彭麗萍

[摘要]目的 觀察伴有DNMT3A基因突變與不伴有DNMT3A基因突變的MDS患者應(yīng)用地西他濱治療的效果。方法 將2013年1月～2017年6月于我院接受治療的20例伴有DNMT3A基因突變的MDS患者作為研究組，抽取同期接受治療但不存在DNMT3A基因突變的20例MDS患者作為對照組，均接受地西他濱治療，觀察兩組患者接受地西他濱治療后的病情改善情況。結(jié)果 研究組的臨床總有效率（65%）顯著高于對照組（35%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。研究組患者治療前的DNMT3A基因表達(dá)顯著高于對照組（P<0.05），經(jīng)過治療后研究組的DNMT3A基因表達(dá)顯著下降（P<0.05）。兩組患者的藥物不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 地西他濱用于伴有DNMT3A基因突變的MDS患者治療，可以取得較好的治療效果，針對伴有DNMT3A基因突變的MDS患者可優(yōu)先選擇地西他濱進(jìn)行治療。

[關(guān)鍵詞]DNMT3A基因突變；骨髓增生異常綜合征；地西他濱；去甲基化藥物

[中圖分類號] R551.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）11（c）-0045-03

Clinical study of Decitabine in the treatment of myelodysplastic syndrome accompanied with DNMT3A gene mutation

PENG Li-ping

Department of Hematopathology，People′s Hospital of Pingxiang City in Jiangxi Province，Pingxiang 337000，China

[Abstract]Objective To observe the effect of Decitabine in the treatment of myelodysplastic syndrome （MDS） patients with or without DNMT3A gene mutation.Methods From January 2013 to June 2017，20 MDS patients with DNMT3A gene mutation received treatment in our hospital were selected as the research group.Meanwhile，20 MDS patients without DNMT3A gene mutation was selected as the control group.All patients were treated with Decitabine，and the improvement of the two groups of patients after receiving capecitabine treatment was observed.Results The total clinical effectiveness rate was 65% in the research group，which was significantly higher than that in the control group （35%），with significant difference （P<0.05）.Before treatment，DNMT3A gene expression in the research group was greatly higher than that in the control group （P<0.05），and the expression of DNMT3A after treatment was markedly decreased （P<0.05）.There was no significant difference in the incidence rate of adverse drug reactions between the two groups （P>0.05）.Conclusion Decitabine in the treatment of MDS with DNMT3A gene mutation can obtain a great effect.For MDS patients with DNMT3A gene mutation，Decitabine is a preferred choice for the treatment.

[Key words]DNMT3A gene mutation；Myelodysplastic syndrome；Decitabine；Demethylation drug

骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndrome，MDS）是一種發(fā)病于造血干細(xì)胞，可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為急性白血病的惡性血液系統(tǒng)疾病，臨床檢查患者主要以骨髓造血功能失效或造血干細(xì)胞異常增生為主，患者骨髓細(xì)胞增生、紅細(xì)胞下降、幼稚細(xì)胞與成熟細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)異常[1-2]。隨著臨床對腫瘤基因表達(dá)研究的逐漸深入，發(fā)現(xiàn)DNA甲基化異常參與MDS的發(fā)病與進(jìn)程，DNMT3A是其甲基化進(jìn)程中關(guān)鍵的基因表達(dá)標(biāo)志物之一，在MDS的發(fā)病、病情進(jìn)展與預(yù)后效果評估中均有著重要作用[3-4]。地西他濱是FDA于2006年批準(zhǔn)用于治療MDS的去甲基化藥物，自批準(zhǔn)上市以來，在治療MDS過程中的作用療效已獲得臨床醫(yī)生的認(rèn)可[5]。本研究選取我院收治的伴有DNMT3A基因突變的MDS患者作為研究對象，旨在觀察對伴有DNMT3A基因突變的MDS患者應(yīng)用地西他濱治療的效果，現(xiàn)報道如下。endprint

