單聯(lián)學(xué)

（大連市旅順口區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116041）

尿潛血是尿檢中的重要項(xiàng)目，常用的檢驗(yàn)方法有尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡檢查紅細(xì)胞（鏡檢紅細(xì)胞）兩種。由于顯微鏡檢查對鑒別腎小球性與非腎小球血尿有重要的臨床價值，故有學(xué)者提出顯微鏡檢查是尿液紅細(xì)胞檢驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，是尿液分析儀無法替代的[1]。但是，近年來隨著尿液分析儀的迅速普及，測定參數(shù)向著快速、簡便準(zhǔn)確的方向發(fā)展，為臨床提供了更好的診斷依據(jù)。顯微鏡檢查耗時費(fèi)力，在一些醫(yī)院尿液顯微鏡檢查有逐漸被尿液分析儀替代的趨勢。為此，筆者對300例門診患者的隨機(jī)尿樣，用尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡鏡檢紅細(xì)胞兩種方法進(jìn)行檢驗(yàn)，并對兩種方法的符合程度進(jìn)行比較。

1 原理與方法

1.1 尿液分析儀使用的是干化學(xué)試紙法，是根據(jù)多聯(lián)試帶上各模塊與尿液成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學(xué)物質(zhì)，如直接檢測紅細(xì)胞、白細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)涵物，間接推斷細(xì)胞的有無。尿液分析儀潛血反應(yīng)原理是：血紅蛋白（Hb）中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態(tài)，后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯(lián)甲苯胺發(fā)生由黃色→草綠色→深藍(lán)色的顏色變化。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細(xì)胞等有形成分直觀真實(shí)的呈現(xiàn)在鏡下，是對底物的真實(shí)反映。

1.2 方法[2]

1.2.1 尿液分析儀檢查尿潛血，將10 mL新鮮尿液放入自動進(jìn)樣器上，儀器進(jìn)行測定，結(jié)果自動傳輸。報告形式分別為（-、+/-、+、++、+++、++++）使用迪瑞尿液分析儀及其配套的尿分析試紙條。

1.2.2 鏡檢取尿液10 mL于試管中以1500 r/min 離心5 min，棄去上清液，留沉淀0.2 mL。充分混勻后，取出約20 μL于載玻片上，加蓋玻片（2.0 cm×2.0 cm），然后用軟弱的光線以低倍鏡觀察全貌，以免漏掉量少而有意義的物體，再用高倍鏡辨認(rèn)細(xì)胞。結(jié)果報告為×個/高倍視野（HP）。

2 結(jié) 果

300 例門診患者的隨機(jī)尿樣用兩種方法同時檢查。尿液分析儀潛血陽性，鏡檢有紅細(xì)胞的96例，鏡檢無紅細(xì)胞的34例。尿液分析儀潛血反應(yīng)陰性鏡檢無紅細(xì)胞的有161例，有紅細(xì)胞的有9例。兩種方法出現(xiàn)差異。

3 討 論

由于兩種方法的原理不同，影響因素也不同，因而兩種檢驗(yàn)方法的結(jié)果存在一定的差異。

3.1 假陽性即尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性，鏡檢陰性，其常見原因有：①血紅蛋白（Hb）尿液分析儀潛血反應(yīng)既能與完整的紅細(xì)胞發(fā)生陽性反應(yīng)，也可與紅細(xì)胞溶解釋放的Hb發(fā)生陽性反應(yīng)，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的紅細(xì)胞。健康人尿中Hb含量極微，定性為陰性。疾病時，尿中Hb有兩個來源：一是發(fā)生血管內(nèi)溶血，血漿Hb超過了結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力，游離Hb從尿中排出。另一個是尿路（尤其是上尿路）出血，紅細(xì)胞在高滲或（和）低滲時破壞Hb蛋白溢出。此時，尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性，但尿沉渣鏡檢不見紅細(xì)胞或僅見紅細(xì)胞碎片。②肌紅蛋白（Mb）分子中也有血紅素基團(tuán)，具有過氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中，正常人尿中含量甚微，不能檢出。當(dāng)心肌與骨骼肌發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷時，血漿Mb增高，經(jīng)腎臟排泄，使尿中Mb含量增高，故潛血反應(yīng)呈陽性，鏡檢紅細(xì)胞為陰性。③某些患者尿中含有對熱不穩(wěn)定酶，也可使試劑塊發(fā)生顏色改變，出現(xiàn)潛血反應(yīng)陽性，鏡檢為陰性。④某些氧化性污染物，如次氯酸鹽會導(dǎo)致潛血反應(yīng)假陽性。⑤菌尿尿液是細(xì)菌良好的培養(yǎng)基，菌尿時有些細(xì)菌會產(chǎn)生氧化性物質(zhì)，使得試劑塊發(fā)生顏色變化，導(dǎo)致潛血反應(yīng)陽性，鏡檢紅細(xì)胞為陰性[3]。此外，微生物過氧化物酶的侵入也可引起假陽性。⑥長時間存放及高溫實(shí)驗(yàn)證明，標(biāo)本不新鮮，存放時間長或高溫存放，使?jié)撗磻?yīng)的陽性率相對增高，而紅細(xì)胞鏡檢相對減少，測試結(jié)果有可能出現(xiàn)假陽性；因此，建議尿液標(biāo)本存放時間不宜超過兩小時[3]。⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存或操作方法的不正確，均可造成結(jié)果的假陽性⑧尿液分析儀靈敏度過高[0.2 mg/dL出現(xiàn)（++）]，“級差”范圍太大0.8～50 mg/dL級為（+++）常會遇到儀器測試為（++），而鏡檢測試紅細(xì)胞為陰性，臨床上又找不到任何導(dǎo)致血紅蛋白尿原因的情況。再是尿中圓形的草酸鈣結(jié)晶的大小和形態(tài)和紅細(xì)胞非常相似，可導(dǎo)致尿液分析儀對紅細(xì)胞的錯誤判斷

3.2 假陰性即鏡檢陽性，尿液分析儀潛血反應(yīng)陰性，其常見原因有：①食物和藥物的應(yīng)影響由于飲食或藥物使尿液呈堿性時紅細(xì)胞溶解破裂，形成褐色顆粒，潛血反應(yīng)呈陽性，而鏡檢呈陰性；②維生素C尿液中大量存在時，能競爭性奪取反應(yīng)產(chǎn)生的氧，引起假陰性反應(yīng)；③高比重、高蛋白尿影響結(jié)果。

4 小 結(jié)

兩種不同的方法檢測目的，可以區(qū)分尿潛血陽性患者的血尿原因，特別是顯微鏡鏡檢紅細(xì)胞形態(tài)可以區(qū)分紅細(xì)胞的來源，尿液分析儀的敏感快捷與顯微鏡的良好結(jié)合，缺一不可，結(jié)合臨床全面分析。

[1] 叢玉隆.尿液沉渣的標(biāo)準(zhǔn)化建議[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2002,25(4):249-251.

[2] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:743-744.

[3] 樊云容,甘超,漆涌,等.UF-1000i全自動尿有形成分分析儀對尿路感染的診斷價值[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2009,32(7):635-638.