劉奇云 馬 敬 陶艷萍 敬曉濤

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，昆明 650000)

葛根素對妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織let-7f及免疫因子IL-17、IL-23表達(dá)的影響①

劉奇云 馬 敬②陶艷萍 敬曉濤

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，昆明 650000)

目的探究葛根素對妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織let-7f及免疫因子IL-17、IL-23表達(dá)的影響。方法將120只大鼠分為正常對照組、空白對照組、辛伐他汀組、葛根素低劑量組、葛根素中劑量組、葛根素高劑量組，正常對照組以基礎(chǔ)飼料、其他組以高脂飼料飼喂2周。辛伐他汀組給予2 mg/kg的辛伐他汀，葛根素組按低、中、高劑量分別給予70 mg/kg、120 mg/kg、170 mg/kg葛根素，正常對照組和空白對照組給予等量生理鹽水，治療2周后，測定6組大鼠血糖和血脂水平、胰腺組織中l(wèi)et-7f的表達(dá)水平以及血清和胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)情況。結(jié)果治療后，辛伐他汀組和葛根素組大鼠的FBG、TC 、TG 、FFA顯著低于空白對照組，且隨著葛根素劑量的增加，F(xiàn)BG、TC 、TG 、FFA的水平顯著降低(P<0.05)，呈劑量依賴性；辛伐他汀組和葛根素組胰腺組織中l(wèi)et-7f的表達(dá)顯著高于空白對照組(P<0.05)，且呈劑量依賴性；辛伐他汀組和葛根素組血清和胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)顯著高于空白對照組(P<0.05)，且呈劑量依賴性。結(jié)論葛根素能提高妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織let-7f表達(dá)，同時降低血清和胰腺組織中IL-17、IL-23表達(dá)，為妊娠期糖尿病臨床治療提供新的思路和理論依據(jù)。

妊娠期糖尿??；葛根素；let-7f；白細(xì)胞介素17；白細(xì)胞介素23

妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus，GDM)是妊娠期常見的并發(fā)癥[1]，對產(chǎn)婦的身體健康和胎兒的生命安全構(gòu)成嚴(yán)重的威脅[2]。GDM臨床主要表現(xiàn)為高血糖、多飲、多食、多尿[3]。GDM發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，其中高齡妊娠、脂肪細(xì)胞因子、炎癥因子和遺傳因素是引發(fā)GDM的主要因素[4]。目前常用的控制妊娠期高血糖的藥物有二甲雙胍和格列本脲，然而二甲雙胍的安全性研究尚缺乏，而且長期服用格列本脲會引發(fā)無癥狀低血糖[5]。葛根素作為一種植物類藥物，近年來被廣泛應(yīng)用于糖尿病的治療中，且臨床療效顯著。本研究旨在探討葛根素治療妊娠期糖尿病對胰腺組織中l(wèi)et-7f及免疫因子IL-17和IL-23的表達(dá)水平的影響。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動物及飼料 健康SD大鼠150只，SPF級，雌雄各半，8～10周齡，體重(150±20)g，購自北京實(shí)驗(yàn)動物研究中心[許可證號：SYXK(京)2015-0046]。普通飼料和高脂飼料由北京實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供，高脂飼料的配方為[17]：基礎(chǔ)飼料84.5%、蛋黃粉10%、豬油5%、膽酸鈉0.5%。

1.1.2主要材料與儀器 辛伐他汀(國藥準(zhǔn)字H20123114，山西華元醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司)；葛根素(批號：HS100301，安康禾燁麥迪森植物藥業(yè)有限公司)；RNA提取試劑盒購自天根生化科技有限公司；TaqDNA聚合酶購自NEB公司；兔抗大鼠IL-17多克隆抗體和兔抗大鼠IL-23多克隆抗體購自武漢博士德生物工程有限公司；IL-17 ELISA試劑盒和IL-23 ELISA試劑盒購自上海賽默科技生物發(fā)展有限公司；PUZS-300全自動生化分析儀購自普朗醫(yī)療；3K15超低溫離心機(jī)購自德國Sigma公司；SW-CJ-2D2G2F2FD 雙人凈化工作臺購自蘇州蘇凈；引物序列，由蘇州金唯智生物科技有限公司合成。

