楊京京 包 潔 錢 穎 方澤鋒 肖廷楓 范永升 竇曉兵 夏永良

(1 浙江中醫(yī)藥大學(xué)，杭州，310053； 2 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，杭州，310006)

自制白及涂擦劑對上火模型
——豚鼠口腔潰瘍模型的影響

楊京京1包 潔1錢 穎1方澤鋒1肖廷楓1范永升1竇曉兵1夏永良2

(1 浙江中醫(yī)藥大學(xué)，杭州，310053； 2 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，杭州，310006)

目的：觀察自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍上火模型的影響。方法：采用30%冰醋酸溶液灼燒豚鼠右面頰黏膜建立口腔潰瘍上火模型[1]，將建模成功后的25只豚鼠分為對照組和西藥觀察組、中藥觀察組(中藥A組、中藥B組、中藥C組)，每組5只豚鼠，共5組，自制白及涂擦劑由白及粉、白蘞粉和絲瓜絡(luò)濃煎劑組成。將涂擦劑涂在豚鼠口腔潰瘍處，中藥A組涂藥1次/d、中藥B組涂藥2次/d、中藥C組涂藥3次/d；西藥組涂金霉素眼膏2次/d，連續(xù)涂藥5 d，對照組不給藥；另設(shè)空白對照組豚鼠5只，涂自制白及涂擦劑，1次/d。觀察不同劑量自制白及涂擦劑外用對豚鼠口腔潰瘍模型潰瘍面積變化、潰瘍程度及潰瘍局部病理組織學(xué)變化的影響。結(jié)果：用30%冰醋酸溶液造豚鼠口腔潰瘍上火模型成功，與空白對照組比較，對照組口腔潰瘍明顯，且面積大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，自制白及涂擦劑可顯著減小口腔潰瘍面積，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，顯著減輕局部病理變化和口腔潰瘍水腫程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.05)，且隨著涂擦次數(shù)增多而依次減少。結(jié)論：自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍上火模型有較好的治療作用。

白及；白蘞；絲瓜絡(luò)；口腔潰瘍模型。

口腔潰瘍是一種常見的發(fā)生于口腔黏膜局限性潰瘍性損傷病癥，好發(fā)于唇、舌、頰、軟腭等角化程度較差的部位，發(fā)病率高，具有復(fù)發(fā)性，周期性，自限性等特點(diǎn)[2]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，現(xiàn)代人因喜食辛辣燒烤，飲食不節(jié)、思慮過度、熬夜等，上火是其最為常見的癥狀，而口腔潰瘍的發(fā)生又大多由上火引起[3]。口腔潰瘍發(fā)作時(shí)疼痛劇烈，局部灼痛明顯，嚴(yán)重者還會影響飲食、說話，對日常生活造成極大困擾，甚則可并發(fā)口臭、慢性咽炎、便秘、頭痛、頭暈、惡心、乏力、煩躁、發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大等全身癥狀[4]。目前西醫(yī)治療包括激光、物理屏障、抗菌藥物、皮質(zhì)類固醇、止疼藥物、抗炎藥物，維生素B和C聯(lián)合用藥等。中醫(yī)治療以辨證為基礎(chǔ)，治療手段多以外用和內(nèi)服為主，外用涂擦劑大多含有硼砂、兒茶、青黛、乳香、沒藥、冰片等具有活血消腫的藥物，但活血易傷正，不慎吞服寒冷傷胃[5-8]。為了減輕口腔潰瘍帶來的生活困擾，本實(shí)驗(yàn)依據(jù)急則治標(biāo)的治療原則，采用病位處涂擦外治的治療方法，適用于上火或其他病因引起的口腔潰瘍，具有普遍性，且具有無毒性、價(jià)格低廉、操作簡單可行等優(yōu)點(diǎn)。

