馬子君，李亞東，劉芳時(shí)，姜文月，任緒華，蘇婷，鄭廣晶，齊美欣，高 陸*

（1.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長(zhǎng)春 130000；2.吉林長(zhǎng)白山藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，吉林 白山 134300；3.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130000；4.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130000）

AOTF-NIR快速檢測(cè)精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量新方法

馬子君1，李亞東2，劉芳時(shí)3，姜文月1，任緒華3，蘇婷1，鄭廣晶2，齊美欣4，高 陸*

（1.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長(zhǎng)春 130000；2.吉林長(zhǎng)白山藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，吉林 白山 134300；3.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130000；4.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130000）

目的采用聲光可調(diào)近紅外（AOTF-NIR）光譜技術(shù)，探索快速檢測(cè)精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量新方法。方法 建立近紅外光譜法測(cè)定人參皂苷Rb1含量，建立含量與NIR光譜之間的校正模型，利用NIR模型對(duì)未知樣品的人參皂苷Rb1含量進(jìn)行預(yù)測(cè)。結(jié)果 人參皂苷Rb1的NIR模型校正均方根偏差為0.0247，預(yù)測(cè)均方根偏差為0.0282，決定系數(shù)為0.9533，采用驗(yàn)正集樣品進(jìn)行外部驗(yàn)證，偏差為3.49%。結(jié)論 AOTFNIR快速分析法對(duì)人參皂苷Rb1含量預(yù)測(cè)結(jié)果較好，為精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1快速定量分析提供了新方法。

聲光可調(diào)近紅外光譜技術(shù)；精芪雙參膠囊；人參皂苷Rb1

精芪雙參膠囊具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、活血化瘀、養(yǎng)心安神功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明人參皂苷Rb1對(duì)心血管系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用，并對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用，該膠囊作為改善心腦血管疾病的特效藥可能與人參皂苷Rb1含量密切相關(guān)[1]。該產(chǎn)品現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未對(duì)人參皂苷Rb1進(jìn)行質(zhì)量控制，本研究采用聲光可調(diào)近紅外光譜儀，通過AOTF-NIR對(duì)人參皂苷Rb1含量控制方法研究，建立精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量快速測(cè)定新方法，以期為成品快速定量分析提供有效方法[2]。

本研究采用HPLC與NIR進(jìn)行關(guān)聯(lián)快速檢測(cè)成品人參皂苷Rb1含量，HPLC方法參考15年版《中華人民共和國(guó)藥典》人參皂苷檢測(cè)項(xiàng)并對(duì)提取方法進(jìn)行了優(yōu)化，進(jìn)行了方法學(xué)考察，結(jié)果表明超聲提取方法優(yōu)于索氏提取方法，方法學(xué)良好，大大節(jié)約了含測(cè)時(shí)間。

1 儀器與材料

近紅外光譜分析儀L u m i n a r-5 0 3 0購(gòu)買于美國(guó)BRIMROSE，高效液相色譜儀購(gòu)買于美國(guó)Thermo公司，ACEC18（250×4.6 mm，5 μm）；人參皂苷Rb1對(duì)照品（批號(hào)：120506-170101購(gòu)買于中國(guó)食品藥品檢定研究院）；乙腈購(gòu)買與Fisher為色譜純?cè)噭?/p>

2 實(shí)驗(yàn)步驟

2.1 樣品收集采集與測(cè)定[3]

樣品的采集直接影響模型的預(yù)測(cè)能力[4]，本研究收集65批近3年不同批次的成品，其中60批用于校正、5批用于驗(yàn)證。利用HPLC色譜儀，測(cè)定成品人參皂苷Rb1含量，建立方法如下。

用乙腈（A）及水（B）為流動(dòng)相，按以下梯度進(jìn)行洗脫，流速為1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm。見表1。