1.2方法

1.2.1妊娠期糖尿病動物模型建立 將雌性和雄性大鼠按1∶1合籠，次日清晨取雌性大鼠的陰道分泌物涂片鏡檢，發(fā)現(xiàn)精子則記為妊娠(棄去未懷孕大鼠)，從中隨機(jī)選取20只孕鼠，記為正常對照組(懷孕但沒有糖尿病)，用普通飼料飼喂2周，另外的130只孕鼠用高脂飼料飼喂2周后，測定非空腹血糖值,以血糖值≥6.7 mmol/L為妊娠期糖尿病大鼠模型建立成功的標(biāo)準(zhǔn)[6]。棄去空腹血糖未達(dá)標(biāo)大鼠。

1.2.2實(shí)驗(yàn)分組及給藥方案 將100只建模成功的妊娠期糖尿病大鼠隨機(jī)分成5組，每組20只，分別命名為空白對照組、辛伐他汀組、葛根素低劑量組、葛根素中劑量組、葛根素高劑量組，辛伐他汀組給予2 mg/kg的辛伐他汀灌胃治療，葛根素組按低、中、高劑量分別給予70、120、170 mg/kg葛根素灌胃治療，正常對照組和空白對照組給予等容積0.9%的生理鹽水灌胃治療，每組治療時間均為2周。

1.2.36組大鼠空腹血糖和血脂比較 在給藥治療后，測定6組大鼠空腹血糖和血脂情況。將6組大鼠禁食12 h，于次日清晨采集各組大鼠眼眶靜脈血，置于超低溫離心機(jī)，3 000 r/min離心5 min，分離血清。用全自動生化分析儀測定大鼠空腹血糖(FBG)和血脂[總膽固醇(TC) 、甘油三酯(TG) 、游離脂肪酸(FFA) ]的含量。

1.2.4大鼠胰腺組織分離 大鼠禁食12 h后行脫頸椎處死，將其置于75%酒精中消毒2～3 min，置于超凈臺內(nèi)剪開大鼠腹腔，用鑷子輕輕夾起脾臟，從靠近脾臟的胰尾分離至十二指腸處，將胰腺完整剪下，輕輕放入5 ml 4℃預(yù)冷的PBS溶液中，減去脂肪組織、血管、系膜和淋巴等，清洗2～3次后，置于4℃預(yù)冷的PBS溶液中備用。

1.2.5qRT-PCR檢測胰腺組織中l(wèi)et-7f的表達(dá)水平 用RNA提取試劑盒，提取胰腺組織的總RNA，用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)為cDNA。然后根據(jù)NCBI上提交的let-7f序列(NR_031806.1)設(shè)計引物，上游引物F：5′-ATCAGAGTGAGGTAGTAGATTG-3′，下游引物R：5′-CTCGGGAAGGCAATAGAT-3′，進(jìn)行qRT-PCR，同時以GAPDH為內(nèi)參。PCR的反應(yīng)體系為：5×緩沖液 10 μl，TaqDNA聚合酶 1 μl，上游引物F 2 μl，下游引物R 2 μl，10 mmol/L dNTP mix 1 μl，cDNA 1 μl，ddH2O 33 μl；PCR的反應(yīng)條件為：預(yù)變性：95℃ 5 min，變性：95℃ 30 s，退火：61℃ 15 s(let-7f和GAPDH)，延伸：72℃ 1 min，30個循環(huán)，再延伸：72℃ 5 min。PCR 產(chǎn)物經(jīng)電泳后計算 let-7f mRNA/GAPDH mRNA 的電泳條帶積分光密度比值，用來表示let-7f mRNA 的相對值。

