曹東華 劉桂麗 饒麗華

【摘要】 目的：探討丙型肝炎核心抗原（HCV-cAg）、丙型肝炎抗體（HCV-Ab）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）聯(lián)合檢測在丙型肝炎早期診斷中的價(jià)值。方法：選取本院2016年3月-2018年3月收治的疑似丙型肝炎患者90例為研究對(duì)象，均行HCV-cAg、HCV-Ab、丙型肝炎病毒RNA（HCV-RNA）及ALT檢測，分析單獨(dú)及聯(lián)合檢測的結(jié)果以及價(jià)值。結(jié)果：90例患者中，HCV-cAg、HCV-RNA、HCV-Ab、ALT陽性率分別為42.85%、86.67%、93.33%、48.75%；以HCV-RNA結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，聯(lián)合檢測的靈敏度、特異性、陰性預(yù)測值均高于三項(xiàng)單獨(dú)檢測（P<0.05）；HCV-cAg陽性者中的HCV-RNA陽性率多于HCV-cAg陰性者（P<0.05），但HCV-RNA定量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：將HCV-cAg、HCV-Ab及ALT檢測聯(lián)合應(yīng)用于丙型肝炎診斷中，可相互補(bǔ)充，減少漏檢，利于臨床對(duì)病情的進(jìn)一步明確診斷，有助于實(shí)早期防治，值得臨床推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 丙型肝炎核心抗原； 丙型肝炎抗體； 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶； 丙型肝炎

【Abstract】 Objective：To explore the value of combined detection of HCV-cAg，HCV-Ab and ALT in the early diagnosis of hepatitis C.Method：A total of 90 patients with suspected hepatitis C admitted to our hospital from March 2016 to March 2018 were selected as the research subjects.The HCV-cAg，HCV-Ab，hepatitis C virus RNA（HCV-RNA） and ALT were detected，and the results and value of single and combined detection were analyzed.Result：The positive rates of HCV-cAg，HCV-RNA，HCV-Ab and ALT were 42.85%，86.67%，93.33% and 48.75% respectively.The result of HCV-RNA was the gold standard，the sensitivity，specificity and negative predictive value of combined detection were all higher than those of three single tests（P<0.05）.The positive rate of HCV-RNA in HCV-cAg positive patients was higher than that of HCV-cAg negative（P<0.05），but the HCV-RNA quantification in HCV-cAg negative and positive patients was compared，the difference was not statistically significant（P>0.05）.Conclusion：The combined detection of HCV-cAg，HCV-Ab and ALT in the diagnosis of hepatitis C can complement each other and reduce the missed detection，which is conducive to further definite diagnosis of the disease in clinic，is conducive to early prevention and treatment，and is worthy of clinical application.

【Key words】 HCV-cAg； HCV-Ab； ALT； Hepatitis C

First-authors address：Jiangxi Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Hospital，Nanchang 330009，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.31.033

丙型肝炎屬于傳染病中的一種，致病因子為丙型肝炎病毒（HCV），可通過血液傳播和母嬰垂直傳播。丙型肝炎具有高度變異性，且因該病發(fā)病隱蔽，感染后無明顯癥狀，多數(shù)患者可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化或肝癌[1]。加之目前臨床對(duì)于丙型肝炎尚無特效藥物和治療手段，故及時(shí)檢出HCV感染對(duì)早期診斷丙型肝炎，有效阻斷病毒傳播十分重要。本研究回顧性分析本院收治的丙型肝炎患者臨床資料，旨在探討HCV核心抗原（HCV-cAg）、HCV抗體（HCV-Ab）以及丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）聯(lián)合檢測在丙型肝炎早期診斷中的價(jià)值?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2016年3月-2018年3月收治的疑似丙型肝炎患者90例為研究對(duì)象，其中男52例，女38例；年齡21～56歲，平均（33.4±1.2）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床疑似丙型肝炎，臨床資料完整，近3個(gè)月無相關(guān)藥物治療史。排除標(biāo)準(zhǔn)：甲、乙、戊型肝炎患者及無非特異性免疫原性肝病患者等?；颊呔橥?，且本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核。

