路 雨,李 瑤,胡贏丹,李秋林,趙 云,鄒 鑒,劉瀟童,楊 旭,李 睿 (華中師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,遺傳調(diào)控與整合生物學(xué)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北 武漢 430079)

鄰苯二甲酸酯(PAEs)是一種人工合成的有機(jī)化合物,可以作為增塑劑添加到塑料制品中以增加其可塑性、柔韌性和延展性,因此被大量生產(chǎn)并廣泛應(yīng)用于工業(yè)和制造業(yè)中[1].研究表明,傳統(tǒng)增塑劑鄰苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)可對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦、腎臟、肺臟、肝臟等多種器官造成損傷[2-3],從而被以鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)為首的一些新型增塑劑逐漸取代.目前,DIDP已經(jīng)在全球范圍內(nèi)得到廣泛應(yīng)用,主要用于聚氯乙烯(PVC)薄膜、食品包裝材料、家具地板等建筑材料和醫(yī)療用品中[4].塑料中的 DIDP釋放后,擴(kuò)散至空氣、土壤和水體中,造成環(huán)境富集[5].DIDP可通過(guò)口腔攝入、氣道吸入、皮膚暴露、醫(yī)療注射等途徑進(jìn)入人體.由于兒童極易將PVC材質(zhì)的玩具放入口中,所以其經(jīng)口腔攝入 DIDP的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較大[6].流行病學(xué)調(diào)查顯示,PAEs暴露與兒童和塑料行業(yè)工人的過(guò)敏癥高發(fā)率之間存在一定聯(lián)系[7],而Shen等發(fā)現(xiàn)DIDP的長(zhǎng)期暴露可使小鼠形成獲得性過(guò)敏性體質(zhì)并加重過(guò)敏原誘導(dǎo)的過(guò)敏性皮炎[8].

DIDP可對(duì)健康造成一定危害,且其在全球范圍內(nèi)應(yīng)用廣泛,因此相關(guān)的毒理學(xué)研究非常重要.歐盟在對(duì)于 DIDP的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告中指出,DIDP在生殖方面無(wú)明顯毒性,但是對(duì)小鼠后代存在不利影響[9].此外,研究表明,DIDP可使小鼠肝腎器官出現(xiàn)明顯腫大,同時(shí)高濃度 DIDP暴露可促進(jìn)小鼠肝細(xì)胞腺瘤的增殖[10].對(duì)于傳統(tǒng)增塑劑 DEHP、鄰苯二甲酸丁基芐酯(BBP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)等物質(zhì)的研究表明,此類物質(zhì)可對(duì)小鼠大腦產(chǎn)生損傷,影響其學(xué)習(xí)記憶能力[11-12].然而,目前有關(guān)新型增塑劑 DIDP神經(jīng)毒性的研究相對(duì)較少,特別是其對(duì)大腦功能的影響更是鮮有報(bào)道.為此,本研究通過(guò)對(duì)不同濃度DIDP暴露下的小鼠進(jìn)行 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),測(cè)定 DIDP對(duì)小鼠學(xué)習(xí)和記憶的影響以及白藜蘆醇(Res)對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用,并通過(guò)測(cè)量受試小鼠腦組織中氧化應(yīng)激和炎癥因子指標(biāo),以期深入探索DIDP的神經(jīng)毒性以及氧化應(yīng)激在DIDP致小鼠神經(jīng)毒性中的作用.

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

本研究選用5～6周齡SPF級(jí)雄性昆明小鼠,體重(26±2)g,購(gòu)自湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心.動(dòng)物飼養(yǎng)于華中師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心.每天光照 12h,黑暗12h,給予充足的水和食物.

1.2 試劑與儀器

試 劑 ：DIDP(Sigma,純 度 ＞99%),吐 溫 -80(Amresco),Res(Sigma,純度＞97%),8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(Bluegene),腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素 1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(eBioscience)、微量還原型谷胱甘肽(GSH)試劑盒(南京建成),2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFH-DA)(Sigma,純度＞97%),硫代巴比妥酸(TBA,上海試劑二廠),其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純.

