王文靜 劉伯帥 陳要鵬 孫 驍 肖俊楠 林錦翔 王成章 史瑩華

(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002)

苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腸道菌群、組織抗氧化能力及相關(guān)酶mRNA表達(dá)的影響

王文靜 劉伯帥 陳要鵬 孫 驍 肖俊楠 林錦翔 王成章 史瑩華*

(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002)

本試驗(yàn)旨在研究苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腸道菌群、組織抗氧化能力及相關(guān)酶mRNA表達(dá)的影響。選取24頭平均體重為8 kg的大×長(zhǎng)雜交斷奶仔豬，隨機(jī)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，苜蓿皂苷組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0.25%苜蓿皂苷的飼糧。預(yù)試期10 d，正試期30 d。結(jié)果表明：1)與對(duì)照組相比，飼糧中添加苜蓿皂苷可顯著提高斷奶仔豬平均日增重(P<0.05)，并顯著降低料重比(P<0.05)。2)與對(duì)照組相比，飼糧中添加苜蓿皂苷可顯著降低仔豬十二指腸和盲腸的pH(P<0.05)，顯著提高十二指腸、空腸和回腸中乳酸菌數(shù)量(P<0.05)。3)與對(duì)照組相比，飼糧中添加苜蓿皂苷可顯著提高仔豬肝臟和腎臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)活性(P<0.05)，并顯著提高仔豬肝臟和空腸中GSH-PxmRNA表達(dá)量及十二指腸和回腸中CATmRNA表達(dá)量(P<0.05)。綜上，苜蓿皂苷可以提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)其組織抗氧化能力并有效改善其腸道菌群。

苜蓿皂苷；斷奶仔豬；生長(zhǎng)性能；腸道菌群；抗氧化能力；mRNA表達(dá)量

紫花苜蓿作為世界上種植范圍最廣、種植歷史悠久的牧草主要具有以下優(yōu)點(diǎn)：富含蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素，并且蛋白質(zhì)品質(zhì)較好、氨基酸組成平衡、賴氨酸含量較高。豐富的苜蓿資源包含著很多潛在的活性成分，比如皂苷、黃酮和多糖等物質(zhì)，而皂苷作為一種天然的有獨(dú)特生物學(xué)活性的物質(zhì)，研究表明，其具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗癌以及降血脂等功能。因此，苜蓿皂苷引起了人們的廣泛關(guān)注。武志敏等[1]研究了不同添加量的甜菜堿和苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響，結(jié)果表明甜菜堿和苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)均有顯著影響，且飼糧中添加0.08%甜菜堿與0.25%苜蓿皂苷時(shí)效果最佳。Yalinkilic等[2]用含有皂苷的七葉樹(Aesculushippocastanum)、菠菜(Spinaciaoleracea)和紫花苜蓿提取液來飼喂小鼠，發(fā)現(xiàn)它們可以顯著提高機(jī)體抗氧化能力，保護(hù)細(xì)胞免受X射線的傷害。但是長(zhǎng)期以來人們對(duì)苜蓿的研究大多集中于青干草、草粉等草產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和加工利用方面，其利用也主要以奶牛飼喂為主，而苜蓿皂苷在仔豬飼糧中研究較少。因此，本試驗(yàn)旨在研究苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腸道菌群、組織抗氧化能力和相關(guān)酶mRNA表達(dá)的影響，以期為其在實(shí)際生產(chǎn)中的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用苜蓿皂苷由河北寶恩生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，其中皂苷含量為62.00%、類黃酮含量為10.97%、多糖含量為8.12%、水分含量為7.11%、未知因子含量為11.80%。皂苷多具有吸濕性、味苦、刺激黏膜的特性，一般可溶于水，易溶于熱水、熱甲醇及熱乙醇，不溶于乙醚等極性小的有機(jī)溶劑，大多數(shù)甾體皂苷屬于中性皂苷，多數(shù)三萜皂苷屬于酸性皂苷。而本產(chǎn)品皂苷呈中性，pH為7.04。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧

