潘 城，胡朝陽(yáng)*，吳 凌，謝 勇，黃永輝

高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中異菌脲殘留量的不確定度分析

潘 城，胡朝陽(yáng)*，吳 凌，謝 勇，黃永輝

（國(guó)家加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（福州），福建省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，福建 福州 350002）

采用高效液相色譜法對(duì)蔬菜中異菌脲殘留量的不確定度進(jìn)行評(píng)估。根據(jù)JJF 1135—2005《化學(xué)分析測(cè)量不確定度評(píng)定》和JJF 1059.1—2012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》中的有關(guān)規(guī)定，建立測(cè)定蔬菜中異菌脲殘留量不確定度的數(shù)學(xué)模型，逐層對(duì)不確定度來源進(jìn)行分析。通過對(duì)不確定度分量進(jìn)行量化和合成，得出當(dāng)蔬菜中異菌脲殘留量為5.31 mg/kg時(shí)，其擴(kuò)展不確定度為0.40 mg/kg（k=2）。結(jié)果表明，影響檢測(cè)結(jié)果的主要因素為標(biāo)準(zhǔn)溶液配制、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合和測(cè)量重復(fù)性等。

高效液相色譜法；蔬菜；異菌脲；不確定度

異菌脲作為一種廣譜性觸殺型保護(hù)性殺菌劑，廣泛用于果蔬病害防治及貯藏保鮮。據(jù)報(bào)道異菌脲在果蔬及土壤中半衰期較長(zhǎng)，消解速度較慢[1-2]，易導(dǎo)致其在果蔬上殘留量不斷增加。我國(guó)2014年新制定的食品中農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定香蕉、番茄、黃瓜中異菌脲的最大殘留限量值分別為10、5、2 mg/kg[3]。日本、美國(guó)和歐盟也制定了其在水果、蔬菜和糧食中的最大殘留限量值，并對(duì)其殘留量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，同時(shí)加拿大2016年也開始擬禁用異菌脲。果蔬樣品基質(zhì)成分復(fù)雜，前處理過程操作繁瑣，農(nóng)藥殘留分析難度大，為了確保檢測(cè)結(jié)果的可信度，必須進(jìn)行測(cè)量不確定度的評(píng)定。目前報(bào)道的異菌脲檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法[4-11]、氣相色譜法[12-15]、液相色譜-質(zhì)譜法[16-20]、氣相色譜-質(zhì)譜法[21-28]，而有關(guān)異菌脲的色譜方法尤其是高效液相色譜法檢測(cè)的不確定度評(píng)價(jià)方法研究鮮見報(bào)道。

測(cè)量不確定度是表征合理地賦予被測(cè)量之值的分散性，與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)[29]，其數(shù)值的大小反映了測(cè)量結(jié)果質(zhì)量的高低，并直接與檢驗(yàn)結(jié)果的合格判定相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)參照J(rèn)JF 1135—2005《化學(xué)分析測(cè)量不確定度評(píng)定》[30]和JJF 1059.1—2012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》[31]，通過NY/T 1277—2007《蔬菜中異菌脲殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》[32]評(píng)定蔬菜中異菌脲殘留檢測(cè)的不確定度，以期為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制提供科學(xué)、準(zhǔn)確的依據(jù)，同時(shí)為測(cè)量其他農(nóng)藥殘留量的不確定度評(píng)定提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實(shí)驗(yàn)用蔬菜白菜、黃瓜、番茄 市購(gòu)。

異菌脲標(biāo)準(zhǔn)品（純度為（99.5±0.05）%） 德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司；甲醇、乙腈、丙酮、正己烷（均為色譜純） 山東禹王實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

1260型高效液相色譜儀 美國(guó)Agilent公司；BSA224S-CW電子天平（0.1 mg） 賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 前處理方法