儀器：低溫冷凍離心機(jī)(Eppendorf-5415R),三用電熱恒溫水箱,FL×800熒光酶標(biāo)儀(Bio-Tek,全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(DNM-9602).

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

將42只雄性昆明小鼠隨機(jī)分成6組,每組7只,分別標(biāo)記為 A：生理鹽水組;B：1.5mg/(kg?d)D IDP 組;C：15mg/(kg?d) DIDP 組;D：150mg/(kg?d)DIDP 組;E：Res 組;F：150mg/(kg?d)DIDP+Res 組.用生理鹽水將DIDP與吐溫80以體積比1：1配制成 15mg/mL的染毒母液,使用時(shí)按照比例用生理鹽水稀釋成 0.15,1.5mg/mL的染毒液進(jìn)行染毒.每天每只小鼠的DIDP灌胃量(mL)與小鼠體重(g)的比值是 1：100,確保最終的染毒劑量.Res：先加入無(wú)水乙醇對(duì)Res粉末進(jìn)行促溶,然后加入所需體積的生理鹽水配置成 2mg/mL的Res溶液,確保最終的劑量是 20mg/(kg?d),現(xiàn)用現(xiàn)配;對(duì)照組按照同樣比例灌胃生理鹽水.每天清晨進(jìn)行灌胃,連續(xù)染毒 9d,其中 150mg/(kg?d)DIDP+Res組在染毒2h后進(jìn)行Res灌胃.本實(shí)驗(yàn)全部測(cè)試,均重復(fù)3次.

1.4 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

Morris水迷宮由英國(guó)心理學(xué)家Morris于上世紀(jì)80年代設(shè)計(jì)而成,主要應(yīng)用于嚙齒類動(dòng)物學(xué)習(xí)和記憶能力的研究,如今在神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域內(nèi)得到廣泛應(yīng)用.本實(shí)驗(yàn)采用的水迷宮如圖1所示,小鼠被放置在一個(gè)直徑為1.2m的內(nèi)壁不反光的不銹鋼圓形水箱中,所處的實(shí)驗(yàn)環(huán)境安靜,光線布局合理.其中水池深為 60cm,水溫為(24±1)℃.將圓形水池按照東西南北4個(gè)等距點(diǎn)分為4個(gè)象限(NW、NE、SE、SW),每個(gè)象限的池壁上對(duì)應(yīng)不同的圖形,小鼠可根據(jù)圖形識(shí)別位置并產(chǎn)生空間記憶.逃逸平臺(tái)位于NW象限的正中央距離池壁30cm,淹沒(méi)于水下 1cm.實(shí)驗(yàn)時(shí),根據(jù)方案選擇恰當(dāng)?shù)乃c(diǎn),使小鼠面向池壁,將其輕放入水中,讓其自由游泳.水池上方的攝像機(jī)將其游泳軌跡、速度以及逃逸時(shí)間等記錄并傳入計(jì)算機(jī),由smart 3.0軟件記錄并分析[13].

圖1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)裝置示意Fig.1 Experimental system of Morris water maze