采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，按照日齡、胎次、體重盡可能一致的原則，選取健康、體重約8.0 kg的大×長(zhǎng)二元雜交仔豬24頭作為試驗(yàn)動(dòng)物，隨機(jī)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，苜蓿皂苷組在對(duì)照組飼糧的基礎(chǔ)上添加0.25%的苜蓿皂苷?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)條件與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)預(yù)試期10 d，正試期30 d。試驗(yàn)豬自由采食和飲水，每天飼喂4次，飼喂時(shí)間定在每天06:00、10:00、14:00和18:00。預(yù)試期間各組飼喂相同的基礎(chǔ)飼糧，正試期間對(duì)照組與苜蓿皂苷組分別飼喂基礎(chǔ)飼糧與試驗(yàn)飼糧，并做好每天采食量和健康狀況的記錄。豬舍溫度控制在25 ℃左右，相對(duì)濕度在65%～75%，每天清掃1次圈舍并按照豬場(chǎng)常規(guī)免疫規(guī)程進(jìn)行免疫與消毒。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食(自由飲水)12 h后稱量仔豬體重，計(jì)算各組ADFI、ADG及F/G。

腹瀉率(%)=100×[(每天腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù))/(試驗(yàn)豬頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))]。

1.4 樣品采集

分別各選取對(duì)照組和苜蓿皂苷組仔豬6頭(每個(gè)重復(fù)2頭)進(jìn)行頸靜脈放血致死，隨后剖開腹腔，分離腸道(取相同部位十二指腸、空腸、回腸和盲腸并結(jié)扎各個(gè)腸段)收集內(nèi)容物，一部分進(jìn)行微生物測(cè)定(大腸桿菌和乳酸菌)，另一部分進(jìn)行pH測(cè)定。隨后在仔豬的肝臟、脾臟和腎臟同一部位采樣，并截取其十二指腸、空腸、回腸和盲腸。先用生理鹽水沖洗，再用干紗布蘸干水分，記錄后用錫箔紙包扎，立即放入液氮速凍，轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱保存。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 pH的測(cè)定

采用pH儀直接測(cè)定十二指腸、空腸、回腸和盲腸內(nèi)容物的pH。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供Premix provided the following per kg of diet：VA 5 500 IU，VD3500 IU，VE 66.1 IU，VB1228.2 μg，VB25.1 mg，VB312.6 mg，VB529.8 mg，膽堿 choline 540 mg，Mn 40 mg，Zn 120 mg，F(xiàn)e 130 mg，Cu 150 mg，Co 1 mg，Se 0.25 mg，I 4.5 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。Nutrient levels were calculated values.

1.5.2 腸道中大腸桿菌和乳酸菌的測(cè)定

腸道內(nèi)容物稀釋液的制備：將采集的腸道內(nèi)容物混勻后，在無菌條件下取0.5 g，放于盛有4.5 mL無菌生理鹽水的l號(hào)試管中，隨后在漩渦振蕩器上振蕩20 min，另準(zhǔn)備滅菌過的試管5只，每支試管盛有無菌生理鹽水4.5 mL，然后從l號(hào)試管取0.5 mL加入2號(hào)試管振蕩5 min，依次稀釋到10-6。

大腸桿菌和乳酸菌的接種與培養(yǎng)：大腸桿菌和乳酸菌分別采用伊紅美藍(lán)(EMB)和MRS培養(yǎng)基平板進(jìn)行培養(yǎng)，采用菌落記數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。選擇3個(gè)合適的稀釋度，并各設(shè)置2個(gè)重復(fù)。從高稀釋度開始，在酒精燈附近進(jìn)行操作，用移液槍吸取100 μL混勻的稀釋液在各選擇性培養(yǎng)基上方2～3 cm處滴下，并用曲玻棒推勻。大腸桿菌置于37 ℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后進(jìn)行菌落記數(shù)。乳酸菌放在二氧化碳(CO2)生化培養(yǎng)箱中37 ℃厭氧培養(yǎng)48 h后進(jìn)行菌落記數(shù)。計(jì)算出每克樣品所含菌數(shù)，結(jié)果以每克腸道內(nèi)容物中細(xì)菌數(shù)量的對(duì)數(shù)[lg(CFU/g)]表示。

