姚辛敏，王琪，周妍妍，謝寧，于水瀾

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

北五味子為木蘭科多年生落葉木質(zhì)藤本植物五味子SchisandraChinese(Turcz.)Baill.的成熟果實，具有補益心腎、寧心安神的作用。五味子醇甲為北五味子的主要成分，是五味子木脂素類化學(xué)成分，2010年版《中國藥典》以五味子醇甲的含量測定為指標(biāo)作為五味子藥材標(biāo)準(zhǔn)[1]。

課題組前期實驗研究利用超高效液相色譜聯(lián)用電噴霧質(zhì)譜檢測(UPLC-ESI-MS)和氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)確定了地黃飲子腦脊液移行成分中的原型成分為五味子醇甲，從而推斷五味子在地黃飲子對阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的防治中起到了重要作用[2]?；谶@一研究結(jié)果，針對五味子醇甲單體的藥理作用課題組進行了大量的文獻查閱工作，整理過程中發(fā)現(xiàn)，五味子醇甲對包括AD在內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥理作用在實驗研究中得到了研究者們的共識，本文試對五味子醇甲對中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥理作用的實驗研究進展綜述，以期為后續(xù)的研究拓展思路。

1 五味子醇甲改善、增強學(xué)習(xí)記憶能力作用

五味子醇甲可以增強AD小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，并且與其增強抗氧化和清除自由基能力密切相關(guān)。Di Hu等的研究應(yīng)用Aβ1-42作用于小鼠造成AD模型，將五味子醇甲給予AD小鼠灌服，對小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力、抗氧化和清除自由基的能力進行實驗，通過Y迷宮、水迷宮行為實驗學(xué)結(jié)果得出了這一結(jié)論[3]。

同樣的結(jié)論在對戊巴比妥鈉致衰記憶障礙的模型小鼠研究中也得到了體現(xiàn)，并且該實驗的體外結(jié)果提示，五味子醇甲可以降低脂質(zhì)過氧化水平，增加海馬區(qū)乙酰膽堿遞質(zhì)的合成，并且對凋亡基因Bcl-2家族的表達進行調(diào)節(jié)，這幾種作用可能與其改善衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力相關(guān)[4]。

五味子醇甲增強學(xué)習(xí)記憶的能力在對正常大鼠的實驗中進一步得到了證實[5]。

復(fù)方中的五味子醇甲協(xié)同其他成分也可以改善AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。林善花根據(jù)血清藥理學(xué)方法對生脈散藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進行了研究，發(fā)現(xiàn)生脈散的血中移行成分含有五味子醇甲；同時大鼠行為學(xué)實驗結(jié)果表明，灌服生脈散的AD模型大鼠在水迷宮實驗中的定位航行能力和空間探索能力具有明顯的優(yōu)勢，由此推斷五味子醇甲和其他移行成分共同對生脈散改善AD大鼠學(xué)習(xí)記憶的能力發(fā)揮了作用[6]。

2 五味子醇甲保護受損神經(jīng)細(xì)胞的作用

五味子醇甲可以改善腦組織的神經(jīng)元變性，對神經(jīng)細(xì)胞起到保護作用[7]。

2.1 五味子醇甲對AD細(xì)胞模型的細(xì)胞保護作用

五味子醇甲對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化損傷的保護作用，可以從維持細(xì)胞形態(tài)完整，提高細(xì)胞存活率，降低乳酸脫氫酶的漏出率三個方面實現(xiàn)，其減輕受損細(xì)胞的氧化損傷可能是通過清除氧自由基實現(xiàn)的[8]。

另有研究五味子醇甲對H2O2誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元HT22細(xì)胞損傷的神經(jīng)保護作用和機制。結(jié)果表明，五味子醇甲可以增加HT22細(xì)胞活力，并且對通過抑制細(xì)胞凋亡，調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白bcl-2、 bax和Caspase-3保護了細(xì)胞模型的神經(jīng)元損傷[9]。

此外，基于Aβ25-35誘導(dǎo)的 PC12細(xì)胞，對五味子超臨界萃取物作用于AD細(xì)胞模型損傷后生存狀態(tài)和活力的保護作用的實驗研究，分設(shè)的4個劑量組萃取物細(xì)胞給藥后，各組培養(yǎng)液MTT和LDH檢測結(jié)果顯示萃取物對細(xì)胞模型有明顯的保護作用，并呈現(xiàn)劑量依賴性。實驗結(jié)果表明五味子超臨界萃取物對Aβ25-35誘導(dǎo)的 PC12細(xì)胞有保護作用，并具有抑制細(xì)胞毒性、提高細(xì)胞活力的作用[10]。

復(fù)方中的五味子醇甲對細(xì)胞的神經(jīng)保護作用也有證實。肖飛以Aβ25-35損傷的PC12細(xì)胞作為AD模型,研究“去癡靈”中的五味子醇甲對該模型的預(yù)保護及治療作用。對3個劑量組的五味子醇甲進行細(xì)胞形態(tài)學(xué)的觀察、定量分析和MTT實驗，觀察細(xì)胞皺縮、邊界不清、萎縮、碎裂等的凋亡狀態(tài)，并計算有突觸細(xì)胞數(shù)目的定量結(jié)果，結(jié)合細(xì)胞活力的MTT檢測，證實了五味子醇甲對Aβ25-35損傷的PC12細(xì)胞的神經(jīng)保護作用[11]。

