周玨珉

(遂寧市中心醫(yī)院心電圖室，四川 遂寧 629000)

依達拉奉缺血后處理對急性心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究

周玨珉

(遂寧市中心醫(yī)院心電圖室，四川 遂寧 629000)

目的：分析急性心肌缺血再灌注損傷中依達拉奉缺血后處理的作用及其機制。方法選取2014年01月～2017年01月本院收治的100例住院急性心肌梗死患者，隨機分為對照組(A組)和依達拉奉后處理組(B組)，每組各50例，A組患者采用普通經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(Percutaneous coronary intervention，PCI)， B組患者采用依達拉奉(30 mg加0.9% 氯化鈉注射液100 mL中心靜脈滴注，持續(xù)至PCI術后1 h)后處理。PCI術后1 h對比再灌注心律失常、梗死后心絞痛以及ST段再抬高發(fā)生狀況，選取冠脈CT對血管再通情況予以測定，同時記錄4周病死率。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法對腫瘤壞死因子(Tumor nerosis factor α，TNF-α)、腫瘤壞死因子(Tumor nerosis factor α，TNF-α)以及血清白細胞介素1β(Interleukin-1β，IL-1β)予以檢測，同時對超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性與血清丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量予以測定。結果(1)與B組比較，A組患者的ST段再抬高、梗死后心絞痛以及再灌注心律失常發(fā)生率更高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)A組冠狀動脈再通率94%略低于B組的98%，但是兩者差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，4 周病死率B組16% 明顯低于A組的26%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(3)與A組相比，B組血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量均明顯降低(P<0.05)。(4)與A組相比，B組血清中MDA 含量降低，而血清SOD活性則明顯升高(P<0.05)。結論依達拉奉藥物后處理可降低心肌缺血再灌注損傷，能有效清除氧自由基、提高機體抗氧化應激能力，最終降低急性心肌梗死后再灌注心律失常、梗死后心絞痛發(fā)生率及病死率。

缺血/再灌注損傷；自由基；缺血后處理；依達拉奉

再灌注治療(Percutaneous coronary interention，PCI)或溶栓是急性心肌梗死的有效治療方法，然而缺血-再灌注損傷(Ischemic reperfusion injury)[1-2]可進一步加重心肌損傷。近年國內外研究重點及熱點轉移為對心肌梗死發(fā)生后心肌的保護研究，由以前的預處理變?yōu)樗幬锖筮m應[3](后處理，Pharmacologicpostconditioning，PP)。藥物后處理，實質上就是于缺血后再灌注治療前選取一系列藥物使心肌梗死面積減少與再灌注損傷降低。與缺血預處理比較，缺血后處理的可預測性、可控性更優(yōu)，在臨床上的應用更為實用。

依達拉奉作為一種自由基清除劑，可對病變部位的多種氧自由基予以有效清除，進一步降低腦缺血再灌注損傷，其在臨床上的應用范圍呈現(xiàn)逐漸擴展的趨勢，對于心肌缺血再灌注保護具有十分重要的意義。本文主要選取我院2014年01月～2017年01月期間收治的100例急性心肌梗死患者作為研究對象，分析急性心肌缺血再灌注損傷中依達拉奉缺血后處理的作用及其機制，現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年01月～2017年01月期間收治的100例急性心肌梗死患者作為研究對象。入選標準：①自愿簽署知情同意書；②2個或2個以上肢導聯(lián)ST段抬高≥0.1 mV；③急性心肌梗塞(Acute myocardial infarction，AMI)胸痛癥狀發(fā)作6 h以內；④心肌缺血癥狀持續(xù)≥30 min。排除標準：①伴有主動脈夾層瘤者；②凝血功能差，且伴有出血傾向者；③3個月內出現(xiàn)缺血性腦卒中者；④確診顱內惡性腫瘤者；⑤伴有活動性感染者；⑥有顱內出血史者。按照隨機數(shù)字表法將所有患者分為對照組(A組)和后處理組(B組)，每組各50例，A組50例患者中，男32例，女18例，年齡43-78歲，平均56.4歲；B組50例患者中，男34例，女16 例，年齡40-75歲，平均55.7歲。兩組一般資料無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具可比性。

