田伊林 劉雨薇 王宏偉

(遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 大連 116081)

披針形蜈蚣藻(Grateloupia lanceolata)隸屬于紅藻門(Rhodophyta)、杉藻目(Gigartinales)、海膜科(Halymeniaceae)、蜈蚣藻屬(Grateloupia)。1934年最初被 Okamura. K發(fā)現(xiàn)并命名為 Aeodes lanceolata Okamura (Okamura, 1934)。1954年 Yamada. Y 和Kawabata. S根據(jù)藻體結(jié)構(gòu)和生殖器官將其更名為Pachymeniopsis lanceolata (Okamura) Yamada et Kawabata (Kawabata, 1954)。1997年Kawaguchi. S根據(jù)形態(tài)學(xué)研究將其移入蜈蚣藻屬, 更名為 Grateloupia lanceolata (Okamura) Kawaguichi (Kawaguchi, 1997)。該種的主要特征為: 藻體直立, 單生或叢生, 深紅色或紅色帶黃色, 粘滑, 革質(zhì), 固著器盤狀, 向上分裂成數(shù)片披針形葉片, 有的葉片為長廣圓形或帶狀, 末端漸尖, 長8—30cm, 甚至可達(dá)60cm, 寬3—5cm, 邊緣全緣或波浪形(夏邦美, 2004)。生長在風(fēng)浪較小的中低潮帶的巖石上或石沼中(圖1)。

近年來, 除日本外, 披針形蜈蚣藻陸續(xù)在法國(Verlaque et al, 2005)、美國(Miller et al, 2009)、韓國(Kim et al, 2014)、地中海沿岸(Verlaque et al, 2015)等地被發(fā)現(xiàn)。2004年出版的《中國海藻志》第二卷第三冊(cè)中記載, 該種只在浙江省有分布, 為我國新紀(jì)錄種(夏邦美, 2004)。2012年, Ye等(2012)在山東省榮成市發(fā)現(xiàn)該種, 認(rèn)為是來自日本和韓國的外來入侵種,并對(duì)其四分孢子的放散和附著做了研究。2015年10月, 經(jīng)過形態(tài)觀察和對(duì)葉綠體基因組中的核酮糖1,5-二磷酸羥化酶/加氧酶大亞基基因(ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase, rbcL)的分子鑒定, 我們首次在大連發(fā)現(xiàn)該種, 鑒定結(jié)果另文發(fā)表。

披針形蜈蚣藻有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值, 可食用(Seo et al, 2013)、藥用(Kim et al, 2015), 但尚未被成功開發(fā)為人工栽培品種, 原因主要在于人們對(duì)其生長、發(fā)育等過程還不甚了解。Kawaguchi. S曾簡單觀察了披針形蜈蚣藻的發(fā)育過程, 但沒有進(jìn)行環(huán)境因子對(duì)其發(fā)育影響的研究(Kawaguchi, 1997)。Yang等人根據(jù)rbcL和 COI分子序列區(qū)分了該種和橢圓蜈蚣藻(G.elliptica)的差異(Yang et al, 2013)。其他基本生物學(xué)特征未見報(bào)道。

為了補(bǔ)充相關(guān)內(nèi)容, 在實(shí)驗(yàn)室條件下, 我們?cè)敿?xì)觀察了其早期發(fā)育過程和生活史, 同時(shí)研究了溫度與光周期、溫度與光照強(qiáng)度的交互作用對(duì)披針形蜈蚣藻發(fā)育的影響, 探討了適宜盤狀體發(fā)育及幼苗生長的最優(yōu)條件, 旨在為披針形蜈蚣藻的種質(zhì)保存、人工育苗、規(guī)?；耘嘁约翱沙掷m(xù)開發(fā)利用提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

圖1 披針形蜈蚣藻野外生境Fig. 1 The habitat of Grateloupia lanceolata注: a. 箭頭所指處為披針形蜈蚣藻的雌配子體; b. 箭頭所指處為披針形蜈蚣藻的雄配子體

