馬雪玲 王 田 劉婧瑋 李雪麗 鄧 冬 薛曉興 趙慧輝 王 娟 陳建新 王 偉

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029)

從高血壓肝火亢盛證的應(yīng)激變化探討肝主疏泄的生物學(xué)基礎(chǔ)

馬雪玲 王 田 劉婧瑋 李雪麗 鄧 冬 薛曉興 趙慧輝 王 娟 陳建新 王 偉

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029)

目的：通過(guò)比較分析應(yīng)激狀態(tài)下高血壓肝火亢盛證大鼠的宏觀表征及微觀理化指標(biāo)的變化，探討肝主疏泄的生物學(xué)基礎(chǔ)。方法：模擬現(xiàn)代社會(huì)的應(yīng)激刺激，給予高血壓肝火亢盛證大鼠和正常Wistar大鼠相同的應(yīng)激刺激，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其血壓、易激惹程度、行為及血液中Ang-II、NE含量變化，進(jìn)行多個(gè)維度的差異性及關(guān)聯(lián)性分析。結(jié)果：高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激組與無(wú)應(yīng)激組相比，應(yīng)激組高血壓肝火亢盛證大鼠血壓升高幅度更大(P<0.05),易激惹程度評(píng)分更高(P<0.05)，血液中Ang-II、NE含量升高(P<0.05)，且應(yīng)激結(jié)束2周后各項(xiàng)指標(biāo)仍然顯著高于無(wú)應(yīng)激組高血壓肝火亢盛證大鼠(P<0.05)，而Wistar應(yīng)激組與無(wú)應(yīng)激組相比，雖然也各項(xiàng)指標(biāo)均有升高(P<0.05)，但相較高血壓肝火亢盛證大鼠較晚出現(xiàn)升高，且應(yīng)激結(jié)束2周后與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：在肝疏泄功能正常的狀態(tài)下，受到外界應(yīng)激時(shí)，一定程度上機(jī)體可作出適應(yīng)性反應(yīng)，而高血壓肝火亢盛證屬肝失疏泄?fàn)顟B(tài)，應(yīng)激刺激下出現(xiàn)應(yīng)激損傷表現(xiàn)，其機(jī)制可能與外周Ang-II、NE含量升高有關(guān)。

高血壓；肝火亢盛證；應(yīng)激；肝主疏泄；生物學(xué)基礎(chǔ)

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 30只雄性SHR大鼠和30只雄性Wistar大鼠，購(gòu)買于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心動(dòng)物房(SPF級(jí))，室內(nèi)溫度控制在(23±2)℃，光照時(shí)間為(06:00-18:00)，所有大鼠均給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食和飲水。

1.1.2 儀器及試劑 大鼠無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓儀(BP-98A，Softron日本)；曠場(chǎng)反應(yīng)箱；攝像頭(Logitech瑞士)；動(dòng)物行為記錄分析系統(tǒng)(EthoVision 3.1，Noldus荷蘭)；Ang-II及NE Elisa試劑盒(RD公司 美國(guó))；酶標(biāo)儀(Multiskan Mk 3，Thermo美國(guó))。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組與干預(yù)方法

1.2.1.1 分組 適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，采用隨機(jī)數(shù)字表法將60只大鼠隨機(jī)分為以下六組：1)高血壓大鼠肝火亢盛證慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)10只，2)高血壓大鼠肝火亢盛證反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)10只，3)高血壓肝火亢盛證無(wú)應(yīng)激對(duì)照組SHR(C)10只；4)Wistar大鼠慢性溫和應(yīng)激組Wistar(M)10只，5)Wistar大鼠反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組Wistar(S)10只，6)Wistar大鼠無(wú)應(yīng)激對(duì)照組Wistar(C)10只。

1.2.1.2 干預(yù)方法 慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)和Wistar(M)：模擬日常生活中慢性、低強(qiáng)度應(yīng)激事件，采用隨機(jī)數(shù)字表法每日隨機(jī)給予大鼠1種或2種應(yīng)激刺激，如禁食12 h/次、禁水12 h/次、潮濕環(huán)境12 h/次、鼠籠傾斜45°夜/次、熱烘(45 ℃)5 min/次、鼠籠束縛30 min/次，連續(xù)給予應(yīng)激刺激6周。

