■ 《海洋與漁業(yè)》記者 方瓊玟/文

朱春華：全雄性羅氏沼蝦已選育到第五代

■ 《海洋與漁業(yè)》記者 方瓊玟/文

羅氏沼蝦俗稱(chēng)大頭蝦，又名馬來(lái)西亞大蝦、淡水長(zhǎng)臂大蝦，是一種大型淡水蝦，原產(chǎn)東南亞。廣東海洋大學(xué)海洋生物研究基地朱春華教授自1994年開(kāi)始，便致力于羅氏沼蝦種苗培育技術(shù)研究，近些年他帶領(lǐng)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)在全雄性羅氏沼蝦研究領(lǐng)域有了突破性進(jìn)展。

由于羅氏沼蝦雄性與雌性之間存在較大差異，雄蝦生長(zhǎng)速度較雌蝦快，所以選育羅氏沼蝦優(yōu)良品種，開(kāi)展全雄性羅氏沼蝦育苗具有很大的研究?jī)r(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。朱春華團(tuán)隊(duì)從泰國(guó)采集羅氏沼蝦原種，已經(jīng)進(jìn)行了5年的群體選育，獲得第5代具優(yōu)良性狀的品種。通過(guò)控制溫度、光照、鹽度等因素刺激雄蝦（ZZ）變性為偽雌蝦（ZZ），再通過(guò)偽雌蝦（ZZ）與雄蝦（ZZ）雜交的方法，獲得全雄性種蝦（ZZ），目前通過(guò)這種轉(zhuǎn)性機(jī)理，成功轉(zhuǎn)性的概率將近100%。

環(huán)境因素刺激羅氏沼蝦變性

1994年，朱春華作為外派技術(shù)人員，到江門(mén)開(kāi)展羅氏沼蝦的育苗生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)，這是他初次接觸羅氏沼蝦。1995年，在廣西北海，當(dāng)時(shí)作為“87扶貧”其中一個(gè)水產(chǎn)項(xiàng)目的對(duì)象，羅氏沼蝦在這里安家，朱春華便從此與羅氏沼蝦結(jié)緣。

“羅氏沼蝦雖然是淡水蝦種，但是種苗生產(chǎn)需要海水和良好的溫度條件，湛江具有得天獨(dú)厚的天然條件。”1995年，朱教授將蝦種帶回湛江，在廉江建立種苗場(chǎng)，培育蝦苗供應(yīng)給珠江三角洲的養(yǎng)殖戶。也正是那時(shí)，朱春華發(fā)現(xiàn)羅氏沼蝦雌雄性存在較大生長(zhǎng)差異，雌蝦生長(zhǎng)速度緩慢，平均比雄蝦慢50%～70%。因此，對(duì)全雄性羅氏沼蝦育苗的研究和推廣應(yīng)用成了朱春華的重要課題。

雖然沒(méi)有直接的證據(jù)證實(shí)羅氏沼蝦存在性染色體，但通過(guò)促雄性腺的移植等一系列研究，從后代的性別比例推斷羅氏沼蝦屬于ZW-ZZ染色體性別決定機(jī)制，雌性為異型染色體（ZW），雄性為同型染色體（ZZ），并且這種決定機(jī)制具有不完全性，可能還受環(huán)境、上位或者其他因素影響。

在育苗過(guò)程中，朱春華發(fā)現(xiàn)，環(huán)境因素如溫度、鹽度、光照能誘導(dǎo)羅氏沼蝦變性，雄性（ZZ）會(huì)變成偽雌性（ZZ），雌性（ZW）會(huì)變成偽雄性（ZW）。如降低枝角類(lèi)培養(yǎng)液的含氧量可使群體中后代的雄性比例增加，反之，如果攪動(dòng)水體增加含氧量，由于食物（細(xì)菌及單細(xì)胞藻類(lèi)）增多，后代的雄性比例減少；若降低培養(yǎng)液的pH值到6.3～6.7，后代的雄性比例就會(huì)增加，而pH值保持在6.8，后代的雄性比例就不會(huì)增加；若培養(yǎng)液中加入一些藥品如本氨基甲酸乙酯、氰化物等，能促使產(chǎn)生更多后代雄性。

朱春華

另外，在幼蝦發(fā)育時(shí)期，添加雄性腺激素（AGH）、胰島素樣促性腺激素（IAG）、雌二醇（E2），也會(huì)影響羅氏沼蝦的性別比例。然而，“通過(guò)環(huán)境等因素誘導(dǎo)變性，羅氏沼蝦的變性率最高只能達(dá)83%，通常只能達(dá)到70%，很不可控，因此，通過(guò)遺傳生物學(xué)中的雜交方式實(shí)現(xiàn)全雄性，或者是一個(gè)路子?！敝齑喝A說(shuō)。

