陳海云 何超明

血清ox-LDL、Lp-PLA2水平與缺血性腦卒中患者動脈粥樣硬化及神經功能缺損的相關性研究

陳海云 何超明

目的探討缺血性腦卒中患者血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平與頸動脈粥樣硬化及神經功能缺損的相關性。方法選取2015年7月～2016年7月本院神經內科收治的急性腦梗死患者135例(ACI組)和同期本院體檢中心健康人群150例(對照組)，均對所有入選者血清中的ox-LDL、Lp-PLA2水平進行檢測，比較ACI組和對照組的血清ox-LDL、Lp-PLA2及其他血脂指標水平；行頸動脈超聲檢查，對無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組患者的ox-LDL、Lp-PLA2水平進行比較； 按美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分，對輕型、中型、重型患者的ox-LDL、Lp-PLA2水平進行比較。結果ACI組的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平均高于對照組(P<0.01)；穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平顯著高于無斑塊組(P<0.05)；不穩(wěn)定斑塊組血清ox-LDL、Lp-PLA2 水平顯著高于穩(wěn)定斑塊組(P<0.05)；NIHSS評分中型組、重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平均顯著高于輕型組(P<0.05)，重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平顯著高于中型組(P<0.05)。結論缺血性腦卒中患者血清ox-LDL、Lp-PLA2水平較正常者顯著上升，其在一定程度上反映患者頸動脈粥樣硬化的程度及神經功能缺損的程度，ox-LDL、Lp-PLA2 可作為急性缺血性腦血管病的血清標記物，在評估急性缺血性腦血管病的病情及預后方面有一定的臨床意義。

氧化低密度脂蛋白 脂蛋白相關磷脂酶A2 缺血性腦卒中 相關性

在我國腦血管疾病是常見的致死病因之一。由于其發(fā)病大多很突然，所以也稱為腦血管意外或腦卒中。腦卒中的致殘率和病死率都較高，嚴重影響患者的生活質量和生命健康[1]。臨床上腦卒中分為出血性和缺血性兩大類，其中缺血性腦卒中占70%～80%。目前已證實，動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)在缺血性腦卒中的病理過程中發(fā)揮了關鍵作用。研究表明氧化低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein，ox-LDL)可通過損傷動脈的內皮細胞，促使脂質沉積于內皮細胞下，誘導單核細胞衍生為巨噬細胞，最后轉變?yōu)榕菽毎瑢е聞用}粥樣硬化；脂蛋白相關磷脂酶A2(Lipoprotein-associated phospho lipase A2,LP-PLA2)參與了動脈粥樣硬化斑塊形成的所有階段，作為炎癥標志物LP-PLA2在巨噬細胞、凋亡的巨噬細胞、壞死組織的中心以及易損和破裂的粥樣斑塊內都有高度的表達[2]。因此，可以假設血清中的ox-LDL和LP-PLA2是缺血性腦卒中的高危預測因子[3-4]。本研究擬通過對缺血性腦卒中患者血清的ox-LDL、Lp-PLA2水平進行檢測，以探討ox-LDL、Lp-PLA2水平與頸動脈內-中膜厚度(IMT) 和NIHSS評分的相關性，為血清ox-LDL、Lp-PLA2 能否作為缺血性腦卒中患者病情及預后評估的一項臨床指標提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年7月～2016年7月本院神經內科收治的135例急性腦梗死(ACI)患者,其中男87例，女48例，年齡49 ～76歲，平均年齡(56.49±2.26)歲。另外，選取同期本院體檢中心健康人群150例為對照組，其中男102例，女48例，年齡48～78歲，平均年齡(59.23±2.45)歲。2組性別、年齡、既往病史、不良嗜好等一般資料比較均無明顯差異(P>0.05)。

納入標準： ACI組的所有患者病程均在72 h以內，符合1995年全國第四屆腦血管病學術會議制定的《腦血管病診斷標準》中急性腦梗死的診斷標準[5]，并經過顱腦 CT 或MRI確診。

排除標準：腦出血及腦梗死后出血；無癥狀性腦梗死、其他原因不明的腦梗死、腔隙性腦梗死以及感染性心內膜炎、心房纖顫、空氣、脂肪及癌細胞栓塞及動脈‐動脈栓塞等；嚴重的自身免疫性疾病及其所致的腦血管疾病以及嚴重的感染性疾病；血管先天發(fā)育異常所導致的腦血管疾?。貉芑位騽用}瘤等；嚴重的心、肝、腎、血液系統(tǒng)疾??；同時合并有急性冠脈綜合征或周圍血管性疾??；臨床及生化檢查資料不完整者。

入院后按照美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS評分)進行神經功能缺損程度分型[6]，ACI組中的所有患者被確認為輕型(<4分)51例，中型(4～15分)47例，重型(>15分)37例；行頸動脈超聲檢查后確定頸動脈內-中膜厚度(IMT)無斑塊者43例，有斑塊者92例(穩(wěn)定斑塊組43例，不穩(wěn)定斑塊組49例)。