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集和處理

用于實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)的成熟披針形蜈蚣藻于2015年10月13日采自大連市黑石礁、星海公園, 于2015年11月12日采自大連市金石灘、付家莊, 于2016年4月8日采自大連市付家莊。首先, 選擇成熟囊果比例達(dá)到80%左右的雌配子體, 用滅菌海水反復(fù)沖洗, 再用毛筆刷洗藻體以除去表面污垢及其他雜藻。在室溫通風(fēng)處陰干1小時(shí), 以刺激孢子放散。將處理好的雌配子體和四分孢子體放入鋪滿 7個(gè)載玻片的滅菌皮氏培養(yǎng)皿中, 加入 PES(Provasoli’s enriched Seawater Medium)培養(yǎng)液, 進(jìn)行孢子采集。當(dāng)孢子放散并附著于載玻片上, 在顯微鏡下觀察視野(10×10)中附著的孢子數(shù)達(dá)到 20—30個(gè)時(shí), 移除藻體。培養(yǎng)液每 2天更換1次, 同時(shí)加入GeO2(2mg GeO2/1L PES)以防止硅藻的生長。當(dāng)生長出直立體后, 將其轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)缸(10×10×5cm)中進(jìn)一步培養(yǎng)。

1.2 實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置

1.2.1 預(yù)培養(yǎng) 將附著有孢子的載玻片于溫度(15±2)°C, 光照強(qiáng)度 80—90μmol/(m2·s), 鹽度 30±1,光周期12L∶12D條件下預(yù)培養(yǎng), 直至盤狀體直徑達(dá)到50μm左右。

1.2.2 溫度與光周期的雙因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 將預(yù)培養(yǎng)后的盤狀體分別置于溫度 5、10、15、20、25、30°C共6個(gè)梯度, 光周期設(shè)置為8L∶16D、12L∶12D、16L∶8D共3個(gè)梯度, 共18個(gè)組合, 每組設(shè)置3個(gè)平行樣, 其余條件與預(yù)培養(yǎng)一致。PES培養(yǎng)液每2天更換1次, 從每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中隨機(jī)抽取10個(gè)盤狀體并測量其直徑, 培養(yǎng)周期14天。當(dāng)幼苗高度達(dá)到500μm時(shí), 從每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中隨機(jī)挑選 10個(gè)幼苗測量其高度, 培養(yǎng)周期21天。

1.2.3 溫度與光照強(qiáng)度的雙因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)溫度與光周期交互實(shí)驗(yàn)得出的最佳實(shí)驗(yàn)條件用于溫度與光照強(qiáng)度的實(shí)驗(yàn)中。將預(yù)培養(yǎng)后的盤狀體分別置于溫度5、10、15、20、25、30°C共6個(gè)梯度, 光照強(qiáng)度設(shè)置為 50、80、110μmol/(m2·s)共 3 個(gè)梯度, 共18個(gè)組合, 每組設(shè)置 3個(gè)平行樣, 其余條件同預(yù)培養(yǎng)。PES培養(yǎng)液每2天更換1次, 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中隨機(jī)抽取10個(gè)盤狀體并測量其直徑, 培養(yǎng)周期14天。當(dāng)幼苗高度達(dá)到 500μm時(shí), 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中隨機(jī)挑選 10個(gè)幼苗測量其高度, 培養(yǎng)周期21天。

1.3 發(fā)育過程觀察和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

使用 Olympus BH2顯微鏡(Olympus Beijing Co.Ltd., China)進(jìn)行觀察并拍照記錄。使用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。利用公式 RGR(%/d)=(lnWt-lnW0)/t×100%求得盤狀體和幼苗的相對(duì)生長速率。其中W0為盤狀體初始直徑或幼苗初始高度, Wt為培養(yǎng)t天(d)后盤狀體直徑或幼苗高度。用Adobe Photoshop CS4圖像處理, 使用 Spss 22.0進(jìn)行雙因素方差分析(two-way ANOVA), 若差異顯著再用 Tukey’s進(jìn)行多重比較,以 P＜0.05作為差異顯著水平, 本文內(nèi)數(shù)值均為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果

