金 東 春

(延邊大學農(nóng)學院，吉林 延吉 133002)

東北黑腳麻雞以“三高一低”，即可食部、氨基酸及維生素含量高，膽固醇含量低微而深受歡迎，尤其東北黑腳麻雞對東北氣候環(huán)境適應性強,抗病力強，死亡率低，同時，因其肉質(zhì)嫩滑、皮爽、骨軟、鮮嫩味美，風味獨特而廣受歡迎。但近年來，在抗生素和化學藥物等飼料添加劑所造成的畜禽產(chǎn)品的負面影響，人們對畜禽產(chǎn)品品質(zhì)的要求越來越苛刻。消費者不但追求無污染、無殘留、無副作用，能增強機體免疫力，安全可靠、營養(yǎng)豐富的無公害綠色食品，而且更關(guān)注純天然飼料飼養(yǎng)的禽類產(chǎn)品。近年來，國內(nèi)許多學者對中草藥添加劑進行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)中草藥添加劑不但能夠增強畜禽的免疫器官，而且對提高機體免疫力有一定作用。因為天然中草藥具有天然性、多靶點、多功能性、毒副作用小、無環(huán)境污染、無殘留、無副作用，又能增強機體免疫力等特點，已成為國內(nèi)外研究飼料添加劑的研究熱點。

黃芪(Radix Astragali)是多年生草本植物，特別是東北黃芪具有喜冷涼，耐寒性強，含有甙類、多糖、氨基酸及微量元素等多種有效成分，其中多糖含量較多。它不僅可以影響免疫器官的重量，而且促進免疫細胞的增值分化，提高機體的體液免疫功能，促進抗體的生成。黃芪多糖是黃芪的天然活性成分，能促進機體非特異性和特異性免疫，增強機體免疫功能?，F(xiàn)代醫(yī)學研究表明，黃芪成分中的黃芪多糖具有增強機體免疫功能作用，目前黃芪多糖的研究主要集中在提高免疫器官指數(shù)[1-3]、增強免疫功能[4-9]、增加機體血清淋巴細胞百分數(shù)、刺激淋巴細胞增殖影響免疫細胞信息傳導方面[10-15]及增加紅細胞分化成熟方面的研究[16]。

本試驗以東北黑腳麻雞為研究對象，通過在基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的黃芪復方中草藥飼料添加劑，觀察對東北黑腳麻雞的血液生理生化指標和免疫器官的影響，證實黃芪復方中草藥飼料添加劑對東北黑腳麻雞的血液生理生化指標和免疫器官有影響效果,為今后黃芪復方中草藥飼料添加劑的開發(fā)研究提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

1) 雞飼養(yǎng)研究日糧組成 雞試驗飼料是參照NRC(1994)，設(shè)計日糧和肉雞飼養(yǎng)標準和雞飼養(yǎng)標準(2004版)[17]，并結(jié)合我國實際情況，執(zhí)行飼養(yǎng)配制，日糧配方及各組日糧營養(yǎng)水平(表1、2)。

2) 復方中藥配方 黃芪復方中草藥由黃芪、東北人參莖、黨參、VA、VE等組成。

表1對照組基礎(chǔ)日糧組成

Table1Thebasaldietcompositionofthecontrolgroup(%)

組成成分日齡1～2122～4243～60玉米68．0068．0070．00豆粕21．0021．0021．00玉米麩6．707．005．00大豆油1．501．201．20檸檬酸鈉0．500．500．50碳酸鈣1．001．001．00碳酸氫鈣0．100．100．10DL蛋氨酸(40%)1．001．001．00礦物質(zhì)添加劑0．100．100．10維他命添加劑0．100．100．10總量100．00100．00100．00

表2 對照組基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)水平

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計

共設(shè)4個試驗組，即3個試驗組和1個對照組。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加1%、3%和6%的黃芪復方中草藥添加劑，試驗期分別為40和60 d。