國家級名中醫(yī)徐志瑛臨床擅用三白湯治療口腔潰瘍，三白湯由白及，白蘞，白芷3味藥組成。白及，入心、肝、脾經(jīng)，有清熱、解毒、散結(jié)、生肌、止血功效；白芷，入肺、脾、胃經(jīng)，有祛風(fēng)、燥濕、消腫、止痛功效；白蘞入肺經(jīng)，有補(bǔ)肺、止血、消腫、生肌、斂瘡功效。徐氏三白湯中白及的清熱止血、白芷的祛風(fēng)止痛、白蘞的解毒散結(jié)，全方苦中有辛，溫中有寒，具有清伏熱、散郁結(jié)、祛風(fēng)涼血、消腫止痛、生肌斂瘡的功效。臨床運(yùn)用廣泛，對于治療頑固性口腔潰瘍?nèi)〉昧撕芎玫寞熜9]。中藥白及具有收斂生肌、止血、消炎作用，主要化學(xué)成分是聯(lián)芐類、菲類及其衍生物，還含有少量揮發(fā)油、黏液質(zhì)、白及甘露聚糖等。大量文獻(xiàn)和專利中記載了白及散治療口腔潰瘍的良好功效。因其含有的白及膠質(zhì)，可在潰瘍表面形成一層膠狀保護(hù)膜，并刺激肉芽組織增生促進(jìn)潰瘍面的愈合[10-11]。同時(shí)白及有良好的成膜性，以白及作為基質(zhì)，可使其他藥物具有緩釋作用，對于治療口腔潰瘍有一舉多得的療效[12]。根據(jù)白及這一特性，山東中醫(yī)藥大學(xué)利用白及貼膜外用治療口腔潰瘍，在臨床運(yùn)用廣泛[13]。白蘞的主要化學(xué)成分是多酚類、蒽醌類等化學(xué)成分，主要活性為抗菌，可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖能力、巨噬細(xì)胞吞噬功能，可增強(qiáng)動物的免疫功能，這表明白蘞因此其外敷應(yīng)用于治療瘡瘍可能具有直接抗菌和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能雙重機(jī)制[14]。白蘞水煎劑對于瘡瘍有明顯的治愈作用，白蘞的斂瘡生肌功能可能會促進(jìn)動物皮膚在創(chuàng)面愈合早、中期創(chuàng)面EGF總量增多，從而加快創(chuàng)面的愈合。這很可能是外用白蘞促進(jìn)創(chuàng)面愈合的重要途徑之一[15]。絲瓜絡(luò)主要化學(xué)成分為木聚糖及纖維素，有通經(jīng)活絡(luò)，清熱解毒，利尿消腫的功效，民間用于治療瘡瘍、乳癰、鶴膝風(fēng)等，現(xiàn)代多應(yīng)用于風(fēng)濕痹痛、熱毒臃腫、經(jīng)閉不通等[16]。文獻(xiàn)報(bào)道記載，絲瓜絡(luò)紅花湯熏洗治療關(guān)節(jié)腫痛驗(yàn)證了絲瓜絡(luò)鎮(zhèn)痛抗炎的功效[17]。本實(shí)驗(yàn)研究的自制白及涂擦劑是由白及粉，白蘞粉和絲瓜絡(luò)濃煎劑按1∶1∶2調(diào)成糊狀制成。《雞峰普濟(jì)方》記載：“白蘞、白及、絡(luò)石各半兩，取干者。為細(xì)末，干撒瘡上?！背Ｍ庥弥委煰彲儩⒑蟛粩?。絡(luò)石藤為夾竹桃科植物絡(luò)石的帶葉藤莖，性微寒、味苦、有微毒，有通絡(luò)止痛，涼血清熱，解毒消腫的功效[18]。絲瓜絡(luò)為葫蘆科絲瓜的成熟果實(shí)的纖維束，味甘、性平，無毒，且濃煎劑也具有通絡(luò)鎮(zhèn)痛、消腫抗炎之功效。與絡(luò)石藤比較，絲瓜絡(luò)濃煎劑具有同樣消腫抗炎、通絡(luò)止痛的功效，而且無毒、味甘，誤食對人體無害。因此，自制白及涂擦劑是在《雞峰普濟(jì)方》記載的白蘞散的基礎(chǔ)上改絡(luò)石藤為絲瓜絡(luò)濃煎劑。絲瓜絡(luò)通經(jīng)絡(luò)鎮(zhèn)痛，并與白及，白蘞入血脈降火消炎，同時(shí)能緩和白及與白蘞的苦寒之性。將白及粉、白蘞粉、絲瓜絡(luò)濃煎劑制成糊狀涂擦劑更能黏附在口腔潰瘍表面，使藥物與潰瘍更好地接觸，發(fā)揮更大的藥效和療效[19-20]。本實(shí)驗(yàn)設(shè)置空白組、對照組、中藥觀察組和西藥觀察組，采用30%醋酸燒灼豚鼠左臉頰造模，西藥觀察組用金霉素眼膏敷于豚鼠口腔潰瘍處的方法，中藥觀察組用自制白及涂擦劑敷于豚鼠口腔潰瘍處的方法。通過觀察不同劑量自制白及涂擦劑外用對豚鼠口腔潰瘍模型潰瘍面積變化、潰瘍程度及潰瘍局部病理組織學(xué)變化的影響，并與其他組比較，判斷自制白及涂擦劑對于減輕甚至消除口腔潰瘍引起的疼痛程度，并使口瘡達(dá)到愈合的目的。