2.1 披針形蜈蚣藻早期發(fā)育過程

披針形蜈蚣藻的囊果突出于雌配子體兩面, 呈深紅色, 成熟囊果直徑達(dá)到 200—350μm(圖 2a)。隨后囊果上形成直徑為50—80μm的囊果孔(圖2b), 果孢子經(jīng)由囊果孔放散出來, 并附著在載玻片上(圖2c)。果孢子呈深紅色, 球形, 直徑為 15μm 左右(圖2d)。在24h內(nèi)果孢子的原生質(zhì)體一側(cè)凹陷(圖2e), 并向凹陷對(duì)側(cè)移動(dòng), 同時(shí)果孢子的另一端凸起并伸長形成萌發(fā)管, 原生質(zhì)體向萌發(fā)管移動(dòng), 并在原地留下半透明膠狀物質(zhì)(圖 2f—g)。當(dāng)原生質(zhì)全部移動(dòng)到萌發(fā)管后, 在凹陷處形成一道隔膜, 隨后原生質(zhì)體開始橫向分裂形成上下兩個(gè)大小、形態(tài)一致的原生質(zhì)體,然后縱向分裂成四個(gè)呈“十”字形排列的原生質(zhì)體,直至形成多細(xì)胞的團(tuán)狀結(jié)構(gòu)。隨著原生質(zhì)體的分裂,另一端的空泡及其中半透明膠狀物質(zhì)逐漸變小直至消失(圖2h—k)。隨后鄰近的細(xì)胞團(tuán)融合, 形成較大的細(xì)胞團(tuán)(圖2l—m)。當(dāng)細(xì)胞團(tuán)分化出水平方向分裂的基細(xì)胞和垂直方向上分裂的頂細(xì)胞時(shí), 進(jìn)入了盤狀體時(shí)期(圖 2n)。盤狀體直徑逐漸擴(kuò)大, 鄰近的盤狀體相互融合形成更大的盤狀體(圖 2o—p), 其直徑最大可達(dá)到300μm左右(圖 2q)。30天左右, 形成直立枝(圖 2r); 50天左右直立枝繼續(xù)生長形成早期幼苗, 隨后繼續(xù)發(fā)育成披針狀或二叉分枝的幼苗; 100天左右幼苗長到了約0.5cm高(圖2s); 150天左右, 幼苗達(dá)到1cm高, 并且在幼苗葉片的先端有≥2個(gè)披針形的分枝(圖2t)。四分孢子的發(fā)育過程與果孢子發(fā)育過程幾乎一致。

2.2 生活史

圖3為披針形蜈蚣藻的生活史, 由有性世代及無性世代組成。有性世代中, 配子體為雌雄異體。雄配子體成熟后由藻體的外表皮細(xì)胞形成球形、無色的精子囊。每個(gè)精子囊產(chǎn)生一個(gè)無色球形的精子。雌配子體成熟后, 由藻體的內(nèi)皮層細(xì)胞分化形成果胞枝生殖枝叢和輔助細(xì)胞生殖枝叢。果胞枝生殖枝叢由 12個(gè)以上橢圓形或略扁形細(xì)胞組成, 果胞枝為2個(gè)細(xì)胞,即果胞和下位細(xì)胞, 果胞末端有一長受精絲。輔助細(xì)胞生殖枝叢的主枝由13個(gè)橢圓形或略扁形細(xì)胞組成,輔助細(xì)胞橢球形, 比其他枝叢細(xì)胞大, 顏色較深。精子進(jìn)入受精絲, 到達(dá)果胞內(nèi)與卵細(xì)胞結(jié)合為合子。受精后的果胞與下位細(xì)胞融合形成融合胞。融合胞與鄰近的輔助細(xì)胞均產(chǎn)生聯(lián)絡(luò)絲, 融合胞內(nèi)的合子通過聯(lián)絡(luò)絲進(jìn)入輔助細(xì)胞內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。由輔助細(xì)胞產(chǎn)生產(chǎn)孢絲。產(chǎn)孢絲細(xì)胞不斷分裂, 集生成為囊果。成熟囊果突出于藻體表面兩側(cè), 呈深紅色斑點(diǎn)。果孢子囊成熟后,釋放出果孢子, 果孢子經(jīng)過不斷分裂形成盤狀體, 盤狀體繼續(xù)分裂形成直立枝, 最終發(fā)育成四分孢子體。