1.2 方法 患者均行HCV-cAg、HCV-Ab、丙型肝炎病毒RNA（HCV-RNA）及ALT檢測，抽取晨起空腹靜脈血10 mL，離心分離血清后置入EP管內(nèi)待檢。具體方法如下。（1）HCV-cAg測定：采用夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測定，試劑盒購自湖南景達(dá)基因公司。（2）HCV-Ab測定：采用夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測定，試劑盒購自北京萬泰實(shí)業(yè)有限公司。（3）HCV-RNA測定：采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）檢測，儀器選用全自動(dòng)熒光定量PCR儀，試劑盒購自達(dá)安基因診斷中心。（4）ALT測定：采用酶法測定，檢測儀器為日立全自動(dòng)生化分析儀，測定方法嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒購自遼寧泰科醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司。

1.3 結(jié)果判定 （1）HCV-cAg、HCV-Ab判定：臨界值（critical OD，C.O.）=陰性對(duì)照平均OD值×2.8。樣品OD值S/C.O.≥1者為反應(yīng)陽性，樣品OD值S/C.0.<1為陰性。其中初試陽性者（S/C.O.≤2）進(jìn)行雙孔復(fù)試，復(fù)試陽性者方判為陽性；（2）HCV-RNA含量<500 UI/mL為陰性。（3）血清ALT正常水平為<40U/L。（4）聯(lián)合檢測陽性為各檢測結(jié)果均符合以上條件。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%，特異性=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，陽性預(yù)測值=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，陰性預(yù)測值=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 17.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 90例患者各檢測結(jié)果 90例患者中，HCV-cAg陽性率為73.33%，HCV-RNA陽性率為86.67%，HCV-Ab陽性率為93.33%，ALT陽性率為48.75%。HCV-cAg、HCV-RNA、HCV-Ab陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=2.23，P>0.05）；HCV-cAg、HCV-RNA、HCV-Ab陽性率與ALT比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=16.66、37.14、51.99，P<0.05）。見表1。

2.2 單項(xiàng)、聯(lián)合檢測結(jié)果及價(jià)值分析 以HCV-RNA結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，聯(lián)合檢測的靈敏度、特異性、陰性預(yù)測值均高于HCV-cAg、HCV-Ab、ALT三項(xiàng)單獨(dú)檢測（P<0.05）；其中HCV-Ab的靈敏度為94.9%，但特異性為16.7%；HCV-cAg的陽性預(yù)測值為96.9%，但靈敏度只有82.1%；ALT的陽性預(yù)測值為89.7%，但陰性預(yù)測值僅為15.7%。見表2、3。

2.3 HCV-cAg與HCV-RNA結(jié)果比較 HCV-cAg陽性者中的HCV-RNA陽性率多于HCV-cAg陰性者（P<0.05），但HCV-RNA定量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表4。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界范圍內(nèi)每年約新發(fā)3.5萬例的丙型肝炎患者。目前我國一般人群HCV-Ab陽性率為3.2%，其中HCV相關(guān)性肝細(xì)胞癌發(fā)生率在感染30年后平均為1%～3%。所以檢測方法的選擇和及早檢出HCV非常重要。

實(shí)驗(yàn)室診斷是診斷HCV感染的重要依據(jù)，目前的檢測指標(biāo)主要包括HCV-Ab和HCV-RNA兩種手段。其中HCV-Ab因操作簡便、不易污染、靈敏度較高等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于臨床檢測中[2]。本研究90例患者中HCV-Ab的檢測靈敏度高達(dá)94.9%。但有研究表明，HCV-Ab采用的ELISA試劑中包含有多種抗原成分，加之患者感染HCV后存在40～70 d甚至更長的窗口期，從而出現(xiàn)漏診的情況[3-4]。雖然目前已建立了第二代和第三代抗-HCV抗體檢測技術(shù)，大大提高了其靈敏度和特異性，但由于ELISA法檢測HCV抗體有較高的假陽性率，且本研究中HCV-Ab的陽性預(yù)測值為88.1%，同時(shí)HCV-Ab陽性只能表明感染，但不能區(qū)分現(xiàn)在感染和既往感染，故需進(jìn)一步行病毒核酸測定和肝臟損害評(píng)估，不能達(dá)到早期診斷、早期治療的目的。

