脈絡(luò)膜黑色素瘤屬于臨床一種較為常見的惡性腫瘤, 此類腫瘤細(xì)胞一旦進(jìn)行鞏膜侵犯或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，則患者預(yù)后不理想[1]。相關(guān)資料顯示[2，3]，脈絡(luò)膜黑色素瘤的發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜，涉及到基因變異等多種因素的影響。異粘蛋白(metadherin,MTDH)和跨膜蛋白16a (transmembrane protein16a,Tmem16a)自發(fā)現(xiàn)以來日益受到人們的關(guān)注及重視，其積極參與腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡等多種活動(dòng)，與腫瘤進(jìn)展密切相關(guān)[4]。研究證實(shí)[5-8]，MTDH、Tmem16a在胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤組織中可檢測到存在異常表達(dá)，但是在脈絡(luò)膜黑色素瘤中的表達(dá)情況國內(nèi)尚無資料顯示。本研究探討MTDH和Tmem16a在脈絡(luò)膜黑色素瘤中的表達(dá)及臨床意義，以期為臨床治療此類疾病提供有價(jià)值的參考。

資料與方法

一、一般資料

選擇25例(25只眼)確診的脈絡(luò)膜黑色素瘤術(shù)后組織為實(shí)驗(yàn)組， 另取瘤旁正常脈絡(luò)膜組織15例(15只眼)作為對(duì)照組。脈絡(luò)膜黑色素瘤25例中，男性13例，女性12例；年齡30～78歲，平均年齡(63.7±2.1)歲。所有標(biāo)本組織均經(jīng)病理檢查確診。

二、方法

采用免疫組化方法(SP法)測定兩組標(biāo)本組織中MTDH、Tmem16a蛋白表達(dá)水平，標(biāo)本組織經(jīng)石蠟包埋、切片之后，按照SP相關(guān)試劑盒上的說明書操作。采用已知顯色陽性的脈絡(luò)膜黑色素瘤切片作為陽性對(duì)照, 以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

三、結(jié)果判定

參考文獻(xiàn)[9]的方法判斷MTDH、Tmem16a的陽性表達(dá)結(jié)果。呈棕色著色為MTDH、Tmem16a陽性表達(dá)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)分析，采用t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Pearson 直線相關(guān)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、不同標(biāo)本組織 MTDH、Tmem16a 陽性表達(dá)情況比較

MTDH、Tmem16a蛋白表達(dá)產(chǎn)物均呈棕色，見圖1，2。實(shí)驗(yàn)組MTDH、Tmem16a陽性表達(dá)率分別為60%、52% ，均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見表1，2。

表1 不同標(biāo)本組織 MTDH陽性表達(dá)情況比較(例)

表2 不同標(biāo)本組織Tmem16a 陽性表達(dá)情況比較(例)

圖1 MTDH蛋白在不同標(biāo)本組織中的表達(dá)(200×)

圖2 Tmem16a蛋白在不同標(biāo)本組織中的表達(dá)(200×)

二、MTDH、Tmem16a蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系

MTDH、Tmem16a蛋白表達(dá)與脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤鞏膜浸潤程度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05);與年齡、性別、腫瘤大小無關(guān)(P>0.05),見表3。

表3 MTDH、Tmem16a蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系(n=25)

討 論

脈絡(luò)膜黑色素瘤屬于一種惡性程度高、容易血行轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差的眼內(nèi)惡性腫瘤。研究證實(shí)基因突變、發(fā)病年齡、腫瘤大小、鞏膜浸潤深度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等多種因素與脈絡(luò)膜黑色素瘤預(yù)后密切相關(guān)[10-12]。相關(guān)資料顯示[13，14]，MTDH 在乳腺癌、結(jié)直腸癌等多種腫瘤中存在異常表達(dá)，參與此類腫瘤的演進(jìn)。MTDH 基因能夠激活PI3K/Akt等多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，以改變?nèi)鏲-Myc等致癌基因的表達(dá)水平；進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞發(fā)生浸潤及新生血管的生成。

本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組MTDH陽性表達(dá)率為60% ，明顯高于對(duì)照組正常脈絡(luò)膜組織(P<0.05)，其表達(dá)與脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤鞏膜浸潤程度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05);與年齡、性別、腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)。提示其與脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤患者預(yù)后相關(guān)，可作為此類患者預(yù)后預(yù)測的評(píng)價(jià)指標(biāo)。原因可能是MTDH異常表達(dá)可以激活PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-2 等致癌基因的表達(dá)，促進(jìn)脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤組織浸潤及轉(zhuǎn)移。