1.5.3 組織抗氧化能力的測(cè)定

稱取肝臟、腎臟和脾臟0.3～0.5 g，放入小燒杯(置于冰水浴中)。用移液槍吸取事先預(yù)冷好的0.9%生理鹽水，使組織和生理鹽水的比為1∶9(質(zhì)量體積比)，用剪刀快速剪碎組織塊，之后放于玻璃勻漿器中，在裝有冰水混合物的容器中研磨6～10 min，使所取樣本充分勻漿化。將制備好的組織勻漿在3 500 r/min離心15 min，小心吸取上清液分裝，隨后放于低溫冰箱中。最后按照南京建成生物工程研究所說明書測(cè)定組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、過氧化氫酶(CAT)活性、總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。

1.6 肝臟、十二指腸、空腸和回腸中SOD、GSH-Px及CAT mRNA表達(dá)的測(cè)定

1.6.1 引物設(shè)計(jì)

以GenBank中豬SOD、GSH-Px、CATDNA序列作為模板，以磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)作為內(nèi)參基因，運(yùn)用Primer 5.0設(shè)計(jì)引物。設(shè)計(jì)好的引物交由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。引物干粉在使用前先12 000 r/min離心1 min，然后再按照管上標(biāo)明比例加入ddH2O，稀釋成濃度為100 μmol/L的工作液，置于-20 ℃保存。引物序列及參數(shù)見表2。

表2 引物序列及參數(shù)

1.6.2 總RNA的抽提與檢測(cè)

取適量的組織經(jīng)液氮研磨后，用Trizol法抽提總RNA并測(cè)定RNA樣品的濃度和純度，所有樣品吸光度比值在1.8～2.0，說明其純度滿足分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求。將上述總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，反應(yīng)采用10 μL體系，反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6.3 RT-PCR擴(kuò)增

SOD、GSH-Px和CATmRNA表達(dá)分析采用RT-PCR熒光染料法測(cè)定，配制20 μL體系，具體操作參見試劑盒說明書，每個(gè)樣品3個(gè)重復(fù)。循環(huán)條件：95 ℃預(yù)變性60 s，95 ℃變性10 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸20 s，40個(gè)循環(huán)。以內(nèi)參基因GAPDH表達(dá)量為參比，目的基因表達(dá)量以2-△△Ct法表示。

1.7 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，以P<0.05表示差異顯著，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”方式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響

由表3可知，飼糧中添加苜蓿皂苷提高了斷奶仔豬的ADFI，降低了腹瀉率，但差異不顯著(P>0.05)；苜蓿皂苷組ADG較對(duì)照組顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)/G顯著降低(P<0.05)。

表3 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬腸道pH及菌群的影響

由表4可知，飼糧中添加苜蓿皂苷顯著降低了仔豬十二指腸和盲腸的pH(P<0.05)，對(duì)仔豬空腸和回腸的pH沒有顯著影響(P>0.05)；飼糧中添加苜蓿皂苷降低了仔豬十二指腸、空腸、回腸和盲腸中的大腸桿菌數(shù)，但差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組相比，苜蓿皂苷組仔豬十二指腸、空腸和回腸中乳酸菌數(shù)均顯著增加(P<0.05)，盲腸中該菌數(shù)有所增加，但差異不顯著(P>0.05)。

表4 苜蓿皂甙對(duì)斷奶仔豬腸道pH及菌群的影響

2.3 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬組織抗氧化能力的影響

由表5可知，飼糧中添加苜蓿皂苷降低了仔豬肝臟、腎臟和脾臟中MDA的含量，提高了SOD活性和T-AOC，但差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組相比，苜蓿皂苷組仔豬肝臟和腎臟中GSH-Px活性顯著提高(P<0.05)，脾臟中GSH-Px活性有所降低，但差異不顯著(P>0.05)；苜蓿皂苷組仔豬肝臟、腎臟和脾臟中CAT活性均高于對(duì)照組，其中肝臟和腎臟中CAT活性顯著提高(P<0.05)。