1.2.6免疫組化檢測胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 選取1.2.4中分離的胰腺組織制作石蠟切片(厚度不超過5 mm)，將組織切片在92～98℃條件下存放20 min進(jìn)行抗原修復(fù)，滴加正常山羊血清用來中和非特異性反應(yīng)后，在組織玻片上分別滴加IL-17和IL-23一抗，于4℃過夜放置，復(fù)溫后再組織玻片上滴加二抗。使用DAB 顯色試劑進(jìn)行底物顯色，當(dāng)呈現(xiàn)金黃色時終止顯色反應(yīng)，使用蘇木素進(jìn)行復(fù)染后，用Olympus CCD攝像機(jī)隨機(jī)采集1個視野(×200)的圖片，觀察IL-17和IL-23在細(xì)胞核和(或)胞質(zhì)中的表達(dá)情況。

1.2.7ELISA檢測血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 治療結(jié)束后，6組大鼠禁食12 h，于次日清晨采集各組大鼠眼眶靜脈血，于超低溫離心機(jī)，3 000 r/min離心5 min，分離血清。采用IL-17 ELISA試劑盒和IL-23 ELISA試劑盒檢測大鼠血清中IL-17和IL-23的表達(dá)情況，具體操作步驟嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行。將抗大鼠IL-17及IL-23單抗(一抗)滴加在酶標(biāo)板上，隨后加入生物素化的抗大鼠 IL-6、IL-17 及IL-23(二抗)，與結(jié)合在單抗上的IL-17和IL-23結(jié)合而形成免疫復(fù)合物。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗生物素蛋白鏈球菌(Streptavidin)將與二抗的生物素結(jié)合，加入終止液后，在450 nm處測量其OD值，通過計算獲得相應(yīng)的濃度值。

1.2.8Western blot檢測胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 取1.2.4中分離的大鼠胰腺組織，加入2 ml細(xì)胞裂解液提取細(xì)胞總蛋白，以GAPDH為內(nèi)參，采用Western blot方法檢測IL-17和IL-23蛋白表達(dá)水平，通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行定性分析，然后采用BCA Protein Assay Kit試劑盒測定蛋白濃度，操作方法按照試劑盒說明書。

2 結(jié)果

2.16組大鼠空腹血糖和血脂比較 持續(xù)治療2周后，辛伐他汀組和葛根素組大鼠的FBG、TC、TG、FFA顯著低于空白對照組(P<0.05)；且隨著葛根素劑量的增加，F(xiàn)BG、TC 、TG 、FFA的水平顯著降低(P< 0.05)，呈劑量依賴性； 葛根素高劑量組大鼠的FBG、TC、TG、FFA與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05) ，結(jié)果見圖1、2。

圖1 6組大鼠空腹血糖比較Fig.1 Comparison of fasting blood glucose between 6 groups of rats(±s)Note:Compared with the normal control group，*.P<0.05;compared with the control group，#.P<0.05 compared with the simvastatin group，△.P<0.05;compared with the puerarin low-dose group，▲.P<0.05;compared with the puerarin medium-dose group，&.P<0.05.

2.2qRT-PCR檢測胰腺組織中l(wèi)et-7f的表達(dá)水平 持續(xù)治療2周后，空白對照組let-7f的表達(dá)水平顯著低于正常對照組(P<0.05)；辛伐他汀組和葛根素組let-7f的表達(dá)水平顯著低于空白對照組(P<0.05)，且隨著葛根素劑量的增加，let-7f的表達(dá)水平顯著提高(P<0.05)；葛根素高劑量組let-7f的表達(dá)與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，結(jié)果見圖3。

2.3免疫組化檢測胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 持續(xù)治療2周后，與正常對照組相比，空白對照組胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)明顯提高，表明妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)較高；與空白對照組相比，辛伐他汀組和葛根素組胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)明顯降低，且隨著葛根素劑量的提高胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)明顯降低，結(jié)果如圖4、圖5所示。

圖2 6組大鼠空腹血脂比較Fig.2 Comparison of fasting blood lipid between 6 groups of ratsNote:Compared with the normal control group，*.P<0.05;compared with the control group，#.P<0.05 compared with the simvastatin group，△.P<0.05;compared with the puerarin low-dose group，▲.P<0.05;compared with the puerarin medium-dose group，&.P<0.05.