1.2.2 飼喂方法

試驗選用健康1 d東北黑腳麻雞仔，將體重相近的120羽分為4組，每組30羽，飼養(yǎng)60 d對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)為實驗組飼喂基礎(chǔ)飼料加復方中藥添加劑，采用舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食、飲水。

1.2.3 各組免疫器官指數(shù)測定

飼養(yǎng)60 d后，每組30羽東北黑腳麻雞中挑出體重相近的3羽。空腹8 h后，在雞翅下靜脈采新鮮血液，脫臼致死，解剖剝離并摘取胸腺、脾臟和法氏囊，用濾紙拭去表面污血，稱重/mg。

免疫器官指數(shù)的計算公式如下:

脾臟系數(shù)=[脾臟鮮重(mg)/活體重(g)]×10;

胸腺系數(shù)=[胸腺鮮重(mg)/活體重(g)]×10;

法氏囊系數(shù)=[法氏囊鮮重(mg)/活體重(g)]×10。

1.2.4 血液生化指標的測定

分別在養(yǎng)殖40和60 d的東北黑腳麻雞各試驗組中選取3羽體重相近的健康東北黑腳麻雞，空腹6 h后雞翅下靜脈真空管采血，用全自動血液分析儀進行測定。

1.2.5 血清中免疫球蛋白測定

分別在養(yǎng)殖40和60 d的東北黑腿麻雞中選取2羽體重相近的健康東北黑腳麻雞，空腹6 h后雞翅下靜脈采血，3 000 r/min離心10 min,分離血清，采用酶聯(lián)免疫技術(shù)測定,使用雞免疫球蛋白試劑盒(上海鈺博生物科技有限公司)，按照說明書要求進行測定。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理與分析

統(tǒng)計學分析結(jié)果數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件處理，2組間比較用t檢驗，以P<0.05,判斷為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫器官指數(shù)的檢測結(jié)果

對東北黑腳麻雞脾臟指數(shù)檢測結(jié)果如表3所示。試驗Ⅰ組(40 d,15.00%)和試驗Ⅰ組(60 d,17.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對照組,有顯著性差異(P<0.05)；試驗Ⅱ組(40 d,33.84%)和試驗Ⅱ組(60 d,36.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對照組,有極顯著性差異(P<0.01)；試驗Ⅲ組(40 d,39.09%)和試驗Ⅲ組(60 d,46.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對照組,有極顯著性差異(P<0.01)。說明3%和6%黃芪復方中草藥飼料添加劑對提高東北黑腳麻雞胸腺指數(shù)有影響。

表3東北麻雞免疫器官指數(shù)的影響

Table3TheeffectontheimmuneorgansoftheNortheastHeijiaoMAchicken

飼喂后天數(shù)/d項目指數(shù)對照組試驗Ⅰ組試驗Ⅱ組試驗Ⅲ組40胸腺指數(shù)2．66±0．173．06±0．20b3．56±0．67a3．70±0．17a60胸腺指數(shù)2．69±0．113．16±0．20b3．66±0．37a3．94±0．24a40脾臟指數(shù)1．16±0．441．24±0．101．36±0．37b1．72±0．27a60脾臟指數(shù)1．34±0．171．26±0．201．46±0．671．62±0．15b40法氏囊指數(shù)1．03±0．421．06±0．471．13±0．14b1．17±0．34a60法氏囊指數(shù)0．93±0．421．03±0．121．09±0．221．13±0．42a

注：組間t檢驗，同一行與對照組比較，b有顯著性差異P<0.05；a有極顯著性差異P<0.01,下同。

由表3可知，試驗Ⅰ組(40 d,6.89%)和試驗Ⅰ組(60 d,1.34%)的脾臟指數(shù)與對照組之間沒有顯著性差異；試驗Ⅱ組(40 d,17.24%)脾臟指數(shù)與對照組之間有顯著性差異(P<0.01)，試驗Ⅲ組(40 d,48.28%)脾臟指數(shù)明顯高于對照組，有極顯著性差異(P<0.01)，而試驗Ⅲ組(60 d,20.09%)的脾臟指數(shù)明顯高于對照組，有顯著性差異(P<0.01)。說明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑對提高60 d東北黑腳麻雞脾臟指數(shù)有影響。