2.4 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬組織中SOD、GSH-Px和CAT mRNA表達(dá)的影響

由表6可知，飼糧中添加苜蓿皂苷對(duì)仔豬肝臟、十二指腸、空腸和回腸中SODmRNA的表達(dá)量沒有顯著影響(P>0.05)；飼糧中添加苜蓿皂苷顯著提高了仔豬肝臟和空腸中GSH-PxmRNA的表達(dá)量(P<0.05)，而對(duì)十二指腸和回腸中此基因的表達(dá)量無顯著影響(P>0.05)；與對(duì)照組相比，苜蓿皂苷組仔豬十二指腸和回腸中CATmRNA的表達(dá)量顯著提高(P<0.05)，肝臟和空腸中CATmRNA的表達(dá)量有提高趨勢(shì)(P>0.05)。

表5 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬組織抗氧化能力的影響

表6 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬組織中SOD、GSH-Px和CAT mRNA表達(dá)的影響

3 討 論

3.1 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的影響

多年來關(guān)于苜蓿皂苷對(duì)家畜生長(zhǎng)性能研究的結(jié)果不完全一致，這可能是由于動(dòng)物種類、生理狀況以及苜蓿皂苷提取部位的不同導(dǎo)致的。徐兵[3]研究表明飼糧中添加苜蓿皂苷可提高斷奶仔豬ADFI和ADG。曹亞男[4]研究了紫花苜蓿草粉對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響，結(jié)果表明試驗(yàn)組仔豬的ADG高于對(duì)照組。侯永剛等[5]在蛋雞飼糧中添加30、60和90 mg/kg的苜蓿皂苷后發(fā)現(xiàn)，蛋雞的產(chǎn)蛋率及蛋重均高于對(duì)照組，F(xiàn)/G也有一定程度的降低。王彥華等[6]研究表明，一定比例的苜蓿皂苷添加量(0.25%～0.50%)可以提高仔豬的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加苜蓿皂苷提高了斷奶仔豬的ADFI，降低了腹瀉率；苜蓿皂苷組ADG較對(duì)照組顯著提高，F(xiàn)/G顯著降低。說明飼糧中加入適量苜蓿皂苷可以提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，降低其腹瀉率。

3.2 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬腸道pH及菌群的影響

動(dòng)物腸道內(nèi)的pH是影響微生物生存繁衍的重要因素，也是維持消化酶分泌及活性的主要因子，因此穩(wěn)定、適宜的腸道pH是維持消化道健康、保證其正常發(fā)揮消化吸收功能的重要因素之一。有研究報(bào)道稱，斷奶仔豬腸道pH偏高，不僅會(huì)對(duì)小腸段消化酶的活性產(chǎn)生不利影響，且易導(dǎo)致病原菌的大量增殖，最終引起仔豬腹瀉的發(fā)生。Lupton等[7]和Kashiwagura等[8]報(bào)道，pH能影響細(xì)胞的發(fā)育，胞內(nèi)pH的改變能誘導(dǎo)其分裂，進(jìn)而促進(jìn)DNA的生成，較低的pH有利于保持腸黏膜完整的形態(tài)結(jié)構(gòu)并促進(jìn)黏膜細(xì)胞的增殖。在本試驗(yàn)中，苜蓿皂苷顯著降低了仔豬十二指腸和盲腸pH。這可能是由于苜蓿皂苷促進(jìn)了仔豬腸道中胃酸和消化液的分泌，而使pH降低；也可能是由于苜蓿皂苷對(duì)腸道乳酸菌具有較高的增強(qiáng)作用，而導(dǎo)致腸道pH的降低。