無性世代中, 四分孢子體的皮層細(xì)胞分化成橢圓形的四分孢子囊, 并散生在皮層內(nèi)。在囊內(nèi)經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生呈十字形排列的四分孢子, 成熟后分別萌發(fā)成雌、雄配子體。雌、雄配子體與四分孢子體形態(tài)相同, 交替出現(xiàn), 為同型世代交替。

2.3 溫度與光周期雙因素對(duì)披針形蜈蚣藻早期發(fā)育的影響

在溫度與光周期雙因素實(shí)驗(yàn)中, 溫度在5—30°C范圍內(nèi)時(shí), 隨著溫度的升高, 盤狀體(圖4a)和幼苗(圖4b)的相對(duì)生長速率呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。在同一光周期培養(yǎng)條件下, 10—25°C范圍內(nèi)盤狀體及幼苗能較好的生長, 15°C時(shí)二者均達(dá)到最大生長速率。當(dāng)溫度為5°C和30°C時(shí), 二者均生長緩慢。

當(dāng)溫度為 15°C、光周期為 16L∶8D時(shí), 盤狀體在 14天后直徑達(dá)到(200±10)μm, RGR 為(9.902%±0.51%)/d; 此條件下培養(yǎng) 21天后幼苗高度達(dá)到(3.73±0.19)mm, RGR 為(9.569%±0.48%)/d。當(dāng)溫度為15°C、光周期為12L∶12D時(shí), 盤狀體在14天后直徑為(141±7.1)μm, RGR 為(7.405%±0.37%)/d; 同一條件下 21天后幼苗高度為(2.61±0.13)mm, RGR為(7.869%±0.39%)/d。當(dāng)溫度為 15°C、光周期為 8L∶16D時(shí), 盤狀體在14天后直徑為(120±6)μm, RGR為(6.253%±0.31%)/d; 同一條件下培養(yǎng) 21天后幼苗高度為(2.1±0.11)mm, RGR 為(6.834%±0.34%)/d。

綜上所述, 溫度與光周期對(duì)披針形蜈蚣藻盤狀體發(fā)育及幼苗生長有極顯著影響(P＜0.01, 表1)。披針形蜈蚣藻適宜發(fā)育溫度范圍為 10—25°C, 最適發(fā)育溫度為15°C。最適光周期為16L∶8D。

2.4 溫度與光照強(qiáng)度雙因素對(duì)披針形蜈蚣藻早期發(fā)育的影響

在溫度與光照強(qiáng)度雙因素實(shí)驗(yàn)中, 當(dāng)溫度在 5—15°C 范圍時(shí), 盤狀體(圖 5a)及幼苗(圖 5b)的相對(duì)生長速率隨溫度的升高而增大, 15°C時(shí)二者相對(duì)生長速率達(dá)到最大。當(dāng)溫度為 15—30°C時(shí), 隨著溫度的升高, 二者的相對(duì)生長速率下降。