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2017年6月在我院接受治療的20例伴有DNMT3A基因突變的MDS患者作為研究對象，臨床檢查行骨髓細(xì)胞學(xué)及病理組織檢查，同時聯(lián)合染色體核型分析與流式細(xì)胞學(xué)檢查，臨床診斷均符合MDS相關(guān)確診標(biāo)準(zhǔn)，且均伴有DNMT3A基因突變，其中男9例，女11例；年齡18～62歲，平均（37.54±7.73）歲。抽取同期接受治療但不存在DNMT3A基因突變的20例MDS患者作為對照組，男11例，女9例；年齡20～60歲，平均（37.47±7.68）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并患有肝、腎、心臟等重要器官組織嚴(yán)重疾病患者；有腫瘤病史、急性非淋巴細(xì)胞白血?。ˋML）或接受過地西他濱、阿扎胞苷治療者；合并精神疾病或神經(jīng)系統(tǒng)等存在溝通障礙疾病者。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，入選患者均知情同意此次研究，兩組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

注明PCR具體方法，補充PCR反應(yīng)體系、條件，補充實驗涉及的主要儀器及試劑的生產(chǎn)商、型號等。

1.2.1 PCR擴(kuò)增 患者禁食12 h后，于次日早晨靜臥1 h平靜后，采靜脈血（抽取5 ml肘靜脈血），置于未加抗凝劑的潔凈玻璃試管內(nèi)，提取血液標(biāo)本基因組DNA后，置于-20℃冰箱中凍存。使用PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行梯度PCR擴(kuò)增，引物設(shè)計由Mass ARRAY Assay Design 4.0 Software軟件進(jìn)行，反應(yīng)體系如表1。反應(yīng)條件：首先在50℃條件下反應(yīng)1 min，將溫度升高至95℃之后將DNA鏈變性30 s，然后將反應(yīng)溫度設(shè)置為56～60℃持續(xù)50 s，第三步將DNA鏈?zhǔn)骄酆厦冈?2℃的反應(yīng)溫度條件下反應(yīng)30 s合成互補鏈，總共進(jìn)行了35個循環(huán)。

1.2.2治療方法 給予患者地西他濱（正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字 H20143382，產(chǎn)品規(guī)格：50 mg）進(jìn)行治療，每天1次，每次給予20 mg/m2地西他濱靜脈滴注1 h，連續(xù)給藥治療5 d，此為1個治療周期，每隔4周重復(fù)用藥進(jìn)行治療，連續(xù)接受4個周期治療。此外，經(jīng)患者同意留取治療前后患者骨髓液標(biāo)本，利用PCR法對DNMT3A基因表達(dá)以及MDS甲基化程度進(jìn)行分析檢測，治療期間如出現(xiàn)體溫>39℃，行病原學(xué)檢測并給予抗生素進(jìn)行治療；血紅蛋白<60 g/L，給予輸注紅細(xì)胞懸液；血小板<20×109/L或有出血表現(xiàn)時輸注血小板。

1.3觀察指標(biāo)

觀察兩組患者接受地西他濱治療后病情改善情況，對比分析地西他濱在治療伴有DNMT3A基因突變MDS患者的療效。療效依據(jù)MDS國際工作組（簡稱IWG）推行的2006版評估標(biāo)準(zhǔn)，將各組患者臨床療效分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、穩(wěn)定（SD）、疾病進(jìn)展（PD）4項，總有效率（ORR）=（CR+PR+SD）例數(shù)/總例數(shù)×100%[6]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組MDS患者經(jīng)地西他濱治療療效評估