1.2 治療方法與標本采集

A組為普通經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)，B組靜脈滴注30mg依達拉奉注射液(江蘇先聲藥業(yè)有限公司)+0.9%氯化鈉注射液100 mL，持續(xù)至PCI術后1h。同時，抽取3mL肘靜脈血，標本以3000 r·min-1離心10 min，對血標本上層血清予以提取，提取之后將其貯藏于- 20°冰箱內，統(tǒng)一進行檢測。

1.3 觀察指標

所有患者術前及術后持續(xù)行(心電監(jiān)護)每30 min測一次十二導聯(lián)心電圖及進行持續(xù)的血流動力學監(jiān)測，觀察梗死后心絞痛、再灌注心律失常以及ST段再抬高發(fā)生情況。同時，選取冠脈CT對血管再通情況予以測定，并對4周病死率予以評估與記錄。

1.4 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定血清IL-6、IL-1β、TNF-α濃度

選取雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Biantibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)對血清TNF-α、IL-1β以及IL-6濃度予以檢測，測試使用Sigma試劑有限公司生產(chǎn)的試劑盒購，相關操作均嚴格按照試劑盒說明書的要求進行。

1.5 血清丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性測定

嚴格按照Sigma試劑有限公司提供的試劑盒說明書進行操作，對血清MDA含量、SOD活性予以測定。

1.6 統(tǒng)計處理

2 結果

2.1 梗死后心絞痛、再灌注心律失常以及ST 段再抬高發(fā)生率比較

與對照組比較，依達拉奉缺血后處理組患者的ST段再抬高、再灌注心律失常及梗死后心絞痛發(fā)生率均明顯降低(P<0.05)，見表1。

注：與對照組相比，*P<0.05。

2.2 冠狀動脈再通率、4周病死率比較

對照組冠狀動脈再通率為94%略低于后處理組的98%，但是兩者差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，4周病死率后處理組為16%明顯低于對照組的26%(P<0.05)，見表2。

表2 冠狀動脈再通率、4周病死率比較(例(%)，n=50)

注：與對照組相比，*P<0.05。

2.3 兩組患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6濃度比較

ELISA檢測顯示，與對照組相比，后處理組血清TNF-α、IL-1β、IL-6 濃度明顯降低(P<0.05)，見圖1。

圖1 TNF-α、IL-1β及IL-6 濃度注：與對照組相比，*P<0.05。

2.4 血清MDA 含量及SOD活性比較

與對照組相比，后處理組血清中MDA 含量降低，而血清SOD活性則明顯升高(P<0.05)，圖2。

圖2 血清MDA含量及SOD活性注：與對照組相比，*P<0.05。

3 討論

急性冠脈綜合征作為一種心內科疾病，促進心肌再灌注恢復與及時進行血運重建能夠在很大程度上降低患者的病死率，但是潛在的再灌注損傷極易造成無復流現(xiàn)象、凋亡加重以及心肌細胞壞死等不良狀況，對預后會產(chǎn)生不良影響。血液再關注過程中，一旦出現(xiàn)繼發(fā)炎癥級聯(lián)反應，極易造成心肌再灌注損傷，而TNF-α、IL-1β和IL-6是引起此癥狀發(fā)生的主要因素。其中，TNF-a可對中性粒細胞向缺血再灌注區(qū)域的浸潤予以促進，通過對一氧化氮、氧自由基以及溶酶體等予以釋放，導致毛細血管通透性與心肌細胞損害增大，造成心肌壞死面積擴大。IL-1β作為機體炎癥反應的啟動因子在損傷區(qū)域聚集大量的單核細胞、淋巴細胞等炎癥細胞持續(xù)釋放細胞毒性物質加重損傷，其主要手段為增加細胞間黏附分子-1的表達。炎癥反應主要標志之一為IL-6，其在直接激活炎癥細胞的同時又能誘導急性期蛋白合成，產(chǎn)生的結果為催化和放大炎癥反應，具體表現(xiàn)為組織細胞的損害。