圖2 披針形蜈蚣藻的早期發(fā)育Fig. 2 The early development of carpospores in G. lanceolata注: a. 囊果分布在藻體表面; b. 囊果表面觀, 箭頭所指為囊果孔; c—d. 果孢子; e. 果孢子原生質(zhì)體向一側(cè)凹陷; f. 果孢子內(nèi)原生質(zhì)體向萌發(fā)管一側(cè)移動(dòng); g—j. 果胞子分裂; k. 空泡及內(nèi)容物逐漸消失; l—m. 細(xì)胞團(tuán)融合; n. 盤狀體; o—p. 盤狀體融合; q. 融合后形成的較大盤狀體; r. 直立枝; s—t. 幼苗

圖3 披針形蜈蚣藻的生活史Fig. 3 The life cycle of G. lanceolata

圖4 不同溫度與不同光周期對(duì)披針形蜈蚣藻盤狀體(a)和幼苗(b)發(fā)育的影響Fig. 4 Effects of temperature and photoperiod on the development of G. lanceolata discoid crust (a) and seedling (b)

表1 溫度與光周期交互實(shí)驗(yàn)的雙因素方差分析Tab. 1 The two-way analysis of variance in temperature and photoperiod

盤狀體及幼苗的最適生長條件為溫度 15°C、光照強(qiáng)度 80μmol/(m2·s), 此條件下培養(yǎng) 14天后盤狀體的直徑達(dá)到(206±11)μm, RGR 為(10.113%±0.51%)/d;培養(yǎng) 21天的幼苗高度達(dá)到(3.20±0.17)mm, RGR為(8.839%±0.44%)/d。培養(yǎng)條件為溫度15°C、光照強(qiáng)度110μmol/(m2·s)時(shí)盤狀體及幼苗的生長狀態(tài)較好, 培養(yǎng) 14天的盤狀體直徑為(186±9.3)μm, RGR 為(8.657%±0.43%)/d; 同一條件下培養(yǎng) 21天后幼苗高度為(2.61±0.13)mm, RGR為(7.869%±0.39%)/d。培養(yǎng)條件為溫度 15°C、光照強(qiáng)度 50μmol/(m2·s)時(shí)盤狀體及幼苗的生長狀態(tài)相對(duì)最差, 培養(yǎng) 14天的盤狀體直徑為(130±6.5)μm, RGR 為(6.825%±0.34%)/d; 同一條件下培養(yǎng) 21天后幼苗高度為(1.96±0.1)mm, RGR為(6.505%±0.33%)/d。

綜上, 溫度與光照強(qiáng)度對(duì)披針形蜈蚣藻盤狀體發(fā)育及幼苗生長有極顯著影響(P＜0.01, 表2)。披針形蜈蚣藻早期發(fā)育的最適光照強(qiáng)度為80μmol/(m2·s)。

3 討論

圖5 不同溫度與不同光照強(qiáng)度對(duì)披針形蜈蚣藻盤狀體(a)和幼苗(b)發(fā)育的影響Fig. 5 Effects of temperature and irradiance on the development of G. lanceolata discoid crust(a) and seedling(b)

表2 溫度與光照強(qiáng)度交互實(shí)驗(yàn)的雙因素方差分析Tab. 2 The two-way analysis of variance in temperature and irradiance