1 材料與方法

1.1.1 動物 普通級豚鼠30只，體質(zhì)量270～300 g，雌雄各半,由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.1.2 藥物 白及(購于浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片公司，生產(chǎn)批號：20160530)，經(jīng)鑒定為蘭科植物白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.的干燥塊莖。白蘞(購于浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片公司，生產(chǎn)批號：20160521)，經(jīng)鑒定為葡萄科植物白蘞Ampelopsisjaponica(Thunb.)Makino。絲瓜絡(luò)(購于浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片公司，生產(chǎn)批號：20160515)，經(jīng)鑒定為葫蘆科屬絲瓜屬Luffacylindrica(L.)Roem.的干燥瓜絡(luò)。白及粉的制備：取30 g干燥白及塊，除去雜質(zhì)洗凈，曬干，打磨至極細(xì)粉末，過80目篩過篩。白蘞粉的制備：取30 g白蘞干燥塊，出去了雜質(zhì)洗凈，曬干，打磨至極細(xì)粉末，過80目篩過篩。白及粉和白蘞粉初步混合后再采用高速混合機(jī)混合10～15 min，得原料藥粉混合物。絲瓜絡(luò)水煎劑的制備方法：絲瓜絡(luò)洗凈除去雜質(zhì)，洗凈，潤透，切厚片，曬干，取30 g絲瓜絡(luò)加10倍蒸餾水浸泡30 min后煎煮，武火煎開后改文火煎60 min，過濾藥渣濃縮離心分離至50 mL濃煎劑。將絲瓜絡(luò)濃煎劑與混合好的原料藥粉2∶1混合，裝入帶孔的鋁盒，高壓蒸汽滅菌30 min制成自制白及涂擦劑。西藥：鹽酸金霉素眼膏，每克含鹽酸金霉素0.005 g。輔料為：白凡士林、液狀石蠟(購于浙江中醫(yī)藥大學(xué)校衛(wèi)生院，產(chǎn)品批號20160610)；30%冰醋酸(由浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供)。