圖3 qRT-PCR檢測胰腺組織中l(wèi)et-7f的表達(dá)Fig.3 qRT-PCR was used to detect the expression of let-7f in pancreatic tissueNote:Compared with the normal control group，*.P<0.05;compared with the control group，#.P<0.05 compared with the simvastatin group，△.P<0.05;compared with the puerarin low-dose group，▲.P<0.05;compared with the puerarin medium-dose group，&.P<0.05.

2.4ELISA檢測血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 持續(xù)治療2周后，空白對照組大鼠血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平顯著低于正常對照組(P<0.05)，辛伐他汀組和葛根素組血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平顯著高于空白對照組(P<0.05)，且隨著葛根素劑量的增加，大鼠血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平顯著提高(P<0.05)；葛根素高劑量組血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，結(jié)果見圖6。

圖4 免疫組化檢測胰腺組織中IL-17的表達(dá)水平(×200)Fig.4 Expression level of IL-17 in pancreatic tissue was detected by immunohistochemistry (×200)Note:A.Normal control group；B.The blank control group;C.Simvastatin group；D.Puerarin low-dose group；E.Puerarin medium-dose group；F.Puerarin high-dose group.

2.5Western blot檢測胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平 持續(xù)治療2周后，空白對照組胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平顯著高于正常對照組(P<0.05)，辛伐他汀組和葛根素組胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平顯著高于空白對照組(P<0.05)，且隨著葛根素劑量的增加，大鼠胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)顯著提高(P<0.05)；葛根素高劑量組胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，結(jié)果見圖7。

圖6 ELISA檢測血清中IL-17和IL-23的表達(dá)水平Fig.6 ELISA was used to detect expression of IL-17 and IL-23 in serum(±s)Note: Compared with the normal control group，*.P<0.05；compared with the blank control group，#.P<0.05；compared with the simvastatin group，△.P<0.05；compared with the puerarin low-dose group，▲.P<0.05；compared with the puerarin medium-dose group，&.P<0.05.

圖7 Western blot檢測胰腺組織中IL-17和IL-23的表達(dá)水平Fig.7 Western blot examined expression levels of IL-17 and IL-23 in pancreatic tissue(±s)Note: Compared with the normal control group，*.P<0.05;compared with the control group，#.P<0.05 compared with the simvastatin group，△.P<0.05;compared with the puerarin low-dose group，▲.P<0.05;compared with the puerarin medium-dose group，&.P<0.05.

3 討論

葛根素(Puerarin，Pue)是從豆科植物葛根中提取出來的天然活性物質(zhì)，臨床上主要用于治療2型糖尿病[7]，其主要有效成分為異黃酮。Pue具有良好的擴(kuò)張血管、增強(qiáng)免疫力、抗氧化、降血糖和提高胰島素受體細(xì)胞敏感性等功能[8-10]。近年來，不少學(xué)者將Pue應(yīng)用于糖尿病的治療中。研究表明，Pue可以降低鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的血糖水平[11]。Pue還可以用于糖尿病心血管并發(fā)癥的治療中，腹腔注射Pue在降低糖尿病大鼠血糖水平的同時，還可以抑制血清心肌酶(CK-MB)和心肌組織中RAGE mRNA的表達(dá)[12]。劉嬌梅[13]的研究表明Pue對糖尿病大鼠具有保護(hù)作用，而且呈現(xiàn)劑量依賴性。本研究表明，葛根素能夠顯著降低妊娠期糖尿病大鼠血糖和血脂水平，且呈現(xiàn)劑量依賴性，這與前人的研究結(jié)果一致。但葛根素對妊娠期糖尿病胰腺組織中l(wèi)et-7f及免疫因子IL-17和IL-23表達(dá)水平的影響尚未見報道。