水迷宮實(shí)驗(yàn)主要由定向航行和空間探索兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組成：定向航行實(shí)驗(yàn)主要用來(lái)測(cè)試小鼠的學(xué)習(xí)能力,空間探索實(shí)驗(yàn)主要測(cè)試小鼠的記憶能力.前7d的實(shí)驗(yàn)中,小鼠染毒4h后進(jìn)行游泳訓(xùn)練.將小鼠分別從NE、SE、SW 3個(gè)象限中放入,同時(shí)開(kāi)始記時(shí).每天訓(xùn)練3次,每次時(shí)間為60s.若小鼠在60s內(nèi)登上逃逸平臺(tái)且停留3s,則訓(xùn)練結(jié)束,所花費(fèi)的時(shí)間即為逃逸潛伏期;若小鼠在 60s內(nèi)并未發(fā)現(xiàn)逃逸平臺(tái),則記錄逃逸潛伏期為 60s.然后人工將小鼠放置于逃逸平臺(tái)后并計(jì)時(shí),持續(xù)30s后拿出,目的在于讓小鼠觀察四周,學(xué)習(xí)并定位平臺(tái)所在位置,形成了一定的空間記憶.第 8d為小鼠記憶遺忘期,正常染毒但不進(jìn)行實(shí)驗(yàn).1d的遺忘期后,在第 9d進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn),將平臺(tái)拆除后按照之前方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),小鼠自由游泳60s.通過(guò)比較不同組小鼠在逃逸平臺(tái)所在象限(NW象限)的停留時(shí)間以及游泳軌跡圖進(jìn)而分析得到小鼠的學(xué)習(xí)和記憶情況[14].

1.5 腦組織樣品的制備

第10d將小鼠脫頸處死.取腦組織置于冰上,稱量并記重.按10mL/g添加PBS(pH=7.5)并使用勻漿器配制成 10%的腦組織勻漿.腦組織勻漿在4℃、10000rpm的條件下離心15min,收集上清并進(jìn)行分裝后,置于-80℃冰箱內(nèi)冷凍保存.

1.6 腦組織海馬體病理學(xué)檢測(cè)

將小鼠腦組織取出后,用 4%的多聚甲醛進(jìn)行固定過(guò)夜.常規(guī)脫水,石蠟包埋,取小鼠腦組織中海馬體進(jìn)行H&E染色.顯微鏡觀察、拍照.

1.7 8-OHdG和炎癥因子TNF-α、IL-1β的檢測(cè)

采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA) 檢測(cè)腦組織勻漿中 8-OHdG含量以及炎癥因子TNF-α、IL-1β的含量,按照說(shuō)明書(shū)中具體步驟進(jìn)行操作.

1.8 氧化應(yīng)激水平的測(cè)定

ROS測(cè)定：采用DCF熒光法[15].用PBS緩沖液先將 10mmol/L的 DCFH-DA 熒光染料稀釋1000倍,然后將腦組織勻漿液稀釋25倍.取稀釋后染料和組織勻漿各 100μL混勻,在 37℃下孵育10min后,測(cè)量其在480nm激發(fā)光,520nm發(fā)射光下的熒光強(qiáng)度.MDA含量測(cè)定：采用TBA法[16].取5mL試管,加入0.5mL待測(cè)腦組織勻漿.各管加入2mL0.6%TBA溶液,混勻后放置于沸水浴中15min,冷卻.用離心機(jī)在 10000r/min條件下離心10min,取上清液.分別在450,532,600nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值,按照公式：濃度=[6.45(OD532-OD600)-0.56OD450]/prot計(jì)算樣品中MDA的濃度.GSH含量測(cè)定：使用GSH試劑盒來(lái)檢測(cè)腦組織中GSH的含量,具體步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作.

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用Origin 6.0軟件作圖,SPSS 17.0軟件分析數(shù)據(jù).水迷宮定向航行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用重復(fù)測(cè)量的方差分析,隨后采用Tukey test做兩兩比較.其他數(shù)據(jù)采用單因素方差分析,隨后采用Tukey test做兩兩比較.將P＜0.05定為顯著水平.

2 結(jié)果

2.1 體重變化及腦組織臟體比

如圖 2A所示,小鼠每天自由進(jìn)食和飲水,體重逐漸增加.與對(duì)照組相比,DIDP暴露組小鼠體重并未顯著增加(P＞0.05).如圖2B所示,DIDP暴露組小鼠腦組織臟體比隨著染毒濃度的增加而減小,與對(duì)照組相比,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05).