雜交獲取全雄性羅氏沼蝦

“養(yǎng)殖水域的過(guò)度開(kāi)發(fā)，養(yǎng)殖環(huán)境的惡化，養(yǎng)殖種類(lèi)的病害對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展影響越來(lái)越嚴(yán)重。要維持水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展，必須通過(guò)一些技術(shù)手段對(duì)現(xiàn)有養(yǎng)殖品種進(jìn)行改良，從而獲得性狀優(yōu)良的養(yǎng)殖品種?！敝齑喝A表示，首先對(duì)羅氏沼蝦雌雄性進(jìn)行特異性分子標(biāo)記篩選，目前上海海洋大學(xué)邱高峰教授已經(jīng)獲得羅氏沼蝦性別特異性分子標(biāo)記技術(shù)，并在不同品種中得到驗(yàn)證。將羅氏沼蝦雄蝦（ZZ）性逆轉(zhuǎn)成偽雌蝦（ZZ），再通過(guò)回交（偽雌蝦ZZ×雄蝦ZZ）獲得全雄性后代。通過(guò)這種性別轉(zhuǎn)換機(jī)理，簡(jiǎn)單易行，轉(zhuǎn)性成功率100%。

談到全雄性羅氏沼蝦，朱春華稱(chēng)全世界有許多人在做研究，其中以色列專(zhuān)家Sagi是業(yè)界的名人。Sagi是在羅氏沼蝦稚蝦階段切除促雄性腺，結(jié)果引起雄性生殖系統(tǒng)的變異，如輸精管和精巢的萎縮、壺腹的消失以及雌性生殖孔乳頭區(qū)的出現(xiàn)等。這樣用摘除和移植促雄性腺的方法獲得性反轉(zhuǎn)的羅氏沼蝦雌體和雄體，再分別與正常的雄體和雌體交配，獲得雄性或雌性比率較高的群體，從而成功地進(jìn)行單性化養(yǎng)殖。

然而這種單性育種成本很高，“Sagi一只蝦苗賣(mài)到好幾塊錢(qián)美金，你說(shuō)在中國(guó)，如何實(shí)現(xiàn)大規(guī)模養(yǎng)殖呢？”朱春華說(shuō)，“可能性很低！”

人工合成GIH類(lèi)似物

因此，朱春華表示，要使全雄性羅氏沼蝦在中國(guó)大面積推廣養(yǎng)殖，必須采取最省錢(qián)的方法，也就是雜交或者通過(guò)技術(shù)創(chuàng)新讓之性逆轉(zhuǎn)。目前，朱春華研究團(tuán)隊(duì)從泰國(guó)湄公河采集羅氏沼蝦原種，然后進(jìn)行群體選育，選出具備優(yōu)良生長(zhǎng)性狀的群體，再運(yùn)輸至國(guó)內(nèi)進(jìn)行推廣養(yǎng)殖。“目前我們有兩千多斤種蝦，已經(jīng)是選育第五代了。”朱春華透露，另外，團(tuán)隊(duì)還在做GIH提取研究并做人工合成實(shí)驗(yàn)，GIH類(lèi)似物可以干擾血淋巴中孕酮的合成與分泌，是一種能夠抑制卵巢發(fā)育的多肽類(lèi)激素，在蝦類(lèi)中已經(jīng)證實(shí)能干擾卵黃蛋白原合成，抑制卵巢的發(fā)育，通過(guò)它在羅氏沼蝦性分化前采用浸泡等方式也能夠獲取全雄性羅氏沼蝦。

其實(shí)，引進(jìn)泰國(guó)羅氏沼蝦，還需要注意三個(gè)方面的養(yǎng)殖問(wèn)題：一個(gè)是食品安全問(wèn)題，雜交獲得的全雄性羅氏沼蝦并非轉(zhuǎn)基因，可以安全食用；其次是生態(tài)安全問(wèn)題，畢竟是從國(guó)外引進(jìn)來(lái)的苗種，要確保不會(huì)對(duì)生態(tài)造成威脅；還有就是生物安全問(wèn)題，要排除對(duì)本地生物造成威脅。“目前，有幾批羅氏沼蝦苗已經(jīng)賣(mài)到上海、福建等地，反響不錯(cuò)?！敝齑喝A說(shuō)。