本研究經過患者及家屬知情同意，醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 頸動脈超聲檢查

ACI組所有患者均接受頸動脈超聲檢查。所用儀器為飛利浦IU22型彩色多普勒超聲顯像儀，探頭頻率7.5 Hz。頸動脈內-中膜厚度(IMT)是指頸動脈內膜管腔面與外膜分界面之間的距離，IMT<1.2 mm為無斑塊，IMT≥1.2 mm為有斑塊。與周圍組織相比，強回聲、表面光滑者為穩(wěn)定斑塊；低回聲或兩種回聲同時存在、表面粗糙者為不穩(wěn)定斑塊[7]。

1.3 血清ox-LDL、Lp-PLA2和血脂水平的檢測

ACI組和對照組所有人員均抽取晨起空腹肘靜脈血作為標本，分離血清后凍存于-80 ℃。ox-LDL試劑盒由美國Rapidbio公司生產并提供，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清ox-LDL水平，操作流程嚴格按照說明書步驟。

Lp-PLA2試劑盒由天津康爾克生物科技有限公司生產并提供，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 檢測血清Lp-PLA2水平，操作流程嚴格按照說明書步驟。

TC、TG、LDL-C、HDL-C、D-D等實驗試劑由日本和光純藥工業(yè)株式會社生產并提供，使用的檢測儀器為日立7600系列全自動生化分析儀。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 ACI組和對照組的血清ox-LDL、Lp-PLA2及血脂指標(TC、TG、LDL-C、HDL-C、D-D)水平的比較

ACI組的血清ox-LDL、Lp-PLA2、TG、LDL-C、D-D水平均高于對照組(P<0.01)，而TC、HDL-C水平與對照組比較無明顯差異(P>0.05)(表1)。

2.2 3組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平比較

頸動脈無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平比較均有明顯差異(P<0.05)；穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平顯著高于無斑塊組(P<0.05)；不穩(wěn)定斑塊組血清ox-LDL、Lp-PLA2 水平顯著高于穩(wěn)定斑塊組(P<0.05)(表2)。

2.3 3組的ox-LDL、Lp-PLA2水平比較

NIHSS評分輕型組、中型組、重型組的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平比較均有明顯差異(P<0.05)；中型組、重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平均顯著高于輕型組(P<0.05)；重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平顯著高于中型組(P<0.05)(表3)。

3 討 論

在正常狀態(tài)下機體內有天然的內源性抗氧化物，血液中的LDL不會被氧化；一旦血管壁發(fā)生創(chuàng)傷，血管內皮細胞的通透性就會增加，并釋放大量的氧自由基，使LDL在向內皮下聚集的過程中被氧化修飾成為ox-LDL，并聚集在內皮下[8-9]。ox-LDL激活內皮細胞、樹突細胞、巨噬細胞、平滑肌細胞等多種血管壁細胞后產生一系列的炎癥和應激反應，參與急性缺血性腦血管病過程的形成[10]。具體機制如下：(1)血管內皮細胞、巨噬細胞以更快的速度吞噬ox-LDL，加速泡沫細胞的形成；(2)ox-LDL促使單核細胞衍生為巨噬細胞，抑制巨噬細胞游離；(3)ox-LDL促使上皮細胞脫落，加速內皮病變；(4)在ox-LDL作用下內皮細胞釋放出多種細胞因子如腫瘤壞死因子(TNF)、白細胞介素(IL)等，導致血管斑塊破裂與血栓形成；(5)ox-LDL刺激組織因子、血小板衍生生長因子以及促凝因子的生成，加快血小板黏附、聚集及血栓的形成[11]。由此，ox-LDL參與了缺血性腦卒中的病理過程。本研究結果顯示，ACI組患者的血清ox-LDL水平明顯高于對照組，也證實了上述觀點。

Lp-PLA2是一種絲氨酸脂酶，分子量45400，由441個氨基酸殘基組成，屬于磷脂酶A2超家族中的一員，是非鈣離子依賴性的活性磷脂酶。Lp-PLA2在成熟的巨噬細胞和淋巴細胞中合成并分泌，其活性成分由絲氨酸、組氨酸和天冬氨酸組成。血漿的Lp-PLA2大多與脂蛋白顆粒相結合，其中1/3與HDL、VLDL結合，2/3與LDL結合[12]。有報道指出，炎癥反應在缺血性腦卒中的病理過程中起到了關鍵作用[13]。Lp-PLA2水解ox-LDL后產生兩種炎性介質，分別是氧化型游離脂肪酸和溶血卵磷脂[14]，這兩種介質可以誘發(fā)粘附因子(adhesion molecules,AMs)和細胞因子(cytokines,CKs)的生成，促進單核細胞轉化為巨噬細胞，巨噬細胞進一步轉化為泡沫細胞，泡沫細胞凋亡后聚集成動脈粥樣硬化性斑塊，斑塊釋放出細胞因子和蛋白酶，降解纖維帽的平滑肌細胞和膠原基質，脆弱的斑塊破裂后導致血栓形成和缺血性腦卒中事件的發(fā)生[15]。本研究結果顯示，缺血性腦卒中患者的血漿Lp-PLA2水平顯著高于對照組，也證明Lp-PLA2參與了缺血性腦卒中的病理過程。