本研究中，A組血清IL-6、TNF-α以及IL-1β 濃度高于B組，這一結果表明急性ST段抬高心肌梗死患者通過再灌注治療后發(fā)生再灌注損傷性心電圖改變的原因之一可能是炎癥反應加重。

活性氧自由基(ROS，Reactive oxy gen species)能夠通過脂質過氧化對生物膜、蛋白質產(chǎn)生損傷，造成細胞凋亡、DNA 斷裂以及細胞內鈣超載等不良狀況發(fā)生。因此，再灌注開始幾分鐘內的時間窗、緩解ROS細胞毒性損傷以及清除再灌注過程中生成的自由基對再灌注心肌保護具有十分重要的意義。測定MDA可對組織脂質過氧化程度予以有效反映，其血清水平的高低能夠對機體受到自由基攻擊的嚴重程度予以間接反映，主要在于MDA是氧自由基攻擊生物膜上多不飽和脂肪酸造成脂質過氧化的一種標志產(chǎn)物。SOD作為自由基清除的一種特異酶，若是活性下降，極易造成氧自由基堆積，所以其活性變化能夠對體內抗氧化應激、氧自由基清除的能力予以有效反映。本研究中依達拉奉缺血后處理組MDA含量明顯低于對照組，而且SOD活性也較對照組明顯增高?？梢?，依達拉奉缺血后處理能明顯降低急性心肌梗死后再灌注所產(chǎn)生的氧自由基，從而達到保護心肌細胞的作用。

本研究結果表明，依達拉奉于再灌注開始之前給予藥物后處理可達到心肌保護目的，具有安全有效、簡易可行等優(yōu)點。所以，臨床治療急性冠脈綜合征患者選取急診介入血運重建方式的時候，應當在開通之前冠脈中心靜脈予以依達拉奉予以藥物后處理，在此基礎上對再灌注早期氧化應激予以抑制，并對缺血再灌注損傷予以進一步緩解，改善預后質量。同時，開展缺血后處理及藥物后處理的基礎及臨床的進一步研究工作迫在眉急，其關鍵點在于確定后處理的實施時間、臨床手段、原理機制、在臨床運用中的安全性和有效性，這些關鍵點的研究透徹可以夯實防治缺血心肌的再灌注損傷的理論基礎，對實現(xiàn)其臨床應用價值也有著決定性的作用。

1 Hausenloy DJ, Yellon DM. Myocardial ischemia-reperfusion injury: a neglected therapeutic target[J].J Clin Invest, 2013, 123(1): 92-100.

2 Frank A,Bonney M, Bonney S, et al. Myocardial ischemia reperfusion injury: from basic science to clinical bedside[J]. Semin Cardiothorac Vasc Anesth, 2012, 16(3): 123-132.

3 王秀紅,陳世彪. 心肌后處理保護機制的研究進展[J]. 中國心血管雜志, 2014, 19(04): 317-319.

4 Zhao ZQ,Corvera JS, Halkos ME, et al. Inhibition of myocardial injury by ischemic postconditioning during reperfusion: comparison with ischemic preconditioning[J]. Am J Physiol Heart CircPhysiol, 2003, 285(2): H579-588.

5 Kloner RA, Rezkalla SH. Preconditioning, postconditioning and their application to clinical cardiology[J]. Cardiovasc Res, 2006, 70(2): 297-307.

6 Zhao ZQ,Vinten-Johansen J. Postconditioning: reduction of reperfusion-induced injury[J]. Cardiovasc Res, 2006,70(2): 200-11.

7 Staat P, Rioufol G, Piot C, et al. Postconditioning the human heart[J]. Circulation, 2005, 112(14): 2143-2148.

8 Higashi Y,Jitsuiki D, Chayama K, et al. Edaravone (3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one), a novel free radical scavenger, for treatment of cardiovascular diseases. Recent patents on cardiovascular drug discovery[J]. Recent Pat Cardiovasc Drug Discov, 2006, 1(1): 85-93.