動(dòng)物腸道的微生態(tài)系統(tǒng)能否達(dá)到一個(gè)均衡的狀態(tài)，將在很大程度上影響到腸道正常生理及整個(gè)機(jī)體的新陳代謝。腸道中大腸桿菌數(shù)量的減少可以降低仔豬腹瀉和其他胃腸道疾病的發(fā)生[9]。乳酸菌等有益菌可通過其代謝產(chǎn)物及分泌的一些抗菌活性物，在機(jī)體抵擋病原菌侵襲的防御系統(tǒng)中發(fā)揮作用[10]。有研究報(bào)道稱植物皂苷類成分具有抑菌活性[11-12]。金秋等[13]研究稱無患子總皂苷對(duì)大腸桿菌具有很強(qiáng)的抑菌活性。薔薇根總皂苷對(duì)大腸桿菌也有不同程度的抑制作用[14]。曾有研究顯示五環(huán)三萜類柴胡皂苷單體Bp3對(duì)白念珠菌氟康唑耐藥株有不同程度的抑菌作用[15]。李波等[16]研究表明經(jīng)苜蓿皂苷提取液處理后，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的生長(zhǎng)均會(huì)受到一定的抑制。武志敏[17]研究了在斷奶仔豬飼糧中添加一定量的苜蓿皂苷，結(jié)果表明在腸道微生物方面，與對(duì)照組相比，苜蓿皂苷對(duì)大腸桿菌有顯著的抑制作用，對(duì)沙門桿菌也有一定的抑制作用，在一定程度上降低了仔豬腹瀉率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，苜蓿皂苷對(duì)仔豬腸道大腸桿菌有輕微抑制增殖的作用，對(duì)腸道乳酸菌則有一定的促進(jìn)增長(zhǎng)的作用，說明苜蓿皂苷可能具有維持腸道微生態(tài)平衡的作用。

3.3 苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬組織抗氧化能力及相關(guān)酶mRNA表達(dá)的影響

抗氧化是生物體免受自由基損傷的一種自我保護(hù)機(jī)能，抗氧化酶可以增強(qiáng)機(jī)體的防御和免疫能力，其活力大小可以反映機(jī)體氧化-抗氧化的狀況[18]。適當(dāng)濃度的活性氧含量是機(jī)體抵抗某些有害菌、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等許多代謝過程不可缺少的[19]。正常生理情況下機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況與自由基的含量之間也保持著動(dòng)態(tài)平衡，一旦該平衡遭到破壞，自由基的產(chǎn)生就會(huì)增多，造成機(jī)體細(xì)胞的氧化損傷[20]。MDA是機(jī)體脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物；GSH-Px可反映出機(jī)體清除氧自由基的能力，是機(jī)體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)的主要組成部分；SOD是生物機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的一種可以保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整和功能健全的酶[21]。CAT作為一類廣泛分布在生物機(jī)體的氧化酶，可以促進(jìn)過氧化氫(H2O2)分解，進(jìn)而起到保護(hù)細(xì)胞免受自由基損害的作用[22]。T-AOC作為一個(gè)顯示生物體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合指標(biāo)，體現(xiàn)了機(jī)體內(nèi)多種抗氧化酶共同作用的效果[23]。采取增加外源性抗氧化物質(zhì)或者提高機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性的抗氧化物質(zhì)能力的方法，可以削弱自由基對(duì)細(xì)胞膜的損傷，從而達(dá)到有效清除自由基的目的[24]。