電極陣列作為微流控芯片的核心,要根據(jù)使用環(huán)境設(shè)計(jì)適宜的尺寸及結(jié)構(gòu)。本文設(shè)計(jì)的多電極陣列微流控芯片需要考慮如下方面:微流控芯片要保持內(nèi)部多相流的流動(dòng)性以滿足不同細(xì)胞的混合;實(shí)現(xiàn)多個(gè)截面的電阻抗成像檢測(cè);芯片與測(cè)量?jī)x器接口的設(shè)計(jì);芯片的固定。

反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)和Wistar(S)：模擬人們?cè)陂L(zhǎng)期精神重壓和反復(fù)重復(fù)工作的社會(huì)現(xiàn)象，應(yīng)用低壓、低頻交流電擊箱，給予大鼠間斷電擊，持續(xù)應(yīng)激1 h/(次·d)，連續(xù)給予應(yīng)激6周。

對(duì)照組SHR(C)和Wistar(C)：將2組大鼠在應(yīng)激干預(yù)組給予應(yīng)激的同一時(shí)間放置于環(huán)境相同的鼠箱內(nèi)，但不給予任何刺激。

1.2.2 指標(biāo)檢測(cè)與方法

1.2.2.1 血壓測(cè)量方法 采用大鼠無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓儀(日本SoftronBP-98A)測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓。儀器預(yù)熱10 min，使溫度達(dá)到36～36.5 ℃，將大鼠固定在血壓測(cè)定固定器中，待大鼠安靜后，測(cè)量大鼠的尾動(dòng)脈壓，連續(xù)測(cè)量3次，測(cè)算平均值。實(shí)驗(yàn)開始前，每日進(jìn)行測(cè)壓訓(xùn)練1次，連續(xù)訓(xùn)練7 d。測(cè)量血壓時(shí)間固定在每天上午8：00-12:00之間，保持環(huán)境安靜狀態(tài)下測(cè)量。

1.2.2.2 易激惹程度評(píng)分方法 根據(jù)大鼠捉持時(shí)的表現(xiàn)，參考文獻(xiàn)中的分級(jí)及計(jì)分方法，分為以下四級(jí)[3]:1級(jí)：捉持大鼠頸部，出現(xiàn)尖叫/驚跳;2級(jí)：捉持大鼠頸部，大鼠表現(xiàn)出欲咬人或咬人;3級(jí)：提拿大鼠尾部，大鼠出現(xiàn)尖叫、驚跳，甚至咬人，或與同籠大鼠頻繁打斗;0級(jí)：均無(wú)以上表現(xiàn)。易激惹程度評(píng)分計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)，0級(jí)、1級(jí)、2級(jí)、3級(jí)分別記為0分、1分、2分、3分。

1.2.2.3 曠場(chǎng)試驗(yàn)方法 選擇清潔敞箱，將大鼠放置其中，保持室內(nèi)環(huán)境安靜，應(yīng)用動(dòng)物行為記錄分析系統(tǒng)測(cè)定大鼠3 min內(nèi)在敞箱中的活動(dòng)總距離。在測(cè)試完每只大鼠后，清理大鼠的大便和小便，并用乙醇去除前一只大鼠遺留的氣味，等待敞箱內(nèi)乙醇完全揮發(fā)后，才可繼續(xù)測(cè)定其他大鼠。

1.2.2.4 理化指標(biāo)測(cè)定方法 大鼠麻醉狀態(tài)下，采集大鼠眼眶血，約2 mL，冷卻至4 ℃，離心提取血清，保存在-80 ℃低溫冰箱內(nèi)。測(cè)定前將血清標(biāo)本放置在室溫，待其復(fù)溶后，應(yīng)用Elisa試劑盒檢測(cè)大鼠血清樣本中血管緊張素II(Ang-Ⅱ)和去甲腎上腺素(NE)的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 22.0軟件分析，各指標(biāo)數(shù)值采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用單因素方差分析(Anova)比較多個(gè)樣本，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用秩和檢驗(yàn)法分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血壓測(cè)定結(jié)果