表1 ACI組和對照組的血清ox-LDL、Lp-PLA2及相關生化指標水平的比較

注：與對照組比較，*P<0.01

表2 3組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平比較

注：與無斑塊組比較，△P<0.05；與穩(wěn)定斑塊組比較，*P<0.05

表3 3組的ox-LDL、Lp-PLA2水平比較

注：與輕型組比較，△P<0.05；與中型組比較，*P<0.05

本研究在對比頸動脈無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組患者的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平后發(fā)現(xiàn)，3組之間存在顯著性差異，即穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平均明顯高于無斑塊組，不穩(wěn)定斑塊組的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平明顯高于穩(wěn)定斑塊組。這說明血清ox-LDL、Lp-PLA2水平可能與頸動脈粥樣硬化的進展和斑塊破裂有關，在一定程度上能夠反映局部病變的嚴重程度。結合臨床，檢測ox-LDL、Lp-PLA2水平可以預測缺血性腦卒中患者的病情和預后。

此外，NIHSS分級輕型組、中型組、重型組患者的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平也存在著顯著性差異，中型組、重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平均明顯高于輕型組，重型組血清ox-LDL、Lp-PLA2水平明顯高于中型組。這說明血清ox-LDL、Lp-PLA2水平與腦梗死的體積及嚴重程度有關，即血清中ox-LDL、Lp-PLA2的水平越高，患者的NIHSS評分就越高，神經功能缺損的程度就越嚴重。

綜上所述，缺血性腦卒中患者的血清ox-LDL、Lp-PLA2水平較正常者顯著升高，在一定程度上反映了頸動脈粥樣硬化和神經功能缺損的程度。ox-LDL、Lp-PLA2 作為血清標記物在評估急性缺血性腦血管病的病情及預后方面有一定的臨床意義。

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Associationofserumox-LDLandLp-PLA2levelswithatherosclerosisandneurologicaldeficitsinpatientswithischemicstroke

ChenHaiyun,HeChaoming.

DepartmentofNeurology，TheThirdPeople'sHospitalofHainan,Sanya572000

ObjectiveTo investigate the correlation between in the low density lipoprotein (ox-LDL),lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) and carotid atherosclerosis, the neurological deficits in patients with acute ischemic stroke.Methods135 patients (ACI group)with acute cerebral infarction were treated in neurology department and 150 cases (control group)of healthy population at the center of physical examination were collected from July 2015 to July 2016, the ox-LDL and the Lp-PLA2 and other blood lipids were tested and compared between the ACI group and control group.In the mean time, all selected cases were divided into the nonplque group,the stable plaques group and unstable plaques group according to carotid artery ultrasonography, the ox-LDL and the Lp-PLA2 and other blood lipids were tested and compared among the nonplque group,the stable plaques group and unstable plaques group. all selected cases were divided into the moderate group,the minor group and severe group according to the NIHSS, the ox-LDL and the Lp-PLA2 and other blood lipids were tested and compared among the moderate group,the minor group and severe group.ResultsThe serum ox-LDL and Lp-PLA2 levels in ACI group were higher than those in the control group (P<0.01); the serum ox-LDL, Lp-PLA2 levels were significantly higher in the nonplque group,the stable plaques group than those in theunstable plaques group (P<0.05), the serum ox-LDL, Lp-PLA2 levels were significantly higher in the unstable plaques group than those in the stable plaque group (P<0.05), the serum ox-LDL and Lp-PLA2 levels were significantly higher in the moderate group, severe group than that in the minor group (P<0.05), the serum ox-LDL and Lp-PLA2 levels in the severe group were significantly higher than that in the moderate group (P<0.05).ConclusionIn patients with ischemic stroke, the serum ox-LDL and Lp-PLA2 levels were considerably higher, and it reflected the degree of carotid atherosclerosis and the degree of neurological deficit. the serum ox-LDL and Lp-PLA2 levels could be acted as the serum markers of acute ischemic cerebrovascular disease, and it had the clinical significance in assessing the condition and prognosis of acute ischemic cerebrovascular disease.

Oxidized low density lipoprotein Lipoprotein associated phospholipase A2 Ischemic stroke Correlation study

R743.32

A

1007-0478(2017)06-0504-04

10.3969/j.issn.1007-0478.2017.06.006

572000 三亞市，海南省第三人民醫(yī)院神經內科

(2017-02-22收稿)