按照NY/T 1277—2007的要求，稱取勻漿試樣10 g（精確至0.01 g）于150 mL燒杯中，加50 mL乙腈，10 000 r/min條件下均質(zhì)1 min，抽濾至裝有3～5 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，靜置1 h，待乙腈相和水相分層。取上層10 mL乙腈提取液至50 mL圓底燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上（水浴溫度45 ℃）濃縮至近干，待凈化。在層析柱中依次加入3 cm高的無(wú)水硫酸鈉、2 g佛羅里硅土和3 cm高的無(wú)水硫酸鈉。用10 mL的丙酮-正己烷溶液（1∶1，V/V）預(yù)淋洗柱子，棄去預(yù)淋液。先用少量丙酮-正己烷溶液（8∶2，V/V）溶解蒸殘物并轉(zhuǎn)移至層析柱中，然后用60 mL的少量丙酮-正己烷溶液（8∶2，V/V）依照少量多次的原則清洗圓底燒瓶并淋洗，全部洗脫液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上（水浴溫度45 ℃）濃縮至近干，氮?dú)獯蹈珊笥?.0 mL甲醇溶解未蒸發(fā)物，過0.45 μm微孔濾膜，待測(cè)。

1.3.2 色譜條件

XB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱溫35 ℃；流動(dòng)相：A為甲醇，B為水，流速：1.0 mL/min；等度洗脫；洗脫程序?yàn)?5% A，洗脫時(shí)間30 min；進(jìn)樣量25 μL；檢測(cè)器：光電二極管陣列檢測(cè)器，波長(zhǎng)218 nm。

1.3.3 數(shù)學(xué)模型的建立

被測(cè)物殘留量X按公式（1）計(jì)算：

式中：X為試樣中被測(cè)物殘留量/（mg/kg）；C為從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣溶液中被測(cè)組分的質(zhì)量濃度/（μg/mL）；V1為提取溶劑總體積/mL；V3為待測(cè)液最終定容體積/mL；V2為提取液分取體積/mL；m為試樣溶液所代表試樣質(zhì)量/g。

2 結(jié)果與分析

2.1 不確定度的來源分析

根據(jù)測(cè)定過程，對(duì)試樣中異菌脲殘留量測(cè)定結(jié)果有影響的不確定度的主要來源進(jìn)行分析如下：1）被測(cè)物質(zhì)量濃度（C）引入的不確定度；2）測(cè)量重復(fù)性產(chǎn)生的不確定度；3）回收率產(chǎn)生的不確定度；4）樣品稱量時(shí)引入的不確定度；5）體積量取產(chǎn)生的不確定度。

2.2 不確定度的評(píng)定

2.2.1 被測(cè)物質(zhì)量濃度（C）引入的不確定度

C的不確定度由標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制對(duì)C的測(cè)量產(chǎn)生的不確定度和由標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的直線求得C時(shí)帶來的不確定度兩部分組成。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制又分為儲(chǔ)備液的配制、儲(chǔ)備液的稀釋以及標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制3 個(gè)過程。

2.2.1.1 儲(chǔ)備液配制過程產(chǎn)生的不確定度u（C-1）

準(zhǔn)確稱取26.0 mg異菌脲標(biāo)準(zhǔn)品（純度為（99.5±0.05）%），用甲醇溶解并定容至25 mL，得到質(zhì)量濃度為1 035 μg/mL的儲(chǔ)備液。

標(biāo)準(zhǔn)品純度引入的不確定度：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)證書，多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品的純度誤差為±0.05%，按照均勻分布計(jì)算，由純度引入的不確定度和相對(duì)不確定度分別為：

標(biāo)準(zhǔn)品稱量引入的不確定度：據(jù)鑒定證書，實(shí)驗(yàn)所用天平最大允許誤差為±0.1 mg，按照均勻分布計(jì)算，由稱量標(biāo)準(zhǔn)品引入的不確定度和相對(duì)不確定度分別為：