2.1.1 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激后血壓變化 高血壓肝火亢盛證大鼠給予慢性溫和應(yīng)激后，SHR(M)組大鼠血壓出現(xiàn)波動(dòng)，但與無(wú)應(yīng)激組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激干預(yù)組大鼠SHR(S)血壓升高趨勢(shì)明顯，應(yīng)激后第2周已明顯高于無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，隨著應(yīng)激的時(shí)間的延長(zhǎng)，血壓升高幅度增加，應(yīng)激結(jié)束后2周仍明顯高于無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)。見圖1。

2.1.2 應(yīng)激前后Wistar大鼠血壓測(cè)定結(jié)果 溫和應(yīng)激組Wistar(M)應(yīng)激后血壓出現(xiàn)波動(dòng)，與無(wú)干預(yù)應(yīng)激組Wistar(C)組相比血壓下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組大鼠Wistar(S)，應(yīng)激第1周血壓與無(wú)應(yīng)激組Wistar(C)大鼠相比，略有升高，至應(yīng)激第4周時(shí)Wistar(S)血壓持續(xù)升高達(dá)峰值，并持續(xù)至應(yīng)激第6周，但Wistar(S)個(gè)體間差異較大，血壓波動(dòng)，不穩(wěn)定。應(yīng)激結(jié)束后2周Wistar(S)血壓下降，雖高于Wistar(C)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖2。

圖1 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激前后血壓變化

注：與高血壓肝火亢盛證無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，★P<0.05；下同

圖2 應(yīng)激前后Wistar大鼠血壓變化

注：與正常對(duì)照組Wistar(C)比較，*P<0.05；下同

2.2 易激惹程度評(píng)分結(jié)果 高血壓肝火亢盛證大鼠給予應(yīng)激干預(yù)后，與無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，SHR(M)在應(yīng)激第2周到第6周易激惹程度評(píng)分升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，停止應(yīng)激后2周，SHR(M)組大鼠易激惹程度評(píng)分下降；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組大鼠SHR(S)在應(yīng)激第1周，易激惹程度加重，其評(píng)分顯著高于SHR(C)組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，應(yīng)激第4周SHR(S)易激惹程度評(píng)分達(dá)到峰值，至應(yīng)激結(jié)束后2周，仍保持在較高的水平。給予正常大鼠慢性溫和應(yīng)激后，Wistar(M)組在應(yīng)激刺激第4周，易激惹程度評(píng)分高于Wistar(C)組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組大鼠Wistar(S)在應(yīng)激2周后易激惹程度加重，其評(píng)分與Wistar(C)組大鼠比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在應(yīng)激結(jié)束后2周，Wistar(M)和Wistar(S)組大鼠易激惹程度評(píng)分均降低，與無(wú)應(yīng)激干預(yù)組Wistar(C)大鼠比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖3。

圖3 高血壓肝火亢盛證大鼠與Wistar大鼠應(yīng)激后易激惹程度評(píng)分

2.3 曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果 高血壓肝火亢盛證慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)與對(duì)照組SHR(C)比較，在應(yīng)激2周、6周時(shí)曠場(chǎng)活動(dòng)總距離明顯減少(P<0.05)，應(yīng)激結(jié)束2周后，仍比對(duì)照組略低但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Wistar溫和應(yīng)激組大鼠Wistar(M)與對(duì)照組Wistar(C)比較，曠場(chǎng)活動(dòng)總距離也出現(xiàn)了一定程度的降低，但僅應(yīng)激6周時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)應(yīng)激2周、6周及應(yīng)激結(jié)束后2周，曠場(chǎng)活動(dòng)總距離較SHR(C)組有明顯增加(P<0.05)；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組Wistar(S)在應(yīng)激2周、6周活動(dòng)總距離增加，與對(duì)照組Wistar(C)比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，應(yīng)激結(jié)束2周后Wistar(S)活動(dòng)總距離雖仍高于對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖4。

圖4 高血壓肝火亢盛證大鼠與Wistar大鼠應(yīng)激 狀態(tài)下曠場(chǎng)試驗(yàn)活動(dòng)總距離(cm)