2.2 五味子醇甲對PD細(xì)胞模型的細(xì)胞保護作用

五味子醇甲對帕金森病(Parkinson's disease，PD)細(xì)胞模型也具有細(xì)胞保護作用。周俊杰的研究以MPP+作用于PC12細(xì)胞造成多巴胺能神經(jīng)元損傷的PD細(xì)胞模型，結(jié)果顯示五味子醇甲通過提高PD細(xì)胞活力和氧化應(yīng)激能力，減少細(xì)胞凋亡來保護受損的細(xì)胞[12]。李海濤的研究應(yīng)用6-羥基多巴胺誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡，五味子醇甲通過抗氧化和恢復(fù)線粒體功能實現(xiàn)對神經(jīng)細(xì)胞的保護作用[13]。

以上對五味子醇甲的細(xì)胞保護作用研究中，不論針對AD還是PD,研究者應(yīng)用的均是受損的神經(jīng)細(xì)胞，因而從細(xì)胞水平證實了五味子醇甲對受損神經(jīng)細(xì)胞具有保護作用。五味子醇甲對神經(jīng)細(xì)胞的保護作用可以通過對抗氧化應(yīng)激損傷，調(diào)控凋亡基因，清除氧自由基等作用來實現(xiàn)。

3 五味子醇甲鎮(zhèn)靜催眠、調(diào)節(jié)睡眠的作用

五味子醇甲具有鎮(zhèn)靜催眠作用，可以延長睡眠時間[14]，雖然其他五味子木質(zhì)素類成分也有催眠作用，但以五味子醇甲作用最強，其催眠作用與調(diào)節(jié)腦內(nèi)的五羥色胺水平有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)，五味子醇甲對睡眠的作用不僅僅停留在催眠水平，而且具有調(diào)節(jié)睡眠的作用，相同劑量的五味子醇甲對不同日齡果蠅的睡眠調(diào)節(jié)方式不同，其進行參與調(diào)節(jié)的基因有所差異[15-16]。最新的研究結(jié)果證實，五味子醇甲還有促覺醒的作用[5]，因而五味子醇甲對睡眠的調(diào)節(jié)作用更有待進一步的探究。鎮(zhèn)靜作用體現(xiàn)在五味子醇甲可以改善果蠅的攀爬能力，并呈現(xiàn)出一定的時效和量效關(guān)系[17-18]。

五味子醇甲是五味子鎮(zhèn)靜催眠作用的主要活性部位[19]，且五味子醇甲醇提物的鎮(zhèn)靜催眠作用要優(yōu)于水提物[20]。而五味子的鎮(zhèn)靜催眠功效的傳統(tǒng)應(yīng)用為水煎劑，因而提示臨床工作者應(yīng)用五味子進行睡眠調(diào)節(jié)時，藥效的發(fā)揮與劑型關(guān)系密切。

4 五味子醇甲抑制腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)分泌的作用

腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的分泌與情緒、睡眠等多種因素相關(guān)，研究者們發(fā)現(xiàn)五味子醇甲對不同腦區(qū)的神經(jīng)遞質(zhì)分泌有抑制作用。

五味子醇甲可以抑制缺血后紋狀體內(nèi)多巴胺(DA)的釋放[21]，增加大鼠紋狀體和下丘腦中的多巴胺含量[22]，有效抑制腦缺血引起的大鼠紋狀體細(xì)胞外液神經(jīng)遞質(zhì)水平的升高，包括去甲腎上腺素(NE)、多巴胺、谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)在內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)分泌受到抑制[23]。

近期的研究結(jié)果還顯示，五味子醇甲可明顯增加海馬區(qū)多巴胺、五羥色胺和去甲腎上腺素的含量，同時增加下丘腦區(qū)去甲腎上腺素含量[5]。

5 問題與展望

除改善學(xué)習(xí)記憶能力、保護神經(jīng)細(xì)胞、鎮(zhèn)靜催眠和抑制腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)分泌作用外，最新研究發(fā)現(xiàn)五味子醇甲可以縮短抑郁樣小鼠的懸尾實驗和游泳實驗時間，提示了五味子醇甲潛在的抗抑郁作用，并且其機制可能與增強五羥色胺和多巴胺的神經(jīng)系統(tǒng)功能相關(guān)[24]。

通過綜述發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有對細(xì)胞保護作用的研究多數(shù)僅從模擬相關(guān)疾病的細(xì)胞水平進行研究論證，缺乏對神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)元或者先進的動物模型進行神經(jīng)保護作用的機制研究，如能提供相關(guān)實驗數(shù)據(jù)，將對五味子醇甲的神經(jīng)細(xì)胞保護作用提供更有力的論據(jù)。

綜上，五味子醇甲的生物利用度較高，水溶性好，并且可以通過血腦屏障，因而對于中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的作用研究更有實際意義。五味子醇甲可以從改善學(xué)習(xí)記憶能力，保護受損的神經(jīng)細(xì)胞，調(diào)節(jié)睡眠，抑制神經(jīng)遞質(zhì)分泌和抗抑郁作用五個方面對中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病AD、PD、失眠、抑郁等進行干預(yù)。其中，對神經(jīng)遞質(zhì)分泌的抑制作用可以同時涉及幾種疾病的干預(yù)機制，反推至這幾種疾病發(fā)病機制的內(nèi)在聯(lián)系，或許可以為進一步的研究拓寬思路。

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