張永強(qiáng) 任 海 郝文波 潘冠龍 張星焱

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院胸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

浸潤性肺腺癌中Aurora-A和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)

張永強(qiáng) 任 海 郝文波 潘冠龍 張星焱

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院胸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

目的應(yīng)用免疫組化SP法檢測浸潤性肺腺癌中Aurora-A激酶(Aurora-A)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9的表達(dá)特征，分析二者在不同臨床病理特征中的表達(dá)意義。方法確診為浸潤性肺腺癌51例為觀察組，確診為原位腺癌21例為對照組，收集距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性的肺組織20例為正常對照組，均留取術(shù)后蠟塊組織，應(yīng)用免疫組化SP法檢測3組Aurora-A和MMP-9表達(dá)，分析其在不同臨床病理特征中的差別。結(jié)果3組Aurora-A和MMP-9表達(dá)陽性率差異顯著(P<0.01)。觀察組Aurora-A和MMP-9表達(dá)陽性率與腫瘤脈管累犯和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Aurora-A表達(dá)陽性率與腫瘤增殖指數(shù)和最大徑密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組Aurora-A和MMP-9表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論Aurora-A和MMP-9在浸潤性肺腺癌中的表達(dá)升高是促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展的重要因素。Aurora-A和MMP-9具有一定正向協(xié)同作用。

肺腺癌；Aurora-A激酶；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；免疫組化

肺腺癌病變形成具有腺瘤樣增生-原位腺癌-微浸潤性腺癌-浸潤性腺癌的趨勢性變化。在浸潤性腺癌形成后，與腫瘤生成相關(guān)的癌基因和轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因有明顯變化，這對病變的形成和發(fā)展有明顯促進(jìn)作用〔1,2〕。Aurora-A激酶(Aurora-A)是新發(fā)現(xiàn)的與細(xì)胞有絲分裂密切相關(guān)的基因，是調(diào)節(jié)中心體、微管功能的絲/蘇氨酸激酶，可以引起中心體擴(kuò)增、染色體不穩(wěn)定及非整倍體形成。Aurora-A高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，也可能對轉(zhuǎn)移有一定的調(diào)節(jié)作用〔3,4〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是MMPs家族中的重要成員，高表達(dá)時(shí)可以引起細(xì)胞外基質(zhì)的降解，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移〔5,6〕。本文關(guān)注Aurora-A和MMP-9在浸潤性肺腺癌中的表達(dá)特征，探討二者在不同臨床病理特征中的表達(dá)差異及相關(guān)性，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2012年1月至2015年12月齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院確診浸潤性肺腺癌51例作為觀察組，留取術(shù)后的蠟塊組織，并經(jīng)病理醫(yī)師再次閱片確認(rèn)，納入均符合肺腺癌國際多學(xué)科分類中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男28例，女23例，年齡35～87歲，平均57.3歲。同期確診為原位腺癌21例作為對照組，其中男11例，女10例，年齡38～80歲，平均59.2歲。距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性的肺組織20例為正常對照組，其中男10例，女10例，年齡40～81歲，平均56.8歲。3組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2Aurora-A和MMP-9表達(dá)檢測 術(shù)后組織均應(yīng)用甲醛溶液固定>12 h后常規(guī)取材，均由病理醫(yī)師完成，脫水、石蠟包埋、切片，應(yīng)用免疫組化SP法檢測Aurora-A和MMP-9表達(dá)、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均按說明書進(jìn)行，做好質(zhì)控工作。

1.3Aurora-A和MMP-9的判讀 Aurora-A和MMP-9表達(dá)的陽性部位是細(xì)胞質(zhì)，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。選擇陽性染色集中的上皮細(xì)胞分布區(qū)域的3個(gè)400倍視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值，最終結(jié)果以陽性率<10%定為陰性，≥10%定為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.13組Aurora-A和MMP-9陽性表達(dá)的比較 正常對照組、對照組和觀察組中Aurora-A和MMP-9的表達(dá)有增高趨勢(P<0.01)。見表1。

2.2Aurora-A和MMP-9在觀察組不同臨床病理特征中的比較 觀察組中Aurora-A和MMP-9表達(dá)陽性率與腫瘤脈管累犯和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Aurora-A表達(dá)陽性率與腫瘤最大徑和增殖指數(shù)密切相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3觀察組中Aurora-A和MMP-9的相關(guān)性 Aurora-A和MMP-9呈正相關(guān)(r=0.41，P=0.030 1)。