圖2 各組小鼠體重變化及腦組織臟體比Fig.2 Weight changes and Brain organ-body ratios of mice in different groups

2.2 小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果

如圖 3A、3B所示,與對(duì)照組相比,150mg/(kg?d)DIDP組小鼠平均逃逸時(shí)間顯著增加(P＜0.05).與 150mg/(kg?d) DIDP 組相比,150mg/(kg?d) DIDP+Res組小鼠平均逃逸時(shí)間減少,有顯著性差異(P＜0.05).

圖3 小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.3 The water maze test results of mice

圖3C表示在第9d空間探索實(shí)驗(yàn)中,小鼠在原平臺(tái)所在象限(即 NW 象限)停留時(shí)間.由圖可知,與對(duì)照組相比,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠的停留時(shí)間顯著減少(P＜0.05).與 150mg/(kg?d)DIDP組相比,150mg/(kg?d) DIDP+Res組小鼠停留時(shí)間增加,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05).

圖3D表示小鼠在第9d空間探索實(shí)驗(yàn)中的游泳路徑,顯示出對(duì)照組小鼠游泳路徑集中在原平臺(tái)所在象限(即 NW 象限),具有方向性和目的性.而DIDP染毒組小鼠游泳路徑?jīng)]有目的性,且缺乏規(guī)律性.

2.3 小鼠腦組織中氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)

2.3.1 ROS水平 如圖4A所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中ROS水平隨染毒劑量的增加而升高.與對(duì)照組相比,15,150mg/(kg?d)DIDP組小鼠ROS水平顯著升高(P＜0.05);150mg/(kg?d) DIDP+ Res組小鼠與 150mg/(kg?d) DIDP組相比,ROS水平降低,且有顯著性差異(P＜0.05).

2.3.2 GSH含量 如圖4B所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中GSH濃度隨染毒劑量的增加而降低.與對(duì)照組相比,15,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠GSH 濃 度 顯 著 降 低 (P＜0.05);150mg/(kg?d)DIDP+ Res組小鼠與 150mg/(kg?d) DIDP組相比,GSH濃度升高,有顯著性差異(P＜0.05).

2.3.3 MDA含量 如圖4C所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中 MDA濃度隨染毒劑量的增加而升高.與對(duì)照組相比,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠MDA 濃度極顯著升高(P＜0.01);150mg/(kg?d)DIDP+Res組小鼠與 150mg/(kg?d) DIDP組相比,MDA濃度降低,有極顯著性差異(P＜0.01).

2.3.4 8-OHdG含量 如圖4D所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中8-OHdG濃度隨染毒劑量的增加而升高.與對(duì)照組相比,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠8-OHdG 濃度極顯著升高(P＜0.01); 150mg/(kg?d)DIDP+Res組小鼠與 150mg/(kg?d) DIDP組相比,8-OHdG濃度降低,有顯著性差異(P＜0.05).

圖4 各組小鼠腦組織ROS、GSH、MDA和8-OHdG含量Fig.4 The ROS、GSH、MDA and 8-OHdG content in different groups

2.4 小鼠腦組織中炎癥因子指標(biāo)的檢測(cè)

2.4.1 TNF-α含量 如圖5A所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中 TNF-α含量隨染毒劑量的增加而升高.與對(duì)照組相比,15,150mg/(kg?d)DIDP組小鼠TNF-α含量極顯著升高(P＜0.01);150mg/(kg?d) DIDP+Res 組小鼠與 150mg/(kg?d)DIDP組相比,TNF-α含量降低,有極顯著性差異(P＜0.01).

2.4.2 IL-1β含量 如圖5B所示,DIDP染毒組小鼠腦組織中 IL-1β含量隨染毒劑量的增加而升高.與對(duì)照組相比,15mg/(kg?d)DIDP組小鼠IL-1β含量顯著升高(P＜0.05),150mg/(kg?d) DIDP組小鼠 IL-1β含量極顯著升高(P＜0.01);150mg/(kg?d) DIDP+Res組小鼠與150mg/(kg?d) DIDP組相比,IL-1β含量降低,有極顯著性差異(P＜0.01).