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液定容體積引入的不確定度：JJG 196—2006《常用玻璃量器》[33]規(guī)定，20 ℃時(shí)25 mL A級(jí)單標(biāo)容量瓶容量允差為±0.03 mL，按矩形分布計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為實(shí)驗(yàn)室的溫度為（20±5）℃，甲醇的體積膨脹系數(shù)為1.1×10-3℃-1，假設(shè)溫度波動(dòng)呈均勻分布，k=，故25 mL容量瓶由溫度引起的體積不確定度為

25 mL容量瓶定容體積的相對(duì)合成不確定度為：

由儲(chǔ)備液配制所產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

2.2.1.2 儲(chǔ)備液稀釋過程產(chǎn)生的不確定度urel（C-2）

用1 mL單標(biāo)線吸量管移取儲(chǔ)備液1 mL于10 mL容量瓶（A級(jí)）中，用甲醇定容至刻度，搖勻，得到質(zhì)量濃度為104 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（1∶10稀釋）。按照均勻分布處理，玻璃器具及溫度波動(dòng)引入的不確定度見表1。

表1 儲(chǔ)備液稀釋過程中引入的不確定度Table 1 Uncertainty resulting from stock solution dilution

則由儲(chǔ)備液稀釋過程產(chǎn)生的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制過程產(chǎn)生的不確定度u（C-3）

配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，使用5 mL分度吸量管移取5 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（104 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到52.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用1 mL分度吸量管移取1 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（104 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到10.4 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用1 mL分度吸量管移取1 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（52 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到5.20 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用1 mL分度吸量管移取1 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.4 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到1.04 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用2 mL分度吸量管移取1.4 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（5.2 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到0.728 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用1 mL分度吸量管移取0.7 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液（5.2 μg/mL）于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到0.364 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

按照均勻分布處理，玻璃器具及溫度波動(dòng)引入的不確定度見表2。

表2 以甲醇為溶劑標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制過程引入的不確定度Table 2 Uncertainty resulting from standard solution preparation

則由標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制過程引入相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

2.2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合產(chǎn)生的不確定度u（C-4）

分別取以上6 種不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液25 μL重復(fù)測(cè)定3 次，通過Excel軟件得到相應(yīng)的色譜峰面積A，擬合而成的線性回歸方程為A＝B1C＋B0（B0為截距，B1為斜率），測(cè)定數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果如表3所示。取1 個(gè)陽(yáng)性樣品，進(jìn)行3 次重復(fù)檢測(cè)，其測(cè)定結(jié)果見表4，則由標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合所產(chǎn)生的不確定度如式（2）所示：

式中：SR為標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積殘差的標(biāo)準(zhǔn)差，計(jì)算方法為：；n為測(cè)試次數(shù)，本實(shí)驗(yàn)中6 個(gè)質(zhì)量濃度重復(fù)測(cè)定3 次，n=6×3=18；p為對(duì)C0的測(cè)定次數(shù)，p=3；C為標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均質(zhì)量濃度，代入公式（2）則可計(jì)算出u（C-4）=0.10，

則被測(cè)物質(zhì)量濃度C引入的不確定度：

表3 標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果Table 3 Calibration curve fitting

表4 陽(yáng)性樣品測(cè)定結(jié)果Table 4 Results of determination of positive sample

在空白蔬菜試樣中添加5.20 mg/kg的異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)定10 次。重復(fù)測(cè)定的結(jié)果如表5所示，其中白菜中異菌脲平均含量為5.24 mg/kg，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）為0.019 mg/kg，將重復(fù)測(cè)定的平均含量 ，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）結(jié)果分別代入公式和計(jì)算得到重復(fù)測(cè)量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為u（1）=0.006 0；urel（1）=0.001 1。其中黃瓜中異菌脲平均含量為5.16 mg/kg，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）為0.017 mg/kg，將重復(fù)測(cè)定的平均含量，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）結(jié)果分別代入公式，計(jì)算得到重復(fù)測(cè)量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為u（2）=0.005 4；urel（2）=0.001 0。其中番茄中異菌脲平均含量 為5.18 mg/kg，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）為0.012 mg/kg，將重復(fù)測(cè)定的平均含量，標(biāo)準(zhǔn)偏差S（）結(jié)果分別代入公式，計(jì)算得到重復(fù)測(cè)量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為u（3）=0.003 8；urel（3）=0.000 73。則測(cè)量重復(fù)性產(chǎn)生的不確定度：