對(duì)披針形蜈蚣藻孢子的生長發(fā)育過程進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)孢子表面先突出形成萌發(fā)管, 隨后原生質(zhì)體移動(dòng)至萌發(fā)管內(nèi)分裂成細(xì)胞團(tuán), 細(xì)胞團(tuán)繼續(xù)發(fā)育成盤狀體, 同時(shí)空泡狀結(jié)構(gòu)逐漸消失。因此披針形蜈蚣藻的孢子發(fā)育類型為“間接盤狀體”型。豬野俊平(1947)對(duì)屬模蜈蚣藻(G. filicina)、帶形蜈蚣藻(G.turuturu)、橢圓蜈蚣藻(G. elliptica)三種蜈蚣藻的孢子發(fā)生類型進(jìn)行了比較研究, 認(rèn)為蜈蚣藻屬的孢子發(fā)生類型有間接盤狀體型或間接絲狀體型。有研究表明,繁枝蜈蚣藻(G. ramosissima)(劉鳳賢等, 1986)、舌狀蜈蚣藻(G. livida)(宋志明, 2013)、細(xì)弱蜈蚣藻(G.tenuis)(曹翠翠等, 2015)的孢子發(fā)育類型為間接盤狀體型或間接絲狀體型。大連蜈蚣藻(G. dalianensis)和多枝蜈蚣藻(G. ramosa)的孢子發(fā)育類型為間接盤狀體型, 黃海蜈蚣藻(G. huanghaiensis)的孢子發(fā)育類型為間接絲狀體型(趙丹, 2012)。孢子生長發(fā)育過程中絲狀體的出現(xiàn)為其大量培養(yǎng)和絲狀體采苗提供便利,改變了以往僅從四分孢子、果孢子獲得盤狀體的單一途徑(張澤宇等, 2007)。

另外, 我們將培養(yǎng)皿內(nèi)未附著的孢子吸出, 放入鋪滿扇貝殼的培養(yǎng)皿中繼續(xù)培養(yǎng)。結(jié)果表明, 附著在貝殼上的果孢子更快地發(fā)育成盤狀體, 而未附著的果孢子生長發(fā)育緩慢或者逐漸失去活性, 說明孢子的發(fā)育須附著在一定的基質(zhì)上。

實(shí)驗(yàn)中觀察到了披針形蜈蚣藻的盤狀體融合現(xiàn)象, 即兩個(gè)或多個(gè)盤狀體融合形成一個(gè)較大的盤狀體。紅藻門中許多海藻盤狀體發(fā)育時(shí)期都存在融合的現(xiàn)象(陳美琴等, 1985; Vera et al,2008; Li et al, 2010 ;Zhao et al, 2010), 如同屬的帶形蜈蚣藻(姜春梅, 2011)和舌狀蜈蚣藻(宋志明, 2013)等。除蜈蚣藻屬外, 膠黏藻屬(Dumontia)的單條膠黏藻(D. simplex)在早期發(fā)育過程中也出現(xiàn)了多個(gè)盤狀體融合成一個(gè)超級(jí)盤狀體的現(xiàn)象(姜朋等, 2016)。而且在盤狀體融合之前, 我們觀察到了細(xì)胞團(tuán)的融合, 這是其他蜈蚣藻中未發(fā)現(xiàn)的過程。同時(shí)本研究在幼苗培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn), 當(dāng)幼苗的間距大于3—4 mm時(shí), 其生長速率最快。

披針形蜈蚣藻的生活史由單倍的雌雄配子體及二倍四分孢子體組成。配子體與四分孢子體形態(tài)一致,為同型世代交替, 成熟的雌、雄配子體在外觀上可以分辨。披針形蜈蚣藻生活史與屬模蜈蚣藻相似, 這也為其分類提供了依據(jù)。