注：與正常對(duì)照組Wistar(C)比較，*P<0.05，與高血壓肝火亢盛證無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，★P<0.05，與高血壓肝火亢盛證慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)比較，△P<0.05

2.4 血清Ang-II含量 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激后4～6周，慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)及反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)組血清Ang-II含量均明顯升高，與無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)組升高更為顯著，與慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。應(yīng)激結(jié)束2周后，仍高于SHR(M)組和SHR(C)組。見圖5。

圖5 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激狀態(tài)下 血清Ang-II含量變化

注：與高血壓肝火亢盛證無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，★P<0.05，與高血壓肝火亢盛證慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)比較，△P<0.05

給予Wistar大鼠應(yīng)激后，慢性溫和應(yīng)激組Wistar(M)大鼠血清Ang-II含量與Wistar(C)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Wistar(S)組血清Ang-II含量與Wistar(C)比較，在應(yīng)激第4周至第6周升高明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但停止應(yīng)激后2周，逐漸下降，與Wistar(C)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖6。

圖6 Wistar大鼠應(yīng)激狀態(tài)下血清Ang-II含量變化

注：與正常對(duì)照組Wistar(C)比較，*P<0.05

2.5 血清NE含量 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激干預(yù)后，慢性溫和應(yīng)激干預(yù)組SHR(M)大鼠血清NE含量與SHR(C)組比較，在應(yīng)激后第1周開始升高，持續(xù)至應(yīng)激第4周，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，應(yīng)激后6周仍略高于SHR(C)組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而應(yīng)激結(jié)束2周后出現(xiàn)了明顯的下降，顯著低于SHR(C)組(P<0.05)；反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)大鼠在應(yīng)激干預(yù)后第1周至第6周，血清NE含量均顯著高于SHR(C)組(P<0.05)，但在應(yīng)激停止后2周，SHR(S)大鼠血清NE含量也出現(xiàn)了顯著下降。見圖7。

圖7 高血壓肝火亢盛證大鼠應(yīng)激狀態(tài)下血清NE含量變化

注：與高血壓肝火亢盛證無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)比較，★P<0.05，與高血壓肝火亢盛證慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)比較，△P<0.05

給予Wistar大鼠應(yīng)激后第1周，慢性溫和應(yīng)激組Wistar(M)和反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組Wistar(S)血清NE含量均較無(wú)應(yīng)激干預(yù)組Wistar(C)有所升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，然而2組應(yīng)激干預(yù)組大鼠NE含量在應(yīng)激4周后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，停止應(yīng)激后2周，與正常對(duì)照組Wistar(C)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖8。

圖8 Wistar大鼠應(yīng)激狀態(tài)下血清NE含量變化

注：與正常對(duì)照組Wistar(C)比較，*P<0.05

3 討論

肝火亢盛證是高血壓最常見的證型之一，多見于高血壓病的早期和中期，在高血壓Ⅰ期、Ⅱ期中多見[4-7]，該證型在55歲以下患者中較為多見[5]，主要由于肝失疏泄、氣郁化火、上擾頭竅所致，故多表現(xiàn)出急躁、易怒等肝火旺盛的表現(xiàn)。借助行為學(xué)試驗(yàn)?zāi)軌蚋玫胤磻?yīng)大鼠的情緒及精神狀態(tài)，從易激惹評(píng)分變化曲線可發(fā)現(xiàn)，高血壓肝火亢盛證大鼠SHR(C)組易激惹程度評(píng)分高于非肝火亢盛證大鼠，且給予高血壓肝火亢盛證大鼠反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激后SHR(S)組易激惹程度顯著高于無(wú)應(yīng)激干預(yù)組SHR(C)；而慢性溫和應(yīng)激Wistar(M)組大鼠和反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激Wistar(S)組大鼠，雖然在應(yīng)激2～6周高于Wistar(C)，但在應(yīng)激結(jié)束后，易激惹評(píng)分顯著下降，即應(yīng)激結(jié)束后能恢復(fù)到正常狀態(tài)，而SHR(S)在應(yīng)激結(jié)束后2周易激惹評(píng)分雖有下降但與SHR(C)組比較仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，SHR(M)則下降明顯甚至低于SHR(C)組。這一點(diǎn)不僅反映在情志活動(dòng)上，SHR(S)組血壓及曠場(chǎng)活動(dòng)總距離在應(yīng)激結(jié)束后2周也依然明顯高于SHR(C)組，而Wistar(S)和Wistar(M)組在應(yīng)激結(jié)束2周后均恢復(fù)到正常水平，說(shuō)明肝火亢盛證SHR大鼠，肝疏泄功能失常，受到應(yīng)激刺激后焦慮、急躁癥狀加重，應(yīng)激結(jié)束后仍不能恢復(fù)。由此可見高血壓肝火亢盛證SHR大鼠與肝火亢盛證高血壓患者相似，表現(xiàn)出急躁、易怒等特征，受到應(yīng)激刺激時(shí)，比正常大鼠反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，難以自我疏泄調(diào)節(jié)。