表5 蔬菜中異菌脲測(cè)定結(jié)果Table 5 Results of determination of iprodione in vegetable samples

2.2.3 回收率產(chǎn)生的不確定度u（R）

測(cè)量回收率結(jié)果列于表5，按A類評(píng)定，則白菜中測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

則黃瓜中測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

則番茄中測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

則測(cè)量重復(fù)性產(chǎn)生的不確定度：

2.2.4 樣品稱量產(chǎn)生的不確定度u（m）

稱取10 g蔬菜樣品，所用天平最大允許誤差為±0.01 g，按照矩形分布s計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為：

2.2.5 體積量取產(chǎn)生的不確定度u（V）

2.2.5.1 提取液總體積產(chǎn)生的不確定度u（V1）

樣品用50 mL單標(biāo)吸量管（溶劑為乙腈）移取V1為50 mL乙腈提取，其體積允許誤差為±0.05 mL，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：由溫度變化產(chǎn)生的乙腈容積變化，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：

則定容時(shí)引入的不確定度為：

2.2.5.2 提取液分取體積產(chǎn)生的不確定度u（V2）

分取用10 mL單標(biāo)吸量管（溶劑為乙腈）移取V2為10 mL乙腈提取，其體積允許誤差為±0.020 mL，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：；由溫度變化產(chǎn)生的乙腈容積變化，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：

則定容時(shí)引入的不確定度為：

2.2.5.3 待測(cè)液定容體積產(chǎn)生的不確定度u（V3）

樣品經(jīng)過提取、凈化后用2 mL分度吸量管（溶劑為甲醇）移取V1為2 mL甲醇溶解蒸殘物，其體積允許誤差為±0.012 mL，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：；由溫度變化產(chǎn)生的甲醇容積變化，按照均勻分布計(jì)算，其不確定度為：

則定容時(shí)引入的不確定度為：

2.2.5.4 儀器進(jìn)樣體積產(chǎn)生的不確定度u（V4）

該液相色譜儀進(jìn)樣針容積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為±1%，按均勻分布，則其相對(duì)不確定度。合成體積量取引入的相對(duì)不確定度為：

2.3 合成不確定度

異菌脲相對(duì)不確定度分量見表6。由公式計(jì)算可得異菌脲的合成不確定度為0.038，計(jì)算公式如下：

表6 異菌脲相對(duì)不確定度分量Table 6 List of relative uncertainty components for iprodione determination

2.4 擴(kuò)展不確定度及結(jié)果表示

依據(jù)JJF 1135—2005，對(duì)于大多數(shù)測(cè)量采用包含因子k=2衡量，則按照公式U（X）=ucrel（）××2計(jì)算異菌脲含量的擴(kuò)展不確定度U（X）為0.40 mg/kg，故高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中異菌脲含量的結(jié)果表示為（5.31±0.40）mg/kg，k=2。

3 結(jié) 論

實(shí)驗(yàn)過程中，稱量、提取、凈化測(cè)定等過程均會(huì)引入不確定度，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)實(shí)驗(yàn)室溫度、玻璃儀器、溶液配制、稀釋、重復(fù)測(cè)定、回收率、質(zhì)量、體積等因素的考慮，發(fā)現(xiàn)高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中異菌脲殘留量方法中，標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合過程和標(biāo)準(zhǔn)溶液配制所產(chǎn)生的不確定度最大，其次為回收率、測(cè)量重復(fù)性和體積量取引入的不確定度分量。因此，在實(shí)際操作過程中，可通過增加標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的測(cè)定次數(shù)，增加平行樣品測(cè)定，保持高效液相色譜儀器較高的靈敏度，并定期對(duì)所涉儀器進(jìn)行檢定和提高操作人員的熟練水平，來減小測(cè)量不確定度，從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