1.1.3 試劑與儀器 奧尼攝像頭(深圳市奧尼電子工業(yè)有限公司生產(chǎn))；BI-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)(成都泰盟電子有限公司生產(chǎn))。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 選取質(zhì)量270～300 g的普通級豚鼠30只，雌雄各半。隨機(jī)均勻分為空白組、對照組和西藥觀察組、中藥觀察組(中藥A組、中藥B組、中藥C組)，共6組，每組5只。對照組、西藥觀察組、中藥觀察組造模，用一直徑5 mm的玻璃管一段塞緊棉花(使之于管口齊平)，再將玻璃管塞棉花的一端蘸滿30%冰醋酸，燒灼豚鼠左側(cè)臉頰口腔黏膜40 s，24 h后觀察，豚鼠左側(cè)口腔黏膜上均出現(xiàn)直徑約5 mm的潰瘍，造成口腔潰瘍模型，測觀察炎性反應(yīng)充血情況并記錄(潰瘍程度評判標(biāo)準(zhǔn)：“0”潰瘍周圍無紅暈無水腫，黏膜正常；“Ⅰ”潰瘍周圍稍有紅暈；“Ⅱ”潰瘍周圍有紅暈無水腫；“Ⅲ”潰瘍周圍有紅暈有水腫)。空白組不造模。

1.2.2 給藥方法 首先將豚鼠麻醉，然后進(jìn)行稱重，實(shí)驗(yàn)當(dāng)天除空白組外,其余組豚鼠按0.15 mL/100 g體重劑量腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉?？瞻捉M和觀察組在口腔潰瘍處使用自制白及涂擦劑敷在口腔潰瘍處?？瞻捉M，自制白及涂擦劑涂藥，1次/d；中藥A組，自制白及涂擦劑涂藥1次/d；中藥B組，自制白及涂擦劑涂藥2次/d；中藥C組，自制白及涂擦劑涂藥3次/d；西藥組，金霉素眼膏涂藥2次/d，連續(xù)用藥5 d，隔天用藥前用800萬像素?cái)?shù)碼照像機(jī)攝下豚鼠口腔潰瘍情況(焦距3 cm，攝像頭距豚鼠口腔2 cm)，用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)計(jì)算潰瘍面積，觀察炎性反應(yīng)充血情況并記錄。對照組不給藥。

1.2.3 鏡檢 取下處死后的所有豚鼠口腔潰瘍局部(空白組取口腔潰瘍相應(yīng)位置的局部組織)，10%甲醛固定，石蠟包埋，切片，鏡檢，觀察各組豚鼠口腔潰瘍組織形態(tài)并記錄。

2 結(jié)果

2.1 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍程度的影響 空白組無潰瘍，對照組和實(shí)驗(yàn)組造模1 d后，經(jīng)t檢驗(yàn)，潰瘍面積顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明造模成功。第1天，與對照組比較，各組豚鼠口腔潰瘍面積無顯著性差異，西藥組潰瘍減少等面積較中藥組多。隨著用藥時(shí)間的增加，第3天對照組口腔潰瘍面積增大，可能與炎性滲出且無藥物干預(yù)有關(guān)，中藥組和西藥組潰瘍面積較對照組顯著減小。5 d后對照組潰瘍面積減小，西藥組和中藥組均可顯著減小豚鼠口腔潰瘍面積，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，西藥組豚鼠口腔潰瘍面積接近愈合，和中藥組具有可比性。且中藥組隨著每天涂藥次數(shù)增多，口腔潰瘍面積減小越顯著。見表1。

2.2 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍程度的影響 第1天除空白組外，對照組和各個(gè)實(shí)驗(yàn)組局部充血水腫顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明造口腔潰瘍模型成功。在1～5 d內(nèi)，與對照組比較，經(jīng)Ridit檢驗(yàn)，在第1天，各給藥組潰瘍程度無明顯差異；第3天，西藥組可顯著減少口腔潰瘍程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；中藥B組和中藥C組可明顯減少口腔潰瘍程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，中藥A組對口腔潰瘍程度減輕不明顯；第5 d，中藥組和西藥組均可顯著減輕口腔潰瘍程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨著每日自制白及涂擦劑涂藥的次數(shù)增多，口腔潰瘍充血水腫程度減小。見表2。

表1 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍程度的影響

注：與對照組比較，*P<0.05

表2 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍程度的影響(只)