表1 3組Aurora-A和MMP-9陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

表2 Aurora-A和MMP-9在觀察組不同臨床病理特征中陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

3 討 論

肺腺癌發(fā)生常常是周圍型，很少發(fā)生于中央，很少有空洞，其病理特征是具有腺樣分化或有黏液產(chǎn)生的癌，表現(xiàn)為腺泡樣、乳頭樣、細(xì)支氣管肺泡樣〔7〕。病變進(jìn)展中相關(guān)基因和表達(dá)蛋白有明顯變化。Aurora-A基因定位于20q13.2上，由403個(gè)氨基酸排列組成，其一級結(jié)構(gòu)含兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，催化區(qū)氨基酸序列高度保守，內(nèi)有活化環(huán)，降解框，參與調(diào)節(jié)激酶活性及激酶的降解〔8〕。Aurora-A激酶的活性受抑制會引起單極紡錘體形成，使染色體不能正確分離〔9〕。Aurora-A過高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤形成，并繼發(fā)腫瘤性病變的進(jìn)展〔10〕。Aurora-A高表達(dá)不僅是通過基因的擴(kuò)增進(jìn)行調(diào)控，還可能是轉(zhuǎn)錄過程激活、蛋白分解阻滯等。Aurora-A還可能通過使底物發(fā)生磷酸化發(fā)揮調(diào)節(jié)機(jī)制，這些底物包括轉(zhuǎn)錄相關(guān)酸性卷曲蛋白(TACC)、xklp2靶蛋白(TPX)2、蛋白磷酸酶(PP)1和Ajuba基因等〔11〕。Aurora-A與這些底物間均有相互調(diào)控作用，如PP1可以去磷酸化Aurora-A，引起Aurora-A的活性降低；Ajuba可以激活A(yù)juba-A，對于細(xì)胞有絲分裂G2/M期轉(zhuǎn)換是必需的，保證細(xì)胞進(jìn)入正常的有絲分裂期。而MMP-9轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白，是MMPs家族中的重要成員，其可以由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，尤其是惡性程度高的腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的量可能更多〔12〕。MMP-9在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)部位是細(xì)胞質(zhì)，可以對細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜進(jìn)行有效的溶解，使腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障明顯破壞，引發(fā)腫瘤細(xì)胞離開原發(fā)灶，形成轉(zhuǎn)移灶〔13,14〕。

本研究提示Aurora-A和MMP-9在上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的病變形成中具有明顯的促進(jìn)作用。二者的作用與癌基因相似。Aurora-A和MMP-9高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的脈管侵犯，對腫瘤細(xì)胞進(jìn)入脈管起一定的促進(jìn)作用，此時(shí)腫瘤細(xì)胞隨著血液和淋巴液的流動，易于使腫瘤細(xì)胞在其他部位進(jìn)行定植。本文提示Aurora-A高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增生和繁殖，使腫瘤細(xì)胞生長活躍，腫瘤細(xì)胞的數(shù)量明顯增多，體積增大，腫瘤的惡性進(jìn)展明顯。本文提示Aurora-A和MMP-9二者具有正向協(xié)同作用。王曉霞等〔15〕對食管癌細(xì)胞中Aurora-A和MMP-9的表達(dá)進(jìn)行研究，建立了Aurora-A高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系，且Aurora-A高表達(dá)能增加食管癌細(xì)胞的體外侵襲能力，也提高了MMP-9的蛋白表達(dá)水平和活性，這對促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲有重要價(jià)值，這與本研究的結(jié)果相一致。MMP-9無論原發(fā)性增多還是繼發(fā)性增多，均可以使腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移屏障破壞，腫瘤細(xì)胞易于侵襲周圍組織和鄰近臟器〔16,17〕，同時(shí)對腫瘤的脈管播散提供了重要的前提條件〔18〕。

綜上，Aurora-A和MMP-9在浸潤性肺腺癌中的表達(dá)升高是促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展的重要因素。Aurora-A和MMP-9具有一定的正向協(xié)同作用，共同促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。

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R73

A

1005-9202(2017)24-6107-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.24.044

齊齊哈爾市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(SF2D-2012067)

張永強(qiáng)(1978-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事胸外科常見病研究。

〔2016-07-15修回〕

(編輯 苑云杰)