竇艷斌，趙艷萍

林甸縣中醫(yī)院耳鼻喉科，黑龍江林甸 166300

在中國每年約有3萬例先天性耳聾嬰兒出生。耳聾與遺傳、環(huán)境等因素密切相關(guān)，遺傳性耳聾主要通過常染色體隱性、常染色體顯性、性連鎖、線粒體遺傳?；仡櫡治?015年3月—2016年3月該院收治的124例SLC26A4基因突變致聾患者基因芯片測(cè)序分析結(jié)果，以及SLC26A4基因突變致聾患者的臨床表現(xiàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年3月—2016年3月于該院確診的124例SLC26A4基因突變致聾患者的基本臨床資料，入組病例年齡分布范圍在6個(gè)月～14歲，平均年齡（6.7±1.2）歲?？紤]到病例選取不當(dāng)可能影響研究結(jié)果，納選前特意將有耳聾家族史、單側(cè)耳聾、氨基糖苷類抗生素使用史、身體其它癥狀提示綜合征性耳聾的病例排除在外。

1.2 方法

1.2.1 DNA提取法 使用北京天根生化科技有限公司提供的試劑盒自受檢者3 mL外周血中提取全血DNA，按照試劑盒說明書中提供的方法規(guī)范操作。使用紫外線光光度計(jì)檢測(cè)留置的2 uL DNA濃度與純度，于-20℃環(huán)境中保留剩余DNA。

1.2.2 耳聾基因芯片檢測(cè) GJB2、SLC24A4、線粒體12S、GJB3、rRNA 4個(gè)耳聾相關(guān)基因的9例致聾突變位點(diǎn)檢測(cè)使用博奧生物有限公司提供的耳聾基因芯片進(jìn)行檢測(cè)。GJB2基因所需檢測(cè)的位點(diǎn)包括：35、176、235、299，SLC26A4 基因所需檢測(cè)的位點(diǎn)包括：2168、IVS7-2，線粒體12SrRNA檢測(cè)的點(diǎn)包括：1494、1555，GJB3基因檢測(cè)538位點(diǎn)[1]。

1.2.3 SLC26A4基因測(cè)序分析 22例攜帶SCL264A突變基因致聾患者與對(duì)照組76例聽力正常者均進(jìn)行SLC26A4基因編碼序列與相鄰剪切部位PCR擴(kuò)增和PCR產(chǎn)物序列分析。以ENSG0000OO91137作為SCL264A基因參考序列，PCR擴(kuò)增引物也是測(cè)序引物，參考已發(fā)表論文中所用PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件與方法進(jìn)行基因測(cè)序分析。

1.2.4 聽力檢測(cè)方法 對(duì)于年齡較大且配合度良好者實(shí)施純音聽力測(cè)試，年齡小且無法配合者進(jìn)行聽性腦干反應(yīng)檢測(cè)。純音氣導(dǎo)聽閥取0.5、1、2、4 MHz 4個(gè)頻率均值，聽力障礙程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：較好耳聽力損失低于20 dB代表正常；較好耳聽力損失范圍在21～40 dB代表輕度聽力障礙；較好耳聽力損失范圍在41～70 dB代表中度聽力障礙；較好耳聽力損失范圍在71～90 dB代表重度聽力障礙[2]。以美國言語語言聽力協(xié)會(huì)定義作為聽力波動(dòng)的認(rèn)定參考。

2 結(jié)果

2.1 檢查結(jié)果分析

該組124例SCL26A4基因突變致耳聾患者中42.7%（53/124）的患者經(jīng)耳聾基因芯片篩查確認(rèn)攜帶遺傳性耳聾相關(guān)基因突變。30例攜帶GJB2基因突變，21例純和或復(fù)合雜合突變，9例雜合突變。22例攜帶SCL26A4基因突變，8例純和復(fù)合雜合突變，14例雜合突變。攜帶線粒體12SrRNA基因突變與GJB3基因突變的各1例。71例未發(fā)現(xiàn)基因突變。

2.2 SCL26A4基因基因測(cè)序與臨床表現(xiàn)分析

芯片篩查檢出的22例SCL26A4基因突變攜帶者基因型、聽力損失程度、CT檢查結(jié)果、聽力波動(dòng)情況見表1。

3 討論

耳聾是一種多病因疾病，遺傳、外傷、感染、噪聲、內(nèi)耳發(fā)育異常均是致病因素。分子生物學(xué)與基因檢測(cè)技術(shù)在近年來取得的新進(jìn)展大大提高了遺傳性耳聾診斷率。臨床上依據(jù)患者身體有無合并其它癥狀表現(xiàn)而將耳聾分為綜合征性與非綜合征象耳聾兩種，遺傳性耳聾中絕大多數(shù)為非綜合征性耳聾[3]。

前庭水管擴(kuò)大是進(jìn)行性耳聾發(fā)生的一個(gè)重要病因，分子病理學(xué)機(jī)制為第7號(hào)常染色體上SLC26A4基因突變。該文SLC264A基因突變患者占17.7%，GJB2基因突變患者占24.2%。SCL26A4基因突變除導(dǎo)致耳聾外還會(huì)誘發(fā)Pendred綜合征，但約60%的患者身上才會(huì)有甲狀腺腫表現(xiàn)，并且這種表現(xiàn)通常要到10～29歲時(shí)才會(huì)顯現(xiàn)出來。

該文經(jīng)基因芯片檢測(cè)檢出的22例SCL26A4基因突變患者中有學(xué)齡前兒童13例，這13例患兒中8例患兒選擇了康復(fù)中心，其余5名患兒選擇了幼兒園或家庭作為康復(fù)主要場(chǎng)所。因此建議SLC26A4基因突變致聾確診患者早期康復(fù)宜選擇康復(fù)中心。13例學(xué)齡兒童中進(jìn)入普通小學(xué)的有11例，進(jìn)入聾啞學(xué)校的有2例。由此提示選擇康復(fù)中心作為早期康復(fù)場(chǎng)所能獲得較好的中期效果，多數(shù)選擇在康復(fù)中心接受早期康復(fù)干預(yù)治療的患兒大多數(shù)都能進(jìn)入普通小學(xué)隨班就讀。

表1 22例SCL26A4基因突變攜帶患者基因型與表現(xiàn)型分析結(jié)果

[1]戴林桐,卿麗華,孫丹洋,等.四川攀枝花地區(qū)非綜合征性耳聾患者常見耳聾基因突變分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2016,24(1):21-23.

[2]周永安,李嬌,王湘,等.陽泉地區(qū)非綜合征性耳聾患者常見耳聾基因突變的分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2014,22(12):102-113.

[3]要跟東,李守霞,張小芳,等.河北邯鄲地區(qū)非綜合征性耳聾患者GJB2基因突變分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(5):524-529.

[4]李朔,趙煒,歐陽奇琦.青島地區(qū)270例非綜合征性耳聾患者耳聾相關(guān)基因突變分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2014,22(10):106-107.

[5]賈婧杰,袁永一,戴樸,等.山東省濱州市特教學(xué)校耳聾學(xué)生分子病因?qū)W分析——GJB2 235delC突變、線粒體DNA 12S rRNA A1555G突變和SLC26A4ⅣS7-2A＞G突變篩查報(bào)告[J].中華耳科學(xué)雜志,2010,8(4)：407-410.