由表3可知，試驗Ⅰ組(40 d,13.00%)和試驗Ⅰ組(60,8.00%)的法氏囊指數(shù)與對照組之間有顯著性差異；試驗Ⅱ組(40 d,8.00%)的法氏囊指數(shù)與對照組之間沒有顯著性差異，而試驗Ⅱ組(60 d,26%)的法氏囊指數(shù)與對照組有極顯著性差異(P<0.01)；試驗Ⅲ組(40 d,18.5%)和試驗Ⅲ組(60 d,18.3%)的法氏囊指數(shù)與對照組比較，有極顯著性差異(P<0.01)。說明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯延長60 d東北黑腳麻雞法氏囊萎縮時間。

2.2 東北黑腳麻雞血象指標測定

紅細胞檢測結(jié)果表明(表4)，第40天時，試驗Ⅱ組(24.19%)與對照組相比有顯著性差異(P<0.01)；第60天時，試驗Ⅱ組(13.41%)與對照組相比有顯著差異(P<0.05)。說明3%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d紅細胞數(shù)值。

白細胞檢測結(jié)果表明(表4)，第40天時，試驗Ⅱ組(13.65%)與對照組比較差異顯著(P<0.05)，試驗Ⅲ組(33.90%)與對照組比較差異極顯著(P<0.01)；第60天時，試驗Ⅱ組(14.14%)與對照組比較差異顯著(P<0.05)，試驗Ⅲ組(41.97%)與對照組比較差異極顯著(P<0.01)。說明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑可明顯增加40和60 d的白細胞數(shù)值。

表4 對東北黑腳麻雞紅白細胞數(shù)量的影響

2.3 對東北黑腳麻雞的白細胞數(shù)量的影響

40和60 d東北黑腳麻雞血液中嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和單核細胞檢測結(jié)果表明(表5)，40和60 d試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與對照組相比較無顯著性差異(P>0.05)；而40和60 d淋巴細胞檢測結(jié)果表明(表5)，試驗Ⅲ組(7.60%,40 d)和試驗Ⅲ組(8.03%,60 d)對照組比較呈顯著性差異(P<0.05)。說明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑對東北黑腳麻雞淋巴細胞有影響。

表5 對東北黑腳麻雞的白細胞亞群數(shù)量變化影響

2.4 對東北黑腳麻雞血清生化指標的影響

40和60 d組中總蛋白血清生化指標檢測結(jié)果表明(表6)，試驗Ⅱ組(40 d,15.78%)和試驗Ⅱ組(60 d,16.33%)的總蛋白指數(shù)明顯高于對照組，且差異顯著(P<0.01)，試驗Ⅲ組(40 d,19.28%)和試驗Ⅲ組(60 d,20.97%)的總蛋白指數(shù)明顯高于對照組，且差異顯著(P<0.01)。

由表6可知，試驗Ⅱ組(40 d,21.75%)和試驗Ⅱ組(60 d,34.55%)的白蛋白指數(shù)明顯高于對照組，且差異極顯著(P<0.01)，試驗Ⅲ組(40 d,35.35%)和試驗Ⅲ組(60 d,44.24%)的白蛋白指數(shù)明顯高于對照組，且差異極顯著(P<0.01)。

