□ 劉 欣 姜子健 齊衍超 濰坊市食品藥品檢驗檢測中心

1 膠體金的概念

膠體金是氯金酸在還原劑的作用下聚合為特定大小的金顆粒，并在靜電作用下生成的一種穩(wěn)定膠體溶液。因膠體金顆粒具備電子密度較高的特點，并且在顆粒聚集達到107個/mm2的密度條件時，會出現(xiàn)粉紅色斑點，故可用作實驗指示物[1]。

2 免疫層析技術(shù)的概念

免疫層析技術(shù)是誕生于20世紀(jì)80年代初期的一種獨特的免疫分析方法，這一方法的關(guān)鍵技術(shù)在于將條狀纖維層析材料作為固相，使樣品泳動，并使待測物與其受體發(fā)生免疫反應(yīng)，通過酶反應(yīng)或直接使用標(biāo)記物進而得到如顯色等直觀現(xiàn)象。

3 食品安全快速檢測中GICA技術(shù)的應(yīng)用

GICA是以膠體金為標(biāo)記物的一種免疫層板方法。在GICA技術(shù)的應(yīng)用時，應(yīng)實現(xiàn)膜上抗體或特異性抗原的固定，在毛細作用下使樣品游動于層析條上，進而之與受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。而在此階段，因檢測帶上會截留相關(guān)物質(zhì)，檢測結(jié)果也一目了然[2]。

GICA在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用較早，已被普遍應(yīng)用于寄生蟲、早孕、乙肝等疾病的檢測中，并被普遍應(yīng)用于動物細菌性、病毒性疾病的動物疫病診斷方面。在食品檢測領(lǐng)域，GICA的應(yīng)用時間較晚，但近期以來，已在迅猛發(fā)展并被普遍應(yīng)用于致病菌、霉菌毒素等食品安全快速檢測領(lǐng)域。

3.1 霉菌毒素檢測

霉菌毒素是霉菌生成的有毒的次級代謝物，對人類以及動物均有害，廣泛存在于飼料以及糧油食品中。在全球范圍內(nèi)，所發(fā)現(xiàn)的結(jié)構(gòu)不一的霉菌毒素在400種以上，其中被分離鑒定的霉菌毒素在20種以上，如T2/HT2毒素、嘔吐毒素等均會帶來較大危害。當(dāng)前，全球范圍內(nèi)對糧食中主要霉菌毒素的限量做出規(guī)定的國家在100個以上，我國GB2761-2017中也對食品中霉菌毒素的限量做出了規(guī)定。

當(dāng)前在霉菌毒素檢測中，GICA的應(yīng)用已極其廣泛。例如在5 min內(nèi)，Charm Rosa霉菌毒素定量檢測系統(tǒng)便可對T2/HT2毒素、嘔吐毒素等谷物飼料中的霉菌毒素進行快速定量測定。樣品制備流程簡單、快捷，檢測流程也并不復(fù)雜，所得結(jié)果與采用國際方法所得結(jié)果極其相符。當(dāng)前這一方法已被世界各國普遍應(yīng)用[3]。

3.2 獸藥殘留檢測

獸藥殘留不但會對人體健康構(gòu)成威脅，并且也會給畜產(chǎn)品的質(zhì)量帶來不良影響。國際上往往會采用初篩加確證的方法來檢測獸藥殘留，即在采用一種簡單、靈敏、便捷的方法對將要檢測的樣品快速進行初步篩選之后，如結(jié)果呈陽性，應(yīng)采用較為精準(zhǔn)的方法對該樣品進行確證分析。在對將要檢測的樣品快速進行初步篩選時，往往會采用膠體金試紙條進行檢測。張改平等會基于特異性抗體的獲取，并利用膠體金進行標(biāo)記以制得試紙條。此外，如紅霉素、磺胺等藥物也已具備相應(yīng)的試紙條產(chǎn)品。當(dāng)前市面上已有試紙條產(chǎn)品可對獸藥殘留（抗生素類、磺胺類、呋喃類、抗寄生蟲類和激素類藥物）進行同步檢測，使得檢測時間與成本大幅節(jié)省。在各類檢測方法中，除了無需使用大型儀器設(shè)備以外，GICA也具備快捷、簡便的特點，因此被普遍應(yīng)用于獸藥檢測中。

3.3 非法添加物檢測

三鹿奶粉事件發(fā)生以后，三聚氰胺便走入大眾視野，我國相關(guān)部門便對非法添加物進行了大力抽查并要求各大企業(yè)務(wù)必具備相應(yīng)檢測能力。除了會增加成本以外，儀器檢測也具備速度較為緩慢的缺陷，無法與檢測要求保持同步，在此情況下誕生了三聚氰胺膠體金檢測技術(shù)。當(dāng)前該技術(shù)已發(fā)展得極其成熟，檢測限可達0.05 mg/kg。

3.4 致病菌檢測

在各類食源性致病菌，沙門氏菌、大腸桿菌等病菌均是常見的病菌。邵晨東等以條帶狀將抗沙門氏菌O9抗原的特異性單克隆抗體4-7-7、羊抗鼠IgG，分別包被于硝酸纖維膜的檢測帶以及質(zhì)控帶上，采用膠體金對另一株單抗3-47-0進行標(biāo)記，并將之吸附于結(jié)合墊上以制備成沙門氏菌O9抗原試紙條。對沙門氏菌O9抗原而言，這一試紙條的檢測限為4×105CFU。目前，對于食品中存在的引發(fā)疾病的病菌，往往會在進行增菌的基礎(chǔ)上，進行分離、培養(yǎng)、生化鑒定進而對病菌進行檢測，這一方法不但會花費較長時間，操作復(fù)雜、流程繁瑣，并且極易受到主觀以及環(huán)境因素的影響而使檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性大打折扣，而GICA技術(shù)則能有效解決操作流程繁瑣、特異性以及靈敏度均較低的問題。

4 結(jié)語

相較于其他檢測技術(shù)，GICA技術(shù)不但操作簡便、可快捷檢測，并且可節(jié)省成本，降低了操作難度，也由此成為一項核心技術(shù)，被用于現(xiàn)場快速測定中，但該技術(shù)大都用于定性研究中，也導(dǎo)致這一技術(shù)的應(yīng)用大幅受限。在不久的將來，在科研人員的不懈努力下，GICA技術(shù)的定量檢測也必定為期不遠。