miRNA let-7家族是在秀麗隱桿線蟲體內(nèi)被發(fā)現(xiàn)的[14，15]，它可以通過調(diào)節(jié)葡萄糖代謝和胰島素的分泌調(diào)控糖尿病的發(fā)生。研究表明，過量表達(dá)let-7的轉(zhuǎn)基因小鼠會出現(xiàn)葡萄糖耐量受損和胰島素分泌減少[16]。Zhu等[17]的研究表明，let-7過表達(dá)會產(chǎn)生胰島素抵抗和葡萄糖耐量受損，同時他們還驗(yàn)證了let-7抑制的靶基因有 IGF1R、INSR、IRS2、HMGA2和 IGF2BP2，這些基因均與葡萄糖代謝及胰島素分泌密切相關(guān)。miRNA let-7家族成員有12種，miRNA let-7f屬于其中一種，研究表明，miRNAlet-7f在1型糖尿病小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)中的表達(dá)水平降低，當(dāng)血糖水平降低時let-7f的表達(dá)水平升高[18]。以上數(shù)據(jù)都說明let-7的表達(dá)與血糖水平呈負(fù)相關(guān)，本研究表明，let-7f在妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織中的表達(dá)降低，當(dāng)用不同劑量的Pue對妊娠期糖尿病大鼠進(jìn)行治療后，let-7f的表達(dá)水平逐漸升高，且呈現(xiàn)劑量依賴性。

白細(xì)胞介素-17(Interleukin-17，IL-17)和白細(xì)胞介素-23(interleukin-23，IL-23)是一種重要的免疫因子，在機(jī)體的免疫和調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用[19，20]。研究表明，IL-17能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞活化，進(jìn)而刺激機(jī)體產(chǎn)生更多的促炎因子[21]。而IL-23是促進(jìn)和維持Th17細(xì)胞分泌IL-17的重要免疫因子，通過IL-23/IL-17軸發(fā)揮作用。越來越多的證據(jù)表明IL-23/IL-17軸在自身免疫性疾病及炎性疾病中發(fā)揮重要的作用[22]。Mohamed等[23]研究發(fā)現(xiàn)，IL-17對糖尿病小鼠腎臟具有保護(hù)作用。且有臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病腎病患者外周血中Th17的表達(dá)增多[24，25]。Abbasi等[26]的研究表明IL-23亞基mRNA在糖尿病患者外周血PBMC中表達(dá)水平較低。這些研究提示IL-17及IL-23在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。但免疫因子IL-17和IL-23在妊娠期糖尿病大鼠中的表達(dá)方面的研究尚未見報道。本研究結(jié)果表明，IL-17和IL-23在妊娠期糖尿病大鼠血清和胰腺組織中的都表達(dá)升高，表明IL-17和IL-23在妊娠期糖尿病大鼠血清和胰腺組織中的表達(dá)情況是一致的；當(dāng)用不同劑量的Pue對妊娠期糖尿病大鼠進(jìn)行治療后，IL-17和IL-23的表達(dá)水平逐漸降低，且呈現(xiàn)劑量依賴性。另外還有研究表明[27]，let-7f負(fù)調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞中IL-23R的表達(dá)和IL-17A的產(chǎn)生，因此其認(rèn)為let-7f對IL-23、IL-17具有顯著的調(diào)控作用。而本研究結(jié)果中，隨著Pue劑量的增加，miRlet-7f呈現(xiàn)升高的趨勢，而IL-23、IL-17呈現(xiàn)降低的趨勢，推測可能是由于let-7f的負(fù)調(diào)節(jié)作用而導(dǎo)致IL-23及IL-17的產(chǎn)生，具體機(jī)制目前尚不明確，還有待進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，葛根素能提高妊娠期糖尿病大鼠胰腺組織let-7f表達(dá)，同時降低血清和胰腺組織中IL-17、IL-23表達(dá)，為妊娠期糖尿病臨床治療提供新的思路和理論依據(jù)。

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Influenceofpuerarinonpancreatictissuelet-7fandimmunefactorsIL-17andIL-23expressionofratswithgestationaldiabetesmellitus

LIUQi-Yun,MAJing,TAOYan-Ping,JINGXiao-Tao.

FirstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming650000,China

Objective:To explore the influence of puerarin on pancreatic tissue let-7f and immune factors IL-17 and IL-23 expression of rats with gestational diabetes mellitus.Methods120 cases of rats were divided into the normal control group,the blank control group,simvastatin group,puerarin low-dose group,puerarin medium-dose group and puerarin high-dose group.The normal control group were given basal diet,and the other groups were given high fat diet,all fed for two weeks.The simvastatin group were given 2 mg/kg simvastatin,and the puerarin group were given 70 mg/kg,120 mg/kg,170 mg/kg puerarin according to low,medium,high dose,and the normal control group and blank control group were given the same amount of normal saline,after 2 weeks of treatment,blood sugar and blood lipid and let-7f expression in pancreatic tissue of rats were tested in the six groups.ResultsAfter treatment,FBG,TC,TG and FFA of rats in the simvastatin group and puerarin group were significantly lower than those in the blank control group,and with the increasing of puerarin dose,the levels decreased significantly (P<0.05),in a dose-dependent manner.Let-7f expression in pancreatic tissue of the simvastatin group and puerarin group was significantly higher than that in the blank control group (P<0.05),in a dose-dependent manner.IL-17 and IL-23 expression in serum and pancreatic tissue of the simvastatin group and puerarin group was significantly higher than that of the blank control group (P<0.05),in a dose-dependent manner.ConclusionPuerarin can increase let-7f expression in pancreatic tissue of gestational diabetes mellitus rats with gestational diabetes mellitus,and can reduce IL-17 and IL-23 expression in serum and pancreatic tissue.It can provide reference for clinical treatment of gestational diabetes mellitus.

Gestational diabetes mellitus;Puerarin;let-7f;Interleukin 17;Interleukin 23

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.12.018

R714.256

A

1000-484X(2017)12-1843-06

①本文為國家自然科學(xué)基金地區(qū)項(xiàng)目(81460240)、云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學(xué)應(yīng)用基礎(chǔ)研究聯(lián)合專項(xiàng)資金項(xiàng)目青年博士項(xiàng)目[2017FE467(-140)]和云南省衛(wèi)生和計劃生育委員會醫(yī)學(xué)后備人才培養(yǎng)計劃(H-201646)。

②通訊作者，E-mail：394632080@qq.com。

劉奇云(1982年-)，男，碩士，住院醫(yī)師，主要從事圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)研究，E-mail：314066987@qq.com。

[收稿2017-09-12 修回2017-11-02]

(編輯 倪 鵬)

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《中國免疫學(xué)雜志》被國際著名檢索機(jī)構(gòu)收錄通知

根據(jù)國際檢索機(jī)構(gòu)給中國科學(xué)技術(shù)期刊編輯學(xué)會國際交流工作委員會、中國高?？萍计诳芯繒ν饴?lián)絡(luò)委員會發(fā)來的電子郵件及其附件統(tǒng)計整理,《中國免疫學(xué)雜志》被以下八種國際重要檢索系統(tǒng)列為來源期刊：

1)美國《化學(xué)文摘(網(wǎng)絡(luò)版)》(CA);

2)美國《劍橋科學(xué)文摘(自然科學(xué))》(CSA(NS),Cambridge Scientific Abstracts(Natural Science));

3)波蘭《哥白尼索引》(IC, Index of Copurnicus);

4)《日本科學(xué)技術(shù)振興機(jī)構(gòu)(中國文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫)》(JST, Japan Science & Technology Agency(Chinese Bibliographic Database))；

5)美國《烏利希期刊指南(網(wǎng)絡(luò)版)》(UPD，Ulrich's Periodicals Directory)；

6)英國《國際農(nóng)業(yè)與生物科學(xué)研究中心》(CABI，Centre for Agriculture and Bioscience International);

7)WHO西太平洋地區(qū)醫(yī)學(xué)索引(Western Pacific Region Index Medicus,WPRIM)；

8)英國《公共健康研究數(shù)據(jù)庫》(Global Health)。

《中國免疫學(xué)雜志》編輯部