血管緊張素II(Ang-II)是RAAS系統(tǒng)中重要的血管收縮物質(zhì)，參與高血壓的發(fā)生與維持[8]。此外，Ang-Ⅱ也是非常重要的應(yīng)激激素，應(yīng)激時(shí)，交感神經(jīng)興奮性增加，可能會(huì)引起中樞及外周循環(huán)中Ang-Ⅱ的生成增加，而生成的Ang-Ⅱ反過(guò)來(lái)又能易化或加強(qiáng)交感神經(jīng)活性，促進(jìn)機(jī)體糖皮質(zhì)激素的分泌，加強(qiáng)應(yīng)激反應(yīng)起[9]。本研究中發(fā)現(xiàn)高血壓肝火亢盛證大鼠受到應(yīng)激刺激后，不論是慢性溫和應(yīng)激組SHR(M)還是反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激組SHR(S)，外周血中Ang-Ⅱ的含量都有明顯增加，且應(yīng)激結(jié)束后2周仍明顯高于無(wú)應(yīng)激干預(yù)組；而正常Wistar大鼠受到慢性溫和應(yīng)激后外周血中Ang-II含量則無(wú)明顯變化，只有在受到反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激后的第4周血清中Ang-Ⅱ水平有所升高，但在應(yīng)激結(jié)束后2周逐漸下降，恢復(fù)到正常水平。因此筆者認(rèn)為這可能是因?yàn)楦哐獕焊位鹂菏⒆C在肝失疏泄的狀態(tài)下，肝火與血壓相互影響的結(jié)果，由于高血壓肝火亢盛證大鼠存在交感神經(jīng)亢奮，受到應(yīng)激刺激后，激發(fā)外周Ang-II的生成，使得外周血中Ang-Ⅱ含量升高，因此不論是在慢性溫和應(yīng)激狀態(tài)下還是反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激狀態(tài)下，其高血壓肝火亢盛證大鼠血清中Ang-Ⅱ含量均顯著升高，而機(jī)體在正常狀態(tài)下受到溫和應(yīng)激后出現(xiàn)適應(yīng)性反應(yīng)，只有在反復(fù)強(qiáng)烈的刺激下才出現(xiàn)Ang-Ⅱ含量的增加，但在應(yīng)激結(jié)束后，通過(guò)機(jī)體自我調(diào)節(jié)，逐漸恢復(fù)至正常水平。

