□ 董彥梓 煙臺市食品藥品檢驗檢測中心

如何保證食品安全已經(jīng)成為現(xiàn)階段社會持續(xù)健康發(fā)展道路上亟待解決的問題。調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，僅在2015年第三個季度一個季度中，在所有食物中毒的案例當(dāng)中，屬于微生物性食物中毒的人數(shù)就高達(dá)43%，其中又有四分之一是由于金黃色葡萄球菌引起的?？偠灾?，為了盡可能降低食品安全事件出現(xiàn)的概率，就要求相關(guān)人員切實關(guān)注到金黃色葡萄球菌定量檢測。本文立足于實際實驗操作，對金黃色葡萄球菌的主要檢測方法進(jìn)行比較研究，以期能對后期檢測工作起一定指導(dǎo)作用。

1 金黃色葡萄球菌概述

金黃色葡萄球菌隸屬葡萄球菌屬，是一種極為重要的病原菌，同時也是典型的革蘭氏陽性菌，易產(chǎn)生多種毒素及酶類，使得感染的人或動物出現(xiàn)化膿感染等癥狀，易引起食物中毒[1]。這種葡萄球菌對于營養(yǎng)的要求不高同時耐鹽性較高，肉類、水產(chǎn)品、乳品等常見食品極易受到這種病菌的感染。

2 定量檢測方法總述

隨著人們對生活質(zhì)量的要求越來越高，食品質(zhì)量和安全問題也得到越來越多的關(guān)注，金黃色葡萄球菌作為一種極為常見和危害較大的病原菌已經(jīng)被列為我國食品衛(wèi)生微生物常規(guī)檢測項目之一?，F(xiàn)階段對食品中的金黃色葡萄球菌的定量檢測常采用傳統(tǒng)的Baird-Parker法。由于這種檢測方法工序繁瑣，需要耗費一定人力物力，國內(nèi)外很多機(jī)構(gòu)嘗試研究新的檢測方法以有效縮短檢測方法、簡化檢測程序，美國3M公司的紙片法就是其中之一。而能夠快速檢測金黃色葡萄球菌的方法還有傾注法等。另外，還有基于分子生物學(xué)原理和免疫學(xué)原理的行之有效的檢測技術(shù)，而本文主要通過比較定量檢測方法以求能探索出真正適應(yīng)微生物實驗室要求的檢測方法，從而為今后的食品快速檢測打下堅實的理論基礎(chǔ)。

3 定量檢測方法比較

3.1 傳統(tǒng)檢測方法

通過比較涂布法、傾注法及紙片法對含一定濃度的金黃色葡萄球菌菌液的檢測效果，可以發(fā)現(xiàn)三種方法測出的結(jié)果沒有明顯的差別，具備一致性，但三者當(dāng)中紙片法測出的結(jié)果穩(wěn)定性最高、有較好的再現(xiàn)性，而傾注法和涂布法的檢測效果均略遜于紙片法[2]。在檢驗食品中金黃葡萄球菌時，紙片法能夠檢出較多該球菌，而涂布法和傾注法次于紙片法。比較三者的其他指標(biāo)時不難發(fā)現(xiàn)，紙片法與傾注法和涂布法相比，操作更加簡單、工作量更為合理、檢測時間較短、技術(shù)準(zhǔn)確性較高，但紙片法的試驗成本高于另兩種檢測方法，這就提高了推廣紙片法的難度。誠然，紙片法成本較高，但是在檢測結(jié)果上，這種快速檢測方法與傳統(tǒng)的Baird-Parker平板涂布法的檢測結(jié)果具有高度一致性，同時這種檢測技術(shù)具有明顯優(yōu)勢，具體表現(xiàn)為操作簡單、實驗工作量小，而這就使得紙片法具有較高的推廣意義。

3.2 基于免疫學(xué)的檢測方法

乳膠凝集法是在免疫學(xué)原理指導(dǎo)下的一種快速檢測方法，這種方法主要是利用乳膠顆粒對抗體進(jìn)行標(biāo)記，等到復(fù)合物與待測抗原結(jié)合后出現(xiàn)的凝集反應(yīng)較為明顯，便于檢測且操作簡便、具有較高水平的靈敏度和特異性，且商品化程度較好。而另一種基于免疫學(xué)的檢測技術(shù)——免疫磁性微球是通過磁性微球的特異性對致病菌進(jìn)行吸附，這種檢測法與其他檢測手段同時應(yīng)用能取得較好的快速檢測效果，借助免疫磁珠分離結(jié)合環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)檢測的方法，可以發(fā)現(xiàn)被金黃色葡萄球菌污染的200份奶樣中的檢測限為5.0 CFU/mL，且檢測結(jié)果與傳統(tǒng)檢測方法結(jié)果沒有明顯差異。另外，免疫層析也是基于免疫學(xué)原理的一種重要快速檢測方法，這種檢測方法使待測物在毛細(xì)作用中沿著纖維膜表面移動并且與已標(biāo)記區(qū)捕獲物進(jìn)行特異結(jié)合、聚集顯色從而對其進(jìn)行定性或定量，免疫層析試紙條就是在該檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上形成的，這種試紙條以酶、膠體金、乳膠顆粒和熒光量子點等探針為標(biāo)記，具有較高實際應(yīng)用價值。例如：在以膠體金作為探針作出的金葡萄球菌快速檢測卡進(jìn)行檢測的過程中，將其與ELISA檢測結(jié)果進(jìn)行比較可以發(fā)現(xiàn)這種試紙條的檢出率高達(dá)98.7%。

3.3 基于分子生物學(xué)的檢測方法

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)作為一種快速檢測技術(shù)具備敏感度好、特異性優(yōu)良、操作便利的優(yōu)點，這使得其在檢測金葡菌中獲得了較多應(yīng)用，其中在用PCR檢測牛奶中的金葡菌的實驗中，其檢測結(jié)果證明這種檢測方法的靈敏度和陽性檢測特異性已經(jīng)達(dá)到100%，充分保證了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的可信度。而借助聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對幾種食品中對金葡菌進(jìn)行檢測，能夠?qū)z測時間控制在24小時之內(nèi)，同時檢出限為10 CFU/g（mL）。

4 結(jié)語

快速檢測技術(shù)在實際應(yīng)用過程中具備各自的特點，在發(fā)展過程中，各種檢測技術(shù)勢必會不斷融合，不斷互相影響，從而使得檢測技術(shù)和方法朝著高速度、高質(zhì)量、高效率的方向發(fā)展，從而切實保證食品質(zhì)量和安全。