注：潰瘍指標(biāo):“0”潰瘍周圍無紅暈無水腫，黏膜正常；“Ⅰ”潰瘍周圍稍有紅暈；“Ⅱ”潰瘍周圍有紅暈無水腫；“Ⅲ”潰瘍周圍有紅暈有水腫

2.3 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍組織病理變化的影響 各組潰瘍局部病理觀察結(jié)果：創(chuàng)面愈合的本質(zhì)與核心是肉芽組織中表皮細(xì)胞生長因子(EGF)的調(diào)控及其結(jié)果，創(chuàng)面愈合的過程是多種生長因子共同作用的結(jié)果，這在一定程度上反映了外用中藥在分子水平上的促瘡面愈合機(jī)制。5 d后各組口腔潰瘍石蠟切片顯微鏡下可見空白組豚鼠口腔黏膜上皮完整，黏膜為鱗狀上皮覆蓋，黏膜下層為疏松的結(jié)締組織，毛囊腺體下面為肌組織；對照組豚鼠口腔黏膜潰瘍縮小1/3或未縮小，余2/3潰瘍面被新生肉芽組織所修復(fù)；中藥A組和中藥B組豚鼠大多口腔黏膜潰瘍縮小1/2，余1/2的潰瘍面被新生的肉芽組織的所修復(fù)，中藥C組豚鼠口腔黏膜潰瘍縮小2/3，余1/3的潰瘍面積被新生的肉芽組織所修復(fù)；西藥組豚鼠大多口腔黏膜潰瘍縮小2/3，余1/3潰瘍面積被新生的肉芽組織所修復(fù)。見表3。

表3 自制白及涂擦劑對豚鼠口腔潰瘍 組織病理變化的影響(只)

注：“-”口腔黏膜上皮完整，黏膜為鱗狀上皮覆蓋，黏膜下層為疏松的結(jié)締組織，毛囊腺體下面為肌組織；“+”口腔黏膜潰瘍縮小2/3，余1/3的潰瘍面積被新生的肉芽組織所修復(fù)；“++”口腔黏膜潰瘍縮小1/2，余1/2的潰瘍面被新生的肉芽組織的所修復(fù)；“+++”口腔黏膜潰瘍縮小1/3，或未縮小，余2/3的潰瘍面被新生肉芽組織所修復(fù)

3 討論

《素問·至真要大論》“病機(jī)十九條”中提到“諸熱瞀瘈，皆屬于火。諸痛癢瘡，皆屬于心(火)……諸禁鼓栗，如喪神守，皆屬于火……諸逆沖上，皆屬于火。諸脹腹大，皆屬于熱。諸躁狂越，皆屬于火……諸病有聲，鼓之如鼓，皆屬于熱。諸病胕腫，疼酸驚駭，皆屬于火。諸轉(zhuǎn)反戾，水液混濁，皆屬于熱。諸嘔吐酸，暴注下迫，皆屬于熱。”病機(jī)十九條首開論述“火熱”病機(jī)之先河。金元時(shí)期是“火熱論”發(fā)展的鼎盛時(shí)期，“火邪派”大家劉完素推崇火熱論，他提出“六氣皆能化火”，“五志過極結(jié)為熱甚”；張從正的“寒涼”而“攻下”法；朱丹溪推崇的“相火論”，他認(rèn)為“氣有余便是火”，“相火妄動致病”，從“實(shí)火”和“虛火”方面治療火熱??；李東垣提出“陰火論”，他認(rèn)為脾胃氣虛，榮氣下流于腎，擠占相火，使之上乘土位而成“陰火。明清時(shí)期是“火熱論”發(fā)展的完善時(shí)期，溫病四大家之首葉天士首次明確提出“溫邪”是導(dǎo)致溫病的主因，從衛(wèi)氣營血辨證論火，后有吳鞠通從三焦辨證論火加以完善論述溫病的診治。王清任提出“瘀血發(fā)熱”，瘀血滯于經(jīng)絡(luò)隧道之中，致氣血郁而不通,遂致發(fā)熱，獨(dú)創(chuàng)逐瘀湯活血化瘀散熱，為后世治療瘀血化火化熱提供了診療思路。張景岳在《類經(jīng)》曰：“火，天地之陽氣也。天非此火，不能生物；人非此火，不能有生。故萬物之生，皆由陽氣。但陽和之火則生物，亢烈之火反害物，故火太過氣反衰，火和平則氣乃壯”，他對《內(nèi)經(jīng)》校注，提出水火共濟(jì)，陰陽乃平衡[21]?，F(xiàn)代醫(yī)家對“上火”研究進(jìn)行完善，從中醫(yī)上來講，“上火”的病因主要包括飲食不當(dāng)、六淫侵襲、七情妄動、勞逸失度、先天稟賦、藥邪與醫(yī)過等，根據(jù)其基本病機(jī)又可分為虛實(shí)之火、肺腑之火、六經(jīng)之火、衛(wèi)氣營血三焦之火、無形有形之火等。