研究顯示，血清中NE含量在一定程度上能反映交感神經(jīng)系統(tǒng)的活性，NE水平越高，交感神經(jīng)興奮性越強(qiáng)[10]，交感神經(jīng)興奮增強(qiáng)又可使血壓進(jìn)一步升高[11]。Golostein等[12]研究發(fā)現(xiàn)，高血壓患者血漿中NE水平濃度升高。此外，NE含量與年齡之間存在密切的關(guān)聯(lián)，年齡越小血漿中NE含量越高，呈現(xiàn)為“高腎上腺素能”的特征。筆者發(fā)現(xiàn)高血壓肝火亢盛證大鼠14～18周齡也出現(xiàn)Golostein所謂的“高腎上腺素能”特征。近年來(lái)，有研究者認(rèn)為測(cè)定應(yīng)激條件下血清NE水平，可作為分析應(yīng)激刺激強(qiáng)度最敏感和最可靠的指標(biāo)。結(jié)合筆者的研究結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)不論是給予高血壓肝火亢盛證大鼠還是正常大鼠慢性溫和應(yīng)激亦或是反復(fù)強(qiáng)烈應(yīng)激，其血清中NE含量都出現(xiàn)了與應(yīng)激時(shí)間和強(qiáng)度相關(guān)的變化趨勢(shì)，表現(xiàn)為應(yīng)激初期先升高，應(yīng)激后期逐漸下降的趨勢(shì)。高血壓肝火亢盛證大鼠血清中NE含量在應(yīng)激結(jié)束后雖然有所下降，但仍然高于無(wú)應(yīng)激干預(yù)組肝火亢盛證大鼠，然而應(yīng)激結(jié)束后2周，非肝火亢盛證大鼠血清中NE水平可恢復(fù)至正常水平，而這與上述血壓、易激惹程度評(píng)分及曠場(chǎng)試驗(yàn)的規(guī)律相似，故筆者認(rèn)為血清中NE含量的變化在一定程度上能夠反映機(jī)體“肝主疏泄”的功能。

綜上所述，在正常生理狀態(tài)下，肝疏泄功能正常，受到外界應(yīng)激時(shí)在一定程度上機(jī)體可作出適應(yīng)性反應(yīng)，而高血壓肝火亢盛證屬肝失疏泄?fàn)顟B(tài)，肝調(diào)暢功能異常，故受到外界應(yīng)激時(shí)出現(xiàn)應(yīng)激損傷表現(xiàn)，而其機(jī)制可能與外周Ang-II、NE含量改變相關(guān)。

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DiscussiononBiologicalBasisoftheLiverGoverningFreeFlowofQiBasedonChangesofHypertensionwithLiver-fireHyperactivitySyndromeUnderStress

Ma Xueling, Wang Tian, Liu Jingwei, Li Xueli, Deng Dong, Xue Xiaoxing, Zhao Huihui, Wang Juan, Chen Jianxin, Wang Wei

(BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China)

Objective:To observe the macro and physicochemical changes of hypertensive rats with live-fire hyperactivity syndrome under stress, to evaluate the effects of stress in the process of hypertension, expounds the theoretical basis of liver governing the free flow of qi.MethodsStress with same intensity was given to hypertension rats with liver fire hyperactivity (SHR 14-18 weeks old) and normal rats (Wistar at the same age). The blood pressure, irritability degree, behavior and content of Ang-II and NE in serum were dynamically meassured. The difference and correlation for multiple dimensions were analyzed.ResultsThe adaptability to stress of hypertensive rats with liver-fire hyperactivity was worse than normal rats. Compared with non-stress group of SHR, the pressure increased significantly (P<0.05), and score of irritability degree was higher (P<0.05). The contents of Ang-II and NE in the blood was increased (P<0.05), and 2 weeks after the stress stopped，the above indexes were still significantly higher than non-stress SHR (P<0.05). Although the indexes of normal Wistar Rats under stress increased (P<0.05), but compared with the SHR which appeared in the late stage of stress later, and the indicators returned to normal level 2 weeks after stress stopped, and there was no significant difference (P>0.05).ConclusionIn normal physiological conditions, liver function is normal. The body can make adaptive response if affected by external stress in a certain extent, but under dysfunction of the liver, stress injury will occur, the mechanism of which may be related to the content increase of NE and Ang-II.

Hypertension; Liver-fire hyperactivity syndrome; Stress; Liver governing the free flow of qi; Biological basis

R285.5

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.051

國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81503382)；國(guó)家自然基金面上項(xiàng)目(81473521)；北京中醫(yī)藥大學(xué)中青年教師項(xiàng)目(面上項(xiàng)目)(2015-JYB-JSMS036)；國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(2011CB505106)

馬雪玲(1983.06—)，女，博士，講師，研究方向：心血管方向，E-mail：maxueling@126.com

王偉(1964.09—)，男，博士，教授，博士研究生導(dǎo)師，研究方向:心血管方向，E-mail：wangwei@bucm.edu.cn

(2017-09-29收稿 責(zé)任編輯：徐穎)