圖5 各組小鼠TNF-α和IL-1β含量Fig.5 The TNF-α and IL-1β content in different Groups

2.5 小鼠大腦海馬區(qū)H&E染色切片

如圖6所示,對(duì)照組(圖6A)結(jié)果顯示小鼠海馬 CA1區(qū)錐體細(xì)胞分布均勻,細(xì)胞整齊排列,細(xì)胞形態(tài)完整,多數(shù)呈多角形,錐體細(xì)胞頂狀樹(shù)突明顯可見(jiàn),輪廓清晰.而隨著 DIDP暴露濃度的升高,15,150mg/(kg?d) DIDP 組(圖 6C、圖 6D)小鼠大腦可見(jiàn)損傷,表現(xiàn)為錐體細(xì)胞排列松散,混亂,細(xì)胞腫脹變圓,頂狀樹(shù)突消失.150mg/(kg?d)DIDP+Res組(圖6F)小鼠海馬CA1區(qū)存在受損細(xì)胞,與 150mg/(kg?d) DIDP組相比,正常細(xì)胞數(shù)量增多,細(xì)胞損傷情況得到一定的緩解.

圖6 各組小鼠腦組織海馬體H&E染色Fig.6 H&E staining of hippocampus in brain tissue in different groups

3 討論

3.1 DIDP的濃度設(shè)置

DIDP的日攝入耐受量(TDI)值為 0.25mg/kg/d[16].在這個(gè)限制的基礎(chǔ)上,考慮到人與嚙齒動(dòng)物之間耐藥性的差異,故設(shè)置小鼠每日灌胃濃度為：0,1.5,15,150mg/(kg?d) DIDP.

3.2 DIDP對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)可以系統(tǒng)全面地考察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物空間認(rèn)知加工的過(guò)程,通過(guò)定向航行和空間探索實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)與記憶能力,客觀地反映其認(rèn)知水平.海馬是腦內(nèi)同空間記憶密切相關(guān)的結(jié)構(gòu).劉鋒明等研究表明BBP染毒的小鼠海馬組織受到損傷,學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降[11].本研究表明,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠在前 7d的定向航行實(shí)驗(yàn)中,平均逃逸時(shí)間顯著增加,而在第9d的空間探索實(shí)驗(yàn)中,其在原平臺(tái)所在象限停留時(shí)間縮短,游泳路徑大多無(wú)目的性且不規(guī)則.病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明,15,150mg/(kg?d) DIDP組小鼠的海馬組織受到損傷.這與Tang等研究結(jié)果是一致的[12].因此,DIDP暴露導(dǎo)致的小鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降可能與其引起的海馬組織受損有關(guān).

3.3 DIDP的氧化損傷作用

生物細(xì)胞的新陳代謝能夠產(chǎn)生ROS.正常情況下,細(xì)胞內(nèi)的ROS會(huì)被胞內(nèi)抗氧化酶等還原性物質(zhì)清除,使體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與消除處于平衡狀態(tài).若機(jī)體受到刺激發(fā)生氧化損傷,細(xì)胞可能會(huì)產(chǎn)生過(guò)量的ROS,通過(guò)氧化應(yīng)激進(jìn)一步造成細(xì)胞和組織不同程度的損傷[17].過(guò)量的ROS會(huì)引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用,MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化作用最終的分解產(chǎn)物[19].ROS過(guò)量還會(huì)引發(fā) DNA損傷,而8-OHdG是目前公認(rèn)的 DNA損傷的生物標(biāo)志物