口腔潰瘍在中醫(yī)學(xué)屬“口瘡”“口糜”“口疳”等范疇?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》最早提出“口瘡”的概念，《素問·氣交變大論》曰：“歲金不及，炎火上行民病口瘡，甚則心痛”?！妒?jì)總錄》謂：“口瘡者，由心脾有熱，氣沖上焦熏發(fā)口舌，故作瘡也”。皆提出火邪為口瘡的病因。后世歷代醫(yī)家又有進(jìn)一步的深層認(rèn)識:《丹溪心法·口齒》篇曰:“口瘡服涼藥不愈者，因中焦土虛，且不能食，相火沖上無制”。《素問·生氣通天論》:“高粱之變，足生大丁?！鼻濉ぱρ┰凇夺t(yī)經(jīng)原旨》中指出:“足，多也，能也，厚味太過，蓄為內(nèi)熱，其變多生大疔?！鼻宕夺t(yī)宗金鑒》曰：“夫疔瘡者，乃火毒也?！本赋鲞^食厚味，可阻礙氣機(jī)升降，腸胃濕熱，蘊(yùn)久成內(nèi)火，火邪上攻，溢于肌表，甚至發(fā)生療瘡等疾病[22]?！吨T病源候論·口舌候》記載：“足太陰脾經(jīng)也，脾氣通于口，臟腑熱甚，熱乘脾氣沖于口舌，故口舌生瘡也”?！秹凼辣Ｔた谏唷吩?“口瘡者，脾氣凝滯加風(fēng)熱而然也”。指出脾胃氣機(jī)失暢與口瘡發(fā)生的關(guān)系。以上分別闡述了上焦實(shí)火熏灼、中焦郁而化火、下焦陰火上炎、皆為本病之病機(jī)，須辨證求因，辨證論治。另有，《景岳全書》云:“口瘡連年不愈者，此虛火也”?！锻饪普凇吩唬骸翱谄普撸刑摶?、實(shí)火之分，色淡色紅之別。虛火者，色淡而斑細(xì)點(diǎn)，甚者陷露龜紋，脈虛不渴，此因思煩太甚，多醒少睡，虛火動而發(fā)之”。皆提出虛火和實(shí)火，皆會發(fā)生口腔潰瘍。中醫(yī)理論認(rèn)為脾開竅于口，舌為心之苗，腎脈連咽系舌本，兩頰屬胃腸，因而口腔潰瘍的發(fā)病與臟腑病變密切相關(guān)。其局部病變在口腔，病位主要在心脾兩臟。現(xiàn)代醫(yī)家更進(jìn)一步的完善對口腔潰瘍的中醫(yī)病因病機(jī)的認(rèn)識，提出口腔潰瘍的病變雖在口腔，但病本在心、脾、腎三臟，治療應(yīng)先了解“火”的病因病位病性，四診合參再行辨證論治[9]。