研究組伴有DNMT3A基因突變的MDS患者經(jīng)地西他濱治療后，13例患者的臨床癥狀以及血液學(xué)得到顯著改善或穩(wěn)定，有7例患者血細(xì)胞數(shù)量顯著降低，病情進(jìn)一步加重，治療失敗，其中4例患者血細(xì)胞數(shù)量顯著減少，輸血次數(shù)、輸血量明顯增加，3例患者短期病情進(jìn)展為AML，預(yù)后極差，其中有2例患者分別死于顱內(nèi)出血、重癥肺炎，其臨床總有效率為65%；對照組經(jīng)地西他濱治療后7例患者的臨床癥狀與血液學(xué)均得到顯著改善或穩(wěn)定，有13例患者血細(xì)胞數(shù)量顯著降低，病情進(jìn)一步加重，治療失敗，其中8例患者血細(xì)胞數(shù)量顯著減少，輸血次數(shù)、輸血量明顯增加，5例患者短期病情進(jìn)展為AML，預(yù)后極差，其中有2例患者分別死于顱內(nèi)出血、重癥肺炎，其臨床總有效率為35%。研究組的臨床總有效率（65%）顯著高于對照組（35%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

2.2兩組MDS患者治療前后DNMT3A基因表達(dá)的比較

研究組患者治療前的DNMT3A基因表達(dá)顯著高于對照組（P<0.05），經(jīng)過治療后研究組的DNMT3A基因表達(dá)顯著下降（P<0.05），對照組治療前后的DNMT3A基因表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）

2.3兩組患者不良反應(yīng)情況的比較

兩組患者治療期間骨髓抑制持續(xù)時間及感染、肝腎損傷、胃腸道反應(yīng)、口腔黏膜炎等的發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）

3討論

在MDS病情進(jìn)展期間患者極易因出血、感染等情況死亡，晚期可惡化發(fā)展為白血病，高危MDS患者有極高的風(fēng)險惡化發(fā)展成AML，一旦惡化發(fā)展為AML，常規(guī)化療療效不佳，且存在副作用明顯，極易發(fā)生嚴(yán)重不良并發(fā)癥，患者有較高的死亡率[7]。臨床關(guān)于MDS的發(fā)病原因尚不明確，有研究報道顯示，DNA甲基化異常導(dǎo)致抑癌基因沉默失活與MDS發(fā)病有著密切關(guān)系[8]，而且，目前對于MDS發(fā)病相關(guān)突變基因的研究逐漸成為國內(nèi)外臨床醫(yī)生關(guān)注的熱點之一[9]。

DNMT3A基因突變是近年來在MDS患者中發(fā)現(xiàn)的與表觀遺傳調(diào)節(jié)有關(guān)的突變，該基因的突變影響DNA甲基化水平，因此該基因突變可能在MDS患者發(fā)病過程中起著非常重要的作用[10-13]。地西他濱是與5-氮雜胞嘧啶相似的2-脫氧胞苷類似物，是一種甲基化抑制劑，可逆轉(zhuǎn)DNA的甲基化過程，從而使許多失活的基因重新表達(dá)[13]，自批準(zhǔn)用于治療MDS、AML等惡性血液病后，取得了一定臨床療效，自2009年8月于國內(nèi)上市后，逐步被應(yīng)用于血液腫瘤的治療，且在治療MDS時可獲得40%～60%的臨床療效[14-15]，但這部分MDS患者是否存DNMT3A基因突變，目前這方面的臨床觀察較少。本研究結(jié)果顯示，研究組的臨床總有效率（65%）顯著高于對照組（35%）（P<0.05），研究組患者治療前的DNMT3A基因表達(dá)顯著高于對照組（P<0.05），研究組治療后的DNMT3A基因表達(dá)顯著下降（P<0.05），兩組患者的藥物不良反應(yīng)發(fā)生率無明顯差異（P>0.05），兩組患者的藥物不良反應(yīng)發(fā)生率比較無明顯差異（P>0.05），提示地西他濱用于伴有DNMT3A基因突變的MDS患者療效比不伴有DNMT3A基因突變的MDS患者效果更佳。endprint

綜上所述，地西他濱用于伴有DNMT3A基因突變的MDS患者治療，可以取得較好的治療效果，針對伴有DNMT3A基因突變的MDS患者可優(yōu)先選擇地西他濱進(jìn)行治療。

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（收稿日期：2017-09-05 本文編輯：祁海文）endprint