新近發(fā)現(xiàn)的Tmem16a屬于一種新的鈣離子激活的跨膜氯離子通道家族成員，其在膀胱癌、肝癌及乳腺癌等一些惡性腫瘤中存在高表達(dá)[15]。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組Tmem16a陽性表達(dá)率為52% ，明顯高于對(duì)照組正常脈絡(luò)膜組織(P<0.05)。Tmem16a蛋白表達(dá)與脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤患者鞏膜浸潤程度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05);與年齡、性別、腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)?？梢酝茰yTmem16a在脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中具有一定的作用；鞏膜浸潤程度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力越強(qiáng)，Tmem16a表達(dá)越高。

綜上所述，MTDH、Tmem16a在脈絡(luò)膜黑色素瘤中呈高表達(dá)，且與鞏膜浸潤程度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，可能成為臨床診治脈絡(luò)膜黑色素瘤的重要指標(biāo)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 苑伏香, 張霆, 周占宇,等. 小干擾RNA沉默HIF-1α對(duì)缺氧狀態(tài)下脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞中MMP-2表達(dá)的影響. 國際眼科雜志, 2015,15:1139-1142.

[2] Mashayekhi A, Shields C L, Rishi P, et al. Primary transpupillary thermotherapy for choroidal melanoma in 391 cases:Importance of risk factors in tumor control. Ophthalmology, 2015,122:600-609.

[3] 何平, 靳忠民, 朱廣慶,等. 脈絡(luò)膜黑色素瘤CDFI檢查與腫瘤組織病理特征的關(guān)系. 臨床眼科雜志, 2017, 25:38-41.

[4] Caines R, Eleuteri A, Kalirai H, et al. Cluster analysis of multiplex ligation-dependent probe amplification data in choroidal melanoma.Molecular Vision, 2015, 21:1-11.

[5] 張艷華, 姜支農(nóng). 左眼脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤術(shù)后10年肝臟、肺臟轉(zhuǎn)移1例. 浙江醫(yī)學(xué), 2016, 38:1376-1377.

[6] 許根貴, 陳吉婷, 徐建鋒. PET-CT漏診脈絡(luò)膜惡性黑色素瘤一例. 臨床誤診誤治, 2015,30:76-77.

[7] Konstantinidis L, Roberts D, Errington R D, et al. Transpalpebral proton beam radiotherapy of choroidal melanoma. Br J Ophthalmol,2015,99:232-235.

[8] Abrams M J, Gagne N L, Melhus C S, et al. Brachytherapy vs. external beam radiotherapy for choroidal melanoma: Survival and patterns-of-care analyses.. Brachytherapy, 2016, 15:216-223.

[9] 童萌, 原慧萍, 張?jiān)婄?等. RegⅣ在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其與血管新生的相關(guān)性分析. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2017, 17:88-92.

[10] Sharma R S, Shah P K, Narendran V. Poor uptake of fluorodeoxyglucose in positron emission tomography-computed tomography scan for intraocular choroidal melanoma in Asian Indian eyes. World Journal of Nuclear Medicine, 2015, 15:53-55.

[11] 陳偉, 楊文利, 李棟軍,等. 超聲彈性成像對(duì)眼內(nèi)腫瘤的鑒別診斷價(jià)值.腫瘤影像學(xué), 2016, 25:303-307.

[12] 郭佩琦, 馬剛. 超聲造影在眼球內(nèi)腫瘤診斷中的價(jià)值. 國際眼科雜志, 2016, 16:1386-1388.

[13] Coupland E S, Kalirai H, Ho V, et al. Concordant chromosome 3 results in paired choroidal melanoma biopsies and subsequent tumour resection specimens.Br J Ophthalmol,2015,99:1444-1450.

[14] 李超, 宋振川, 王新樂,等. 異黏蛋白在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá). 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志, 2013, 30:62-63.

[15] 陳曦, 孫海斌. 組織蛋白酶D、Tmem 16a和乳腺腫瘤激酶在結(jié)腸癌中的表達(dá)及意義. 中國老年學(xué), 2014, 34:1984-1985.