目前建立口腔潰瘍模型方法主要有免疫誘導(dǎo)法、電灼燒法、機(jī)械方法、細(xì)菌感染誘導(dǎo)法、放射法、化學(xué)灼燒法。本研究選用化學(xué)灼燒法中30%冰醋酸灼燒法建立口腔潰瘍上火模型，此模型制作方法簡便易行，造模成功時(shí)間快，不會引起其他繼發(fā)反應(yīng)，且豚鼠造模后的癥狀與臨床接近。本實(shí)驗(yàn)動物模型選用豚鼠，因?yàn)殡嗍罂谇慌c人類相近，口腔黏膜壁薄利于造模，且對于刺激極其敏感便于觀察，同時(shí)豚鼠生性溫順易成活。本實(shí)驗(yàn)采用自制白及涂擦劑敷于豚鼠口腔潰瘍處的方法來觀察自制白及涂擦劑對于減輕甚至消除口腔潰瘍引起的疼痛的影響，并達(dá)到口腔潰瘍愈合的目的[23]?？谇粷兠娣e大小的變化和口腔潰瘍黏膜局部充血水腫程度的變化可直觀反映潰瘍情況，其組織病理學(xué)檢查可反映口腔潰瘍局部炎性反應(yīng)細(xì)胞浸潤程度和口腔潰瘍愈合情況。

白及來源于蘭科植物白及的干燥塊莖，苦、甘、澀、微寒，歸肺、胃、肝經(jīng)。《本經(jīng)》謂其“主癰腫惡瘡敗疽，傷陰死肌，胃中邪氣，賊風(fēng)，鬼擊，痱緩不收。”《本草綱目》謂其“能入肺止血，生肌治瘡?！?010年版《中華人民共和國藥典》記載其功能為收斂止血，消腫生肌，外用可止血斂瘡。白蘞來源于葡萄科植物白蘞的干燥塊莖，苦、辛、微寒，歸心、胃經(jīng)。始載于《本經(jīng)》，主癰腫疽瘡，散結(jié)氣，止痛。2010年版《中華人民共和國藥典》記載其功能為清熱解毒，散結(jié)止痛，生肌斂瘡[24]。絲瓜絡(luò)為葫蘆科絲瓜的成熟果實(shí)的纖維束，甘、平，歸肺、胃、肝經(jīng)。始載于《本草再新》：“通經(jīng)絡(luò)，和血脈，化痰順氣”[25]。現(xiàn)代研究表明絲瓜絡(luò)濃煎劑具有鎮(zhèn)靜，鎮(zhèn)痛，抗炎作用。白及、白蘞、絲瓜絡(luò)三藥合用走外表能斂瘡生肌，入血內(nèi)能消炎止痛，故本實(shí)驗(yàn)采用三藥涂擦劑治療口腔潰瘍。西藥選用鹽酸金霉素眼膏，主要用于敏感金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌等革蘭陽性菌及流感嗜血桿菌等敏感革蘭陰性菌所致感染的治療，且眼膏生產(chǎn)無菌要求極為嚴(yán)格，在試驗(yàn)過程中保證口腔潰瘍無其他致病菌的污染。故選用鹽酸金霉素眼膏作為西藥組，治療效果佳，具有可比性，能與自制白及涂擦劑中藥組形成對照。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果提示，與空白對照組比較，對照組和中藥、西藥觀察組豚鼠口腔潰瘍上火模型造模成功，且口腔潰瘍面積大小近似，潰瘍水腫充血程度一致，豚鼠造模耐受可，未出現(xiàn)其他不適癥狀。與對照組比較，自制白及涂擦劑和西藥金霉素均可顯著減小豚鼠口腔潰瘍面積，明顯減輕口腔潰瘍水腫充血程度，還能加快口腔潰瘍的愈合速度。與西藥金霉素比較，自制白及涂擦劑對口腔潰瘍愈合速度雖然不及其快，但使用自制白及涂擦劑治療口腔潰瘍的豚鼠胃口未見明顯影響，而西藥金霉素涂用組豚鼠胃口下降，體重有所減輕。從側(cè)面反映，誤食吞服自制白及涂擦劑對胃腸功能無影響，從而證明自制白及涂擦劑對口腔潰瘍愈合的有效性和安全性。

