diào)，其中RP11-766N7.3、H19和HOTAIR這3個(gè)lncRNA在毛乳頭細(xì)胞以及Wnt信號(hào)通路中表達(dá)量異常，這可能為早期分化毛乳頭細(xì)胞的毛囊誘導(dǎo)分化機(jī)制提供了新的研究方向。劉善博等[46]對(duì)細(xì)毛羊毛囊形態(tài)發(fā)生前期及基板期皮膚組織進(jìn)行 RNA-seq， 通 過(guò) CNCI、PhyloCSF、Pfam 對(duì) 測(cè) 序數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)測(cè)，共獲得 884 個(gè)新的 lncRNA，其中13個(gè)lncRNA 存在潛在 cis 或 trans 靶基因，通過(guò) GO、KEGG 富集分析，將 13 個(gè)差異 lncRNA 的靶基因顯著富集到 NOD 樣受體信號(hào)通路、利什曼病信號(hào)通路和NF-kappa B 信號(hào)通路中，說(shuō)明這些差異表達(dá)的 lncRNA可能通過(guò)信號(hào)通路參與細(xì)毛羊毛囊形態(tài)發(fā)生過(guò)程。此外，基于熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)的靶向關(guān)系表明，oarmiRNA-3955-5p 與 lncRNA005698 之間具有靶向關(guān)系，說(shuō)明lncRNA005698 可能在細(xì)毛羊毛囊形態(tài)發(fā)生過(guò)程中起著重要作用，并且可能通過(guò)調(diào)節(jié) oar-miRNA-3955-5p來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)毛羊毛囊形態(tài)發(fā)生。lncRNA的作用方式多樣，既可以通過(guò)Cis或Trans方式作用于靶基因，也可以作為內(nèi)源性競(jìng)爭(zhēng)RNA（ceRNA）競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合在靶基因上。由于lncRNA在調(diào)控毛囊發(fā)育的研究上目前仍處于起步階段，因此對(duì)于lncRNA在毛囊發(fā)育中的重要作用及具體的機(jī)制仍需要深入研究。

4 存在問(wèn)題及展望

miRNA主要通過(guò)作用于特定基因的3′非翻譯區(qū)從而抑制或沉默基因的表達(dá)，其在毛囊的生長(zhǎng)發(fā)育中的重要作用已經(jīng)有很多報(bào)道，但目前關(guān)于miRNA參與毛囊發(fā)育的研究主要集中在miRNA的篩選及靶基因的鑒定方面，在動(dòng)物體內(nèi)的功能研究，尤其是家畜上的研究更為有限。因此，未來(lái)應(yīng)該在體內(nèi)和體外水平上對(duì)miRNA的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行深入研究，為家畜育種工作提供理論基礎(chǔ)。

lncRNA雖然不具有編碼能力，但其與細(xì)胞周期和分化、發(fā)育及多種人類疾病密切相關(guān)，能夠在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后和表觀遺傳調(diào)控等多個(gè)層面上調(diào)控基因的表達(dá)水平。在毛囊發(fā)育領(lǐng)域，lncRNA的研究主要集中在篩選和鑒定影響毛囊發(fā)育的lncRNA，而對(duì)其調(diào)控機(jī)制尚不清晰，因此lncRNA的研究對(duì)揭示動(dòng)物毛發(fā)生長(zhǎng)的分子調(diào)控機(jī)制具有重要的意義。