由表6可知，試驗Ⅱ組(60 d,14.24%)和試驗Ⅲ組(60 d,19.14%)的球蛋白指數(shù)高于對照組，且差異顯著(P<0.01)。

說明3%和6%黃芪復方中草藥飼料添加劑可顯著提高東北黑腳麻雞總蛋白、白蛋白和球蛋白指數(shù)。

表6 對東北黑腳麻雞血清生化指標的影響

2.5 血清中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)含量測定結(jié)果

IgA的檢測結(jié)果表明(表7)，試驗Ⅱ組(40 d,19.4%)和試驗Ⅱ組(60 d,20.6%)的IgA明顯高于對照組，且差異顯著(P<0.05)，試驗Ⅲ組(40 d,34.4%)和試驗Ⅲ組(60 d,50.0%)的IgA明顯高于對照組,且差異極顯著(P<0.01)。表明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d組血清中IgA數(shù)值。

IgM的檢測結(jié)果表明(表7)，試驗Ⅱ組(40 d,28.13%)和試驗Ⅱ組(60 d,43.01%)的IgM明顯高于對照組，且差異極顯著(P<0.01)；試驗Ⅲ組(40 d,34.71%)的Ig明顯高于對照組，且差異極顯著(P<0.01)，試驗Ⅲ組(60 d,20.0%)的IgM指數(shù)明顯高于對照組，差異顯著(P<0.05)。證明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d血清中IgM數(shù)值。

IgG的檢測結(jié)果表明(表7)，試驗Ⅱ組(40 d,21.38%)和試驗Ⅱ組(60 d,20.25.01%)的IgG指數(shù)高于對照組,且差異顯著(P<0.05)；試驗Ⅲ組(40 d,13.10%)和試驗Ⅲ組(60 d,3.17%)的IgG有顯著性差異(P<0.05)。說明6%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯提高40 d組血清中的IgG數(shù)值。

表7 對東北黑腳麻雞血清免疫球蛋白含量的影響

3 討論與分析

試驗主要以黃芪為主，配以人參莖、黨參等組成的自擬中藥復方飼料添加劑，研究其對東北黑腳麻雞免疫功能的影響,觀察東北黑腿麻雞免疫器官指數(shù)和血清生化指標。從試驗結(jié)果可以看出，40 d,6%和60 d,6%的黃芪復方中藥飼料添加劑可以明顯提高東北黑腳麻雞脾臟和胸腺指標，進而增強機體體液免疫功能，這與王福傳等[18]對黃芪、金銀花的研究結(jié)果一致。本文首次發(fā)現(xiàn)，60 d,6%的黃芪復方中草藥添加劑可以明顯延長法氏囊萎縮時間，能明顯促進東北黑腳麻雞生長期法氏囊的生長發(fā)育，這可能與添加維生素A和維生素E，提高了淋巴細胞的轉(zhuǎn)換率和免疫功能的增加有關(guān)，但還有待于進一步研究。

試驗中6%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯有助于提高淋巴細胞的免疫水平，說明黃芪復方中草藥飼料添加劑對東北黑腳麻雞生理機能具有促進作用。這與高微微等[14]的報道一致。3%黃芪復方中草藥飼料添加劑明顯提高了紅細胞免疫水平，說明黃芪復方中草藥飼料添加劑對東北黑腳麻雞的生理機能具有促進作用,這與楊海燕等[19]的報道一致。

該研究也發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)日糧中添加3%,6%黃芪復方中草藥添加劑明顯提高了40和60 d東北黑腳麻雞血清中的IgG和IgM含量，這表明3%和6%的黃芪復方添加劑可明顯促進東北黑腳麻雞生長后期免疫球蛋白的分泌，促進免疫器官生長發(fā)育，增強機體免疫細胞功能。

4 結(jié)論

6%黃芪復合中草藥飼料添加劑作用效果最明顯,不僅明顯提高東北黑腳麻雞胸腺免疫功能指數(shù)，免疫器官指數(shù)，也明顯地延長了法氏囊萎縮時間，為今后黃芪為主方的復合中草藥飼料添加劑開發(fā)研究提供理論依據(jù)。

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