因此，通過本次試驗(yàn)證實(shí)用自制白及涂擦劑治療口腔潰瘍，可促進(jìn)口腔潰瘍愈合，減輕口腔潰瘍的充血水腫程度，能使口腔潰瘍消散而愈。本實(shí)驗(yàn)為白及、白蘞、絲瓜絡(luò)三藥合用的收瘡?fù)庥霉δ芴峁┝藢?shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床口腔潰瘍提供了一種簡易有效且安全經(jīng)濟(jì)的治療方法。

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EffectsofSelf-madeRhizomaBletillaeRubbingAgentinOralUlcerationGuineaPigModelwithShanghuo

Yang Jingjing1, Bao Jie1, Qian Ying1, Fang Zefeng1, Xiao Tingfeng1, Fan Yongsheng1, Dou Xiaobing1, Xia Yongliang2

(1ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou310053,China; 2TheFirstAffiliatedHospitalofZhejiangChineseMedicineUniversity,Hangzhou310006,China)

Objective:To explore the external curative effect of Rhizoma Bletillae rubbing agent in oral ulceration guinea pig′s model with Shanghuo.MethodsThe guinea pigs, whose right cheeks were burnt by 30% acetic acid to establish the models of oral ulceration. After successful modeling, the 25 guinea pigs were divided into model group, western medicine treatment group, Chinese medicine treatment group (Chinese medicine A group, Chinese medicine B group, Chinese medicine C group), each group with 5 guinea pigs. Rhizoma Bletillae rubbing agent was made by Rhizoma Bletillae powder, Radix Ampelopsis powder and Retinervus Luffae Fructus Concentrated decoction. Rhizoma Bletillae rubbing agent was used on the guinea pig oral ulcers for five days. Chinese medicine A group used Rhizoma Bletillae rubbing agent once a day, while Chinese medicine B group used Rhizoma Bletillae rubbing agent twice a day, and Chinese medicine C group used Rhizoma Bletillae rubbing agent three times a day. Western medicine treatment group used Chlortetracycline eye ointment on the guinea pig oral ulcers twice a day for five days. The model group was not given treatment. The blank group of 5 guinea pigs used the Rhizoma Bletillae rubbing agent once a day. The effects of different dosages of Rhizoma Bletillae rubbing agent on oral ulcer area changes, degrees and local histopathological changes in guinea pig oral ulcer model were observed.ResultsThe oral ulceration in guinea pig′s model whose right cheeks were burnt by 30% acetic acid was successful. Compared with the model group, Rhizoma Bletillae rubbing agent can remarkably improve the area of ulceration and the pathological changes.ConclusionRhizoma Bletillae rubbing agent has remarkable external curative effect on oral ulceration guinea pig′s model.

Rhizoma Bletillae; Radix Ampelopsis; Retinervus Luffae Fructus; Oralulcertion model

R285.6

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.009

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(2014CB543000，2014CB543001)

楊京京(1995.01—)，女，碩士在讀，研究方向：中醫(yī)藥防治腫瘤，E-mail:623355811@qq.com

竇曉兵(1977.08—)，男，博士，教授，副院長，研究方向：代謝性疾病的機(jī)制及中醫(yī)藥防治，E-mail：xbdou77@163.com;夏永良(1969.01—)，男，博士，副主任中醫(yī)師，中醫(yī)內(nèi)科和中醫(yī)內(nèi)科教研室副主任，研究方向：中醫(yī)內(nèi)科疑難雜癥的診治，E-mail：xiayongliang1@sina.com

(2017-11-03收稿 責(zé)任編輯：張文婷)