[1] 宋國(guó)春, 于建壘, 張君亭, 等. 異菌脲在蘋果和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)研究[J]. 農(nóng)藥, 2004, 43(4)∶ 184-185; 180. DOI:10.3969/j.issn.1006-0413.2004.04.014.

[2] 沈群超, 陳華才, 陸宏, 等. 異菌脲在不同栽培模式下的降解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥, 2008, 47(1)∶ 59-60; 63. DOI:10.3969/j.issn.1006-0413.2008.01.020.

[3] 國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì), 農(nóng)業(yè)部. 食品中農(nóng)藥最大殘留限量∶GB 2763—2014[S]. 北京∶ 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2014.

[4] GIUSEPPE C, DORINA D P, FABRIZIO R, et al. Determination and validation of a simple high-performance liquid chromatographic method for simultaneous assay of iprodione and vinclozolin in human urine[J]. Journal of Chromatography B, 2005, 828(1/2)∶ 108-112.DOI:10.1016/j.jchromb.2005.08.025.

[5] D’ARCHIVIO A A, FANELLI M, MAZZEO P, et al. Comparison of different sorbents for multiresidue solid-phase extraction of 16 pesticides from groundwater coupled with high-performance liquid chromatography[J]. Talanta, 2007, 71(1)∶ 25-30. DOI:10.1016/j.talanta.2006.03.016.

[6] 徐秋生, 賀慧琳, 朱呂, 等. 高效液相色譜法測(cè)定番茄中腐霉利和異菌脲的殘留量[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2017, 8(2)∶ 486-490.DOI:10.3969/j.issn.2095-0381.2017.02.020.

[7] 郭藤, 李娜, 張洋, 等. 固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定果蔬中異菌脲殘留量[J]. 分析試驗(yàn)室, 2014, 33(7)∶ 860-863.

[8] 潘靜, 徐妍, 馬超, 等. 40%嘧霉·異菌脲懸浮劑的高效液相色譜分析[J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥, 2016, 15(2)∶ 36-38. DOI:10.3969/j.issn.1671-5284.2016.05.012.

[9] 成妙金. 40%烯?！ぎ惥鍛腋┮合嗌V定量分析[J]. 世界農(nóng)藥,2013, 35(2)∶ 56-57. DOI:10.3969/j.issn.1009-6485.2013.02.011.

[10] 李月茹, 孫亮, 許煊煒. 人參和土壤中異菌脲殘留分析[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2012(19)∶ 10359-10360. DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2012.19.133.

[11] 徐秋生, 劉俊, 賀慧琳, 等. SPE-HPLC測(cè)定黃瓜、番茄中敵菌靈和異菌脲殘留量[J]. 食品研究與開發(fā), 2017, 38(3)∶ 157-161.DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2017.03.034.

[12] 戚向陽(yáng). 果蔬中6 種殺真菌劑殘留的固相分散氣相色譜檢測(cè)及基質(zhì)效應(yīng)[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào), 2012, 12(7)∶ 178-185. DOI:10.3969/j.issn.1009-7848.2012.07.026.

[13] ANGIONI A, PORCU L, DEDOLA F. Determination of famoxadone,fenamidone, fenhexamid and iprodione residues in greenhouse tomatoes[J]. Pest Management Science, 2012, 68(4)∶ 543-547.DOI:10.1002/ps.2287.

[14] 王朝杰, 李倩, 胡玉, 等. 固相萃取-毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定蔬菜中14種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量分析[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2016(5)∶ 137-139.DOI∶10.3969/j.issn.1007-5739.2016.05.079.