9 Liu YF, Chu YY, Zhang XZ, et al. TGFbeta1 protects myocardium from apoptosis and oxidative damage after ischemiareperfusion[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2017, 21(7): 1551-1558.

10 Cerisano G, Buonamici P, Parodi G, et al. Early changes of left ventricular filling pattern after reperfused ST-elevation myocardial infarction and doxycycline therapy: Insights from the TIPTOP trial[J]. Int J Cardiol, 2017, 240: 43-4811.

11 Wu J, Yu J, Xie P, et al. Sevoflurane postconditioning protects the myocardium against ischemia/reperfusion injury via activation of the JAK2-STAT3 pathway[J]. Peer J, 2017, 5: e3196.

12 Wu SZ, Tao LY, Wang JN, et al. Amifostine pretreatment attenuates myocardial ischemia/reperfusion injury by inhibiting apoptosis and oxidative stress[J]. Oxid Med Cell Longev, 2017, 2017: 413082413.

13 Yu L, Gong B, Duan W, et al. Melatonin ameliorates myocardial ischemia/reperfusion injury in type 1 diabetic rats by preserving mitochondrial function: role of AMPK-PGC-1alpha-SIRT3 signaling[J]. Sci Rep, 2017, 7: 41337.

14 Zhang S, He B, Ge J, et al. Characterization of chemical composition of Agaricusbrasiliensis polysaccharides and its effect on myocardial SOD activity, MDA and caspase-3 level in ischemia-reperfusion rats[J]. Int J Biol Macromol, 2010, 46(3): 363-366.

Protectiveeffectandmechanismofedaravonepostconditioninginjectiononacutemyocardialischemiareperfusioninjury

Zhou Jue-min

(Department of Electrocardiogram, Suining Central Hospital, Sichuan Suining 629000)

Objective： To explore the protective effect and mechanism of edaravone postconditioning injection on acute myocardial ischemia reperfusion injury.MethodsOne hundred patients with acute myocardial infarction in our hospital from June 2011 to June 2016 were selected and randomly divided into the observation group (B group) for 50 cases and the control group (A group) for 50 cases according to the random number table method. Patients in A Group were treated with ordinary percutaneous coronary interention (PCI), and patients in B group were treated with edaravone postconditioning injection (30 mg+0.9% NaCl 100 ml). Raising of ST segment, arrhythmia, and fatality rate of 4 weeks at 1 hour post-operation were observed. The serum content of TNF-α, IL-1β, IL-6, methane dicarboxylic aldehyde (MDA) and activity of superoxide dismutase (SOD) were tested by bi-antibody sandwich enzyme-linked immune-sorbent assay.Results(1) Compared with group A, raising of ST segment, arrhythmia, and fatality rate of 4 weeks significantly decreased in Group B (P<0.05). (2) The recanalization rate of B group was 98%，there was no significant difference group A(94%) and B，the mortality for 4 weeks of B group was 16%，it was significantly lower than the 26% of A group，the differences were statistically significant (P<0.05). (3) Compared with group A, levels of serum TNF-a, IL-1β, IL-6significantly decreased in group B (P<0.05). (4) Compared with group A, the level of serum MDA significantly decreased in group B (P<0.05), and the activity of SOD significantly increased in group B (P<0.05).ConclusionIn acute myocardial ischemia, after edaravone treatment before reperfusion can alleviate myocardial ischemia reperfusion injury, effectively clear oxygen free radical, improve the ability of antioxidative stress. Edaravone can reduce the rate of arrhythmia, stenocardia and fatality in 4 weeks after ischemia reperfusion.

Ischemia/reperfusioninjury; Free radical; Ischemic postconditioning; Edaravone

周玨珉，女，主治醫(yī)師，主要從事心電圖研究，Email：64322048@qq.com。

2017-6-28)