HCV-RNA陽性是肝內(nèi)有HCV存在和復(fù)制的標(biāo)志，也是臨床進(jìn)行抗病毒治療的指征。但是對(duì)于HCV-RNA檢測的設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室條件及技術(shù)均有較高要求，且影響因素較多，難以在臨床推廣應(yīng)用。主要包括以下方面[5-7]：（1）HCV患者的病毒水平具有波動(dòng)性，如未經(jīng)干擾素治療其可呈間歇性陽性；（2）HCV-RNA易被酶降解，影響檢測結(jié)果；（3）HCV-RNA檢測需要經(jīng)過兩次PCR轉(zhuǎn)錄，均有可能影響其檢出水平；（4）HCV-RNA的含量易受進(jìn)食的影響。此外，臨床只進(jìn)行HCV-RNA單項(xiàng)檢測，也可存在漏診的現(xiàn)象。本研究10例患者HCV-Ab顯示陽性，但HCV-RNA為陰性。究其原因，對(duì)于慢性持續(xù)感染者，HCV-RNA可能有短暫的低水平復(fù)制階段，臨床檢測不到，此外，患者經(jīng)有效的抗病毒治療后HCV-Ab仍顯示為陽性[8-9]。

文獻(xiàn)[10]報(bào)道，在丙肝病毒感染者體內(nèi)，HCV-cAg幾乎與HCV-RNA同時(shí)出現(xiàn)，也是早期感染標(biāo)志。同時(shí)HCV-cAg采用ELISA法檢測，無須增加特殊設(shè)備，操作簡便，整個(gè)試驗(yàn)在3 h內(nèi)即可完成[11]。本研究中，HCV-cAg的陽性預(yù)測值為96.9%，66例HCV-cAg陽性患者中，HCV-RNA陽性檢出64例。對(duì)于14例HCV-RNA為陽性但HCV-cAg為陰性患者的結(jié)果進(jìn)行分析，考慮HCV-RNA陽性患者血清中含有高滴度的HCV核心抗體，導(dǎo)致試驗(yàn)反應(yīng)性下降或反應(yīng)為陰性[12]。本研究HCV-cAg陽性者中的HCV-RNA陽性率多于HCV-cAg陰性者（P<0.05），但HCV-RNA定量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。提示HCV-cAg與病毒的復(fù)制呈正相關(guān)，而與病毒的含量無相關(guān)性。此外，本研究結(jié)果顯示，以HCV-RNA結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，聯(lián)合檢測的靈敏度、特異性、陰性預(yù)測值均高于三項(xiàng)單獨(dú)檢測（P<0.05），由此說明聯(lián)合檢測可以補(bǔ)充各自的局限性，提高診斷的準(zhǔn)確性。因ALT是肝功能的重要指標(biāo)，當(dāng)機(jī)體肝臟受損，ALT可釋放到血液中，間接反映HCV感染情況[13-18]。本研究中ALT的陽性預(yù)測值為89.7%，可提高臨床檢出率，但有時(shí)ALT的升高不一定是病毒所致，故ALT只可作為參考，作為輔助檢測手段。

綜上所述，HCV-cAg、HCV-Ab以及ALT檢測在HCV診斷中具有各自的意義，將三者聯(lián)合應(yīng)用于HCV診斷中，有助于提高診斷率，利于臨床對(duì)病情的進(jìn)一步明確診斷，值得臨床推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2018-06-20） （本文編輯：董悅）