目前的很多試驗(yàn)都證明，大多數(shù)皂苷具有一定的抗氧化能力[25]。劉寶劍等[26]研究稱人參皂苷具有提高抗氧化酶活性，在一定程度上減緩誘導(dǎo)小鼠肺氧化損傷的作用。史瑩華等[27]研究稱，苜蓿皂苷可顯著提升仔豬組織中GSH-Px和SOD的活性，并能有效降低MDA含量。孫延芳等[28]通過體外抗氧化反應(yīng)發(fā)現(xiàn)酸棗果三萜皂苷能夠清除二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基，具有顯著的抗氧化效應(yīng)。管福琴等[29]研究發(fā)現(xiàn)一種五環(huán)三萜皂苷類化合物對(duì)DPPH自由基和羥自由基表現(xiàn)出了很強(qiáng)的清除能力。黃玉珊等[30]研究表明大豆苷元可以誘導(dǎo)大鼠心、腦、肝組織中SOD的表達(dá)，提高機(jī)體清除自由基的活性，并顯著降低組織中MDA的含量。在本試驗(yàn)中，苜蓿皂苷降低了仔豬肝臟、腎臟和脾臟中MDA的含量，提高了T-AOC和SOD活性；苜蓿皂苷組肝臟和腎臟中GSH-Px和CAT活性顯著高于對(duì)照組；并且苜蓿皂苷顯著提高了斷奶仔豬十二指腸和回腸中CATmRNA的表達(dá)量以及肝臟和空腸中GSH-PxmRNA的表達(dá)量。表明苜蓿皂苷能夠增強(qiáng)機(jī)體對(duì)自由基的清除或削弱自由基的產(chǎn)生能力，提高機(jī)體的組織抗氧化能力。

4 結(jié) 論

苜蓿皂苷可以提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和組織抗氧化能力，調(diào)節(jié)其腸道微生物區(qū)系，促進(jìn)腸道健康。

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EffectsofAlfalfaSaponinonGrowthPerformance,IntestinalMicroflora,AntioxidantAbilityandRelatedEnzymemRNAExpressioninTissuesofWeanedPiglets

WANG Wenjing LIU Boshuai CHEN Yaopeng SUN Xiao XIAO Junnan LIN Jinxiang WANG Chengzhang SHI Yinghua*

(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,HenanAgriculturalUniversity,Zhengzhou450002,China)

The experiment was conducted to study to the effects of alfalfa saponin on growth performance, intestinal microflora, antioxidant ability and related enzyme mRNA expression in tissues of weaned piglets. A total of 24 crossed-bred (Landrace×Large White) piglets with an average body weight of 8 kg were randomly assigned to 2 groups with 3 replicates each and 4 piglets in each replicate. The piglets in control group were fed a basal diet, and in alfalfa saponin group were fed the basal diet supplemented with 0.25% alfalfa saponin. The experiment lasted for 30 days after 10 days pre-experiment. The results showed as follows: 1) compared with control group, dietary alfalfa saponin significantly increased average daily gain (P<0.05) and significantly decreased the ratio of feed to gain (P<0.05) of weaned piglets. 2) Compared with control group, dietary alfalfa saponin significantly reduced pH in duodenum and cecum (P<0.05), significantly increased the numbers ofLactobacillusin duodenum, jejunum and cecum (P<0.05) of piglets. 3) Compared with control group, dietary alfalfa saponin significantly increased the activity of glutathion peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) in liver and kidney (P<0.05), and significantly improved the mRNA expression level ofGSH-Pxin liver and jejunum as well as the mRNA expression level ofCATin duodenum and ileum (P<0.05) of piglets. In summary, dietary alfalfa saponin can enhance growth performance of weaned piglets, improve antioxidant ability in tissues and have a good benefit on intestinal microflora.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(12)：4469-4476]

alfalfa saponin; weaned piglet; growth performance; intestinal microflora; antioxidant ability; mRNA expression level

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.12.027

S816.7

A

1006-267X(2017)12-4469-08

2017-05-18

苜蓿品種引進(jìn)與中低產(chǎn)田土壤生態(tài)環(huán)境修復(fù)(2015-Z46)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-35)

王文靜(1994—)，女，河南商丘人，碩士研究生，從事牧草營(yíng)養(yǎng)與利用研究。E-mail： 2650220312@qq.com

*通信作者:史瑩華，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail： annysh@126.com

*Corresponding author, professor, E-mail: annysh@126.com

(責(zé)任編輯 田艷明)