通過本研究得出, 溫度和光周期對(duì)披針形蜈蚣藻發(fā)育均有影響。雙因子方差分析表明, 溫度與光周期的交互作用對(duì)盤狀體發(fā)育及幼苗生長均有極顯著性影響(P＜0.01)。最適合盤狀體發(fā)育的條件是溫度15°C, 光周期 16L∶8D。與 Ye等(2013)的研究結(jié)果,即四分孢子體的最適生長條件為溫度 16°C, 光周期16L∶8D相似。亞洲蜈蚣藻(G. asiatica)在10—20°C盤狀體能較好的生長, 20°C為其最適溫度(Adharini et al, 2014)。陽江蜈蚣藻(G. yangjiangensis)盤狀體發(fā)育適宜溫度為20°C(Wang et al, 2014)。從單因素角度看,在 10—25°C范圍內(nèi)披針形蜈蚣藻能較好地生長, 其中15°C時(shí)盤狀體和幼苗的相對(duì)生長速率最大。在適宜溫度范圍內(nèi)孢子附著后能很快地發(fā)育成深紅褐色的盤狀體, 其后發(fā)育成幼苗, 從而可見披針形蜈蚣藻的溫度耐受范圍較廣, 為廣溫種。然而溫度在5°C以下和 30°C 以上時(shí), 孢子的附著率下降, 并且發(fā)育成的盤狀體細(xì)胞內(nèi)色素在一周內(nèi)流失隨后死亡。此培養(yǎng)溫度與大連海域 10—11月份海水溫度為(15±5)°C, 4月份海水溫度為(10±3)°C(邵魁雙等, 2000)的自然條件下的生長溫度基本一致。本實(shí)驗(yàn)中 10—11月采集的披針形蜈蚣藻上成熟囊果比例較 4月份采集的樣本中成熟囊果比例高, 從而也可以證明 15°C為披針形蜈蚣藻的最適發(fā)育溫度。光周期是通過改變光照時(shí)間從而影響藻體生長所需吸收的能量。當(dāng)溫度一定時(shí),在一定范圍內(nèi), 光照時(shí)間越長, 藻體可獲得的能量越多, 生長速率越快(姜宏波等, 2009)。本實(shí)驗(yàn)中16L∶8D為披針形蜈蚣藻生長的最佳光周期。

光照強(qiáng)度是影響藻類生長繁殖的重要生態(tài)因子之一(歐陽崢嶸等, 2010)。雙因子方差分析表明, 溫度與光照強(qiáng)度的交互作用對(duì)盤狀體發(fā)育和幼苗生長均有極顯著性影響(P＜0.01)。盤狀體及幼苗的最適光照強(qiáng)度為 80μmol/(m2·s)。光照強(qiáng)度為 50μmol/(m2·s)和110μmol/(m2·s)時(shí), 盤狀體和幼苗的生長情況不如光照強(qiáng)度為 80μmol/(m2·s)條件下好?？赡芤?yàn)?110μmol/(m2·s)光照強(qiáng)度超過了藻類植物光飽和點(diǎn), 使其葉綠素a含量降低, 抑制了一定的光合速率, 從而不能獲得足夠的能量, 導(dǎo)致生長緩慢。80μmol/(m2·s)的光照強(qiáng)度沒有達(dá)到光飽和點(diǎn), 光合速率也較低, 同樣不能積累足夠的能量。研究表明, 在適宜溫度下, 低光照強(qiáng)度培養(yǎng)條件更有利于鶯歌海蜈蚣藻(G. yinggehaiensis)盤狀體的發(fā)育(趙丹, 2012), 而高光照強(qiáng)度更適合細(xì)弱蜈蚣藻盤狀體的發(fā)育(曹翠翠等, 2015)。

4 結(jié)論

(1) 披針形蜈蚣藻孢子發(fā)育過程中形成萌發(fā)管,無絲狀體的產(chǎn)生, 發(fā)育類型為“間接盤狀體”類型。孢子早期發(fā)育過程中出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)融合、盤狀體融合現(xiàn)象。

(2) 披針形蜈蚣藻生活史由單倍體的雌、雄配子體, 二倍體的果孢子體和四分孢子體組成, 配子體與四分孢子體形態(tài)一致, 為同型世代交替。

(3) 光溫的交互作用對(duì)披針形蜈蚣藻盤狀體的發(fā)育和幼苗生長均有極顯著影響(P＜0.01)。適宜生長發(fā)育溫度范圍為 10—25°C, 其中溫度 15°C、光周期16L∶8D、光照強(qiáng)度 80μmol/(m2·s)條件下盤狀體及幼苗生長發(fā)育最快。

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