[20].GSH是體內(nèi)重要的氧自由基清除劑,過(guò)量的 ROS可以消耗機(jī)體內(nèi) GSH,導(dǎo)致機(jī)體抗氧化能力下降[18].本研究中,15,150mg/(kg?d) DIDP 可以使小鼠腦組織 ROS含量升高,而 MDA、8-OHdG含量的升高表明小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化水平升高,DNA出現(xiàn)一定程度的損傷.同時(shí),因DIDP暴露引起的小鼠腦組織中GSH含量的降低反映出機(jī)體抗氧化能力降低.以上生物指標(biāo)含量的變化表明,DIDP對(duì)小鼠腦組織造成了一定程度的氧化應(yīng)激.Tang等[12]研究表明,腦組織氧化應(yīng)激水平升高可造成小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的下降.氧化應(yīng)激可以通過(guò)增加炎癥因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)量進(jìn)一步激活炎癥信號(hào)通路[21-22].本實(shí)驗(yàn)中, DIDP染毒組小鼠的腦組織中炎癥因子TNF-α 和IL-1β的表達(dá)量升高,顯示炎癥反應(yīng)被激活.而 Ma等研究表明學(xué)習(xí)記憶能力下降的小鼠,其大腦中炎癥因子表達(dá)升高[23].以上結(jié)果表明,DIDP致小鼠學(xué)習(xí)和記憶能力下降可能與其在腦組織中造成的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)損傷有關(guān).機(jī)制可能是 DIDP及其主要代謝產(chǎn)物對(duì)大腦中海馬組織的神經(jīng)細(xì)胞膜造成了氧化損傷,使神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)受到影響,進(jìn)而影響學(xué)習(xí)和記憶力.

3.4 Res的抗氧化作用

Res是廣泛存在于葡萄、黎蘆、虎杖等植物中的一種多酚類化合物,其重要特點(diǎn)之一是具有良好的抗氧化性[24].Res含有3個(gè)酚羥基,在機(jī)體中可以競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合自由基,從而減少自由基含量,緩解氧化應(yīng)激造成的損傷,具有降低血脂、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、提高免疫功能、抗氧化等作用[25].楊迎暴等研究顯示,Res對(duì)大鼠脊髓損傷脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)和活性氧水平有抑制作用[26].王娜等[27]研究顯示,20mg/(kg?d) Res能明顯改善大鼠高腸源性內(nèi)毒素血癥,提高腸黏膜的抗氧化作用.故本實(shí)驗(yàn)中,選用 20mg/(kg?d) Res 對(duì) 150mg/(kg?d)DIDP組小鼠進(jìn)行保護(hù).結(jié)果顯示,其腦組織中的氧化損傷與 DNA損傷受到抑制,且學(xué)習(xí)記憶能力的下降也得到顯著緩解,表明可能由于 Res降低了機(jī)體自由基含量,并提高了 GSH 的水平,因而降低了氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的損傷,從而能夠?qū)?DIDP暴露導(dǎo)致的小鼠腦損傷進(jìn)行有效保護(hù).也進(jìn)一步證明,氧化應(yīng)激在 DIDP致小鼠學(xué)習(xí)和記憶能力下降的過(guò)程中具有重要作用.

4 結(jié)論

4.1 15,150mg/(kg?d) DIDP暴露可對(duì)小鼠腦組織造成明顯的氧化損傷,并促進(jìn)炎癥因子 TNF-α和IL-1β的表達(dá).

4.2 Morris水迷宮結(jié)果顯示,DIDP能夠?qū)π∈髮W(xué)習(xí)與記憶能力產(chǎn)生一定程度影響,引起小鼠學(xué)習(xí)和記憶的障礙.其機(jī)制可能是 DIDP及其代謝產(chǎn)物通過(guò)對(duì)小鼠大腦中海馬組織造成氧化損傷,進(jìn)而影響小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力.

4.3 Res可在一定程度上保護(hù)機(jī)體,減少由DIDP引起的氧化損傷.

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