米吉提 張治華 銀鴿 （新疆博州溫泉縣畜牧獸醫(yī)站 833500）

對(duì)養(yǎng)牛業(yè)而言，一旦出現(xiàn)牛呼吸道疾病，除了對(duì)養(yǎng)牛場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益造成影響外還會(huì)影響整個(gè)養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。導(dǎo)致牛出現(xiàn)呼吸道疾病的具體原因比較復(fù)雜，病毒是其中非常重要的病理之一，通過對(duì)現(xiàn)階段已經(jīng)分離出的病毒分析可以看出，除牛病毒性腹瀉病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒等。牛呼吸道疾病還與一些環(huán)境因素產(chǎn)生聯(lián)系，比如溫度、濕度、粉塵等。

1 牛病毒性呼吸道疾病的病毒分離鑒定診斷方法

通過現(xiàn)階段已經(jīng)分離出來的病毒分析得出，這些病毒都可以被放在牛腎細(xì)胞上進(jìn)行培養(yǎng)。在針對(duì)這些病毒進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)時(shí)，可直接從感染呼吸道疾病的牛鼻腔分泌液上進(jìn)行樣本采集。在檢測(cè)時(shí)，采集病牛氣管黏膜或者是已經(jīng)發(fā)生病變的肺部組織，同時(shí)還可以將一些血液、脾臟器官當(dāng)做樣本進(jìn)行試驗(yàn)分析。其中BVDV出現(xiàn)兩種病變類型，其一是致細(xì)胞病變型 （CP），其二是非致細(xì)胞病變型 （nCP）。其中CP-BVDV可以讓感染細(xì)胞逐漸變圓，這樣會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漿液逐漸出現(xiàn)空泡現(xiàn)象，這種狀態(tài)如果一直持續(xù)會(huì)形成細(xì)胞單層拉網(wǎng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。通過對(duì)該現(xiàn)狀內(nèi)容進(jìn)行實(shí)際分析可以看出，現(xiàn)階段在臨床上主要是將nCP-BVDV作為分離的主要類型。在這種前提條件下可以直接與一些免疫熒光、RT-PCR等進(jìn)行結(jié)合，實(shí)現(xiàn)分離毒株培養(yǎng)物的有效鑒定，能盡可能保證鑒定結(jié)果真實(shí)、有效。除此之外，IBRV能促使細(xì)胞逐漸呈現(xiàn)出圓縮狀態(tài)，這種狀態(tài)下，其會(huì)漸漸演變成為葡萄樣群落，在單層細(xì)胞上會(huì)呈現(xiàn)出空洞現(xiàn)象[1]。除此之外，在實(shí)踐中還會(huì)偶爾出現(xiàn)合胞體狀態(tài)，針對(duì)這一現(xiàn)狀，在實(shí)踐中如果想對(duì)IBRV進(jìn)行鑒定，看其是否存在致細(xì)胞病變的病毒時(shí)，需要將通過病毒培養(yǎng)的上清液放置在特定的抗血清、或者是一些單克隆體上進(jìn)行中和試驗(yàn)。在中核試驗(yàn)實(shí)施過程中，要保證所有流程都按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定去完成，這樣才能保證中和試驗(yàn)的效果。在中和試驗(yàn)完成之后，通過對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，一旦確定細(xì)胞已經(jīng)被IBRV所感染，那么在這之中必然會(huì)出現(xiàn)核內(nèi)包涵體。

2 牛病毒性呼吸道疾病的病毒核酸檢測(cè)診斷方法

除了病毒分離鑒定的診斷方法之外，病毒核酸檢測(cè)的診斷方法也是近年來在針對(duì)牛病毒呼吸道疾病進(jìn)行判斷時(shí)比較常見的方式。病毒核算檢測(cè)方法與病毒分離方法在針對(duì)牛病毒性呼吸道疾病診斷時(shí)，前者與后者相比具有比較多的優(yōu)點(diǎn)。這是由于病毒分離法在實(shí)際應(yīng)用過程中很容易受到中和抗體的干擾，導(dǎo)致其敏感性和特異性比較高。另外，核算檢測(cè)方法能針對(duì)一些有感染性的病毒粒子進(jìn)行檢測(cè)。病毒核酸檢測(cè)方法在實(shí)際應(yīng)用過程中，該方法的整體敏感性和特異性比較明顯，同時(shí)還能在實(shí)際應(yīng)用中直接感受到已經(jīng)受到感染、或者是一些不完整的病毒基因，利用該方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)其科學(xué)合理的檢測(cè)。在檢測(cè)過程中，不僅實(shí)現(xiàn)對(duì)這些病毒的深入檢測(cè)，而且還能保證最終的檢測(cè)結(jié)果。有部分專家根據(jù)BVDV5’UTR基因序列，結(jié)合實(shí)際情況，構(gòu)建特異性引物，并且在其中逐漸形成了能夠針對(duì)BVDV進(jìn)行有效檢測(cè)的RT-PCR方法[2]。這種方法后期被應(yīng)用到實(shí)踐中，能從BVDV Oregon C24V中逐漸擴(kuò)增出相應(yīng)的特異性片斷。除此之外，從豬瘟病毒、IBRV、BRSV等的擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析可以看出，這些病毒的擴(kuò)增結(jié)果呈現(xiàn)陰性。

3 結(jié)束語

綜上所述，本文在針對(duì)牛病毒性呼吸道疾病診斷方法進(jìn)行分析，介紹病毒分離鑒定和病毒核酸檢測(cè)兩個(gè)方法。這些方法在保證最大限度為牛病毒性呼吸道疾病提出有針對(duì)性診斷的基礎(chǔ)上，能保證診斷結(jié)果真實(shí)、有效，為后期疾病防治提供準(zhǔn)確有效的依據(jù)作為支持。

[1]薛飛,朱遠(yuǎn)茂,馬磊.我國牛病毒性腹瀉、黏膜病研究進(jìn)展及防控策略[J].中國奶牛,2016（11）:25-29.

[2]王煒.牛主要呼吸道病毒病血清學(xué)調(diào)查、牛病毒性腹瀉病毒分離株鑒定及疫苗研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2014.