表1 人參皂苷Rb1含量測(cè)定高效液相測(cè)定方法

對(duì)照品溶液的制：用甲醇定容人參皂苷Rb1對(duì)照品成1 mL含0.15 mg Rb1的溶液。

供試品溶液：取本品粉末約1 g，精密稱定，置錐形瓶中，加三氯甲烷超聲處理30 min，棄去上清液，藥渣揮干，倒入100 mL錐形瓶中，使用移液管加水飽和正丁醇50 mL，過夜，超聲處理30 min，濾紙濾過，移液管取續(xù)濾液25 mL，使用蒸發(fā)皿蒸干，殘?jiān)褂? mL量瓶定容，搖勻，濾過即得。

進(jìn)樣量為10 μL，進(jìn)行測(cè)定。

2.2 模型建立并驗(yàn)證

關(guān)聯(lián)測(cè)定結(jié)果與預(yù)處理光譜，并使用軟件建立模型，使用校正模型對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)測(cè)。

3 結(jié) 果

3.1 結(jié)果測(cè)定

依據(jù)2.1方法進(jìn)行測(cè)定，對(duì)人參皂苷Rb1進(jìn)行質(zhì)量控制，人參皂苷Rb1含量測(cè)定用平均值計(jì)，色譜圖見圖1，測(cè)定結(jié)果見表2。

表2 精芪雙參膠囊成品人參皂苷Rb1含量測(cè)定含量測(cè)定結(jié)果

圖1 樣品測(cè)定色譜圖

3.2 采集光譜

依據(jù)光譜采集方式，按照3次光譜采集，60個(gè)樣品的總光譜圖見圖2、圖3。

圖2 校正集NIR原始光譜圖4 校正集預(yù)處理光譜

圖3 校正集樣品NIR預(yù)處理光譜

3.3 模型建立與驗(yàn)證

校正模型顯示，模型的主成分維數(shù)為18，R2=0.9800，RMSEC=0.0247，RMSEP=0.0282。得到的樣品實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值相關(guān)性較好，模型較好，PLS模型見圖4。預(yù)測(cè)結(jié)果見表3。

圖4 人參皂苷Rb1含量模型

表3 NIR模型預(yù)測(cè)結(jié)果

結(jié)果可知，通過5批外部驗(yàn)證集樣品中人參皂苷Rb1的HPLC實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值偏差為3.49%，表明該指標(biāo)測(cè)定準(zhǔn)確性較高。

4 討 論

本研究建立了精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量控制方法，HPLC法方法學(xué)良好，為成品質(zhì)量控制增添了新標(biāo)準(zhǔn)，人參皂苷Rb1含量質(zhì)量控制NIR模型具有良好的預(yù)測(cè)性，快速、無損的測(cè)定了成品人參皂苷Rb1含量，完善了精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1快速檢測(cè)體系，為成品生產(chǎn)及質(zhì)量控制節(jié)約了成本。

[1]王一博,肖 丹,李曉宇,戴雨霖,越 皓,劉淑瑩.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)結(jié)合多探針底物法研究人參皂苷Rb1的體外代謝[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào),2015,36(10):1894-1899.[2017-09-28].

[2]何智慧,練文柳,吳名劍,等.聲光可調(diào)-近紅外光譜技術(shù)分析煙草主要化學(xué)成分[J].分析化學(xué),2006,05:702-704.

[3]汪靜靜.不同產(chǎn)地和年限人參樣品皂苷類成分的比較研究[D].安徽中醫(yī)藥大學(xué),2015.

[4]汪靜靜,閆述模,楊 濱.近紅外光譜技術(shù)對(duì)人參藥材人參皂苷含量測(cè)定及產(chǎn)地識(shí)別的研究[J].光譜學(xué)與光譜分析,2015,35(07):1885-18

R927.2

B

ISSN.2095-8242.2017.64.12492.02

吉林省“雙十工程”重大科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目（20150301009YY）

高陸，女，教授

本文編輯：吳玲麗