[15] 趙子丹, 牛艷, 姜瑞, 等. 黃瓜及土壤中異菌脲殘留量的氣相色譜分析[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015(10)∶ 2483-2485. DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.10.048.

[16] BLETSOU A A, HANAFI A H, DASENAKI M E, et al. Development of specific LC-ESI-MS/MS methods to determine bifenthrin,lufenuron, and iprodione residue levels in green beans, peas, and chili peppers under egyptian field conditions[J]. Food Science and Technology, 2013, 6(4)∶ 1099-1112.

[17] OZGUR G, BULENT K. Evaluation of QuEChERS sample preparation and liquid chromatography-triple-quadrupole mass spectrometry method for the determination of 109 pesticide residues in tomatoes[J]. Food Chemistry, 2015, 176∶ 319-332. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.12.083.

[18] 關(guān)秋艷, 方菁, 楊萬(wàn)群, 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)元謀縣村民尿液中農(nóng)藥殘留[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2016, 26(23)∶3350-3356.

[19] 丁葵英, 高彥, 于金玲, 等. 凝膠滲透色譜凈化高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)辛辣蔬菜中咪鮮胺等7 種農(nóng)藥殘留[J]. 檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊,2013, 23(5)∶ 38-43. DOI:10.3969/j.issn.1674-5354.2013.05.012.

[20] 梁林, 張愛娟, 潘金菊, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定黃瓜及番茄中異菌脲殘留[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2014, 35(4)∶ 45-48.DOI∶10.3969/j.issn.1002-5480.2014.04.010.

[21] 蔣永祥, 談金輝, 涂紅艷, 等. 氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定菠菜中4 種二縮甲酰亞胺類殺菌劑的殘留量[J]. 理化檢驗(yàn)∶ 化學(xué)分冊(cè), 2011,47(7)∶ 813-815.

[22] 程志, 張蓉, 劉韋華, 等. 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速篩查測(cè)定中藥材中144 種農(nóng)藥殘留[J]. 色譜, 2014, 32(1)∶ 57-68. DOI:10.3724/SP.J.1123.2013.09043.

[23] 甘靜妮, 程雪梅, 莫曉君, 等. 分散固相萃取/氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定蔬菜和水果中67 種農(nóng)藥殘留[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào),2016, 35(12)∶ 1528-1534.

[24] 褚能明, 孟霞, 康月瓊, 等. 分散固相萃取-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茉莉花茶中86 種農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(24)∶ 239-246.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201624038.

[25] 胡珅, 楊長(zhǎng)志, 魏冬旭, 等. 氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定植物源食品中異菌脲殘留量[J]. 檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊, 2013(4)∶ 57-60. DOI:10.3969/j.issn.1674-5354.2013.04.015.

[26] MARTINS J, ESTEVES C, LIMPO-FARIA A, et al. Analysis of six fungicides and one acaricide in still and fortified wines using solid-phase microextraction-gas chromatography/tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2012, 132(1)∶ 630-636.DOI:10.1016/j.foodchem.2011.10.102.

[27] CELEIRO M, LLOMPART M, LAMAS J P, et al. Determination of fungicides in white grape bagasse by pressurized liquid extraction and gas chromatography tandem mass spectrometry[J].Journal of Chromatography A, 2014, 1343∶ 18-25. DOI:10.1016/j.chroma.2014.03.057.

[28] HERRMANN S S, POULSEN M E. Clean-up of cereal extracts for gas chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry pesticide residues analysis using primary secondary amine and C18[J].Journal of Chromatography A, 2015, 1423∶ 47-53. DOI∶10.1016/j.chroma.2015.10.086.

[29] 中國(guó)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家認(rèn)可委員會(huì). 化學(xué)分析中不確定度的評(píng)估指南∶CNAS-GL06∶2006[S]. 北京∶ 中國(guó)計(jì)量出版社, 2006.

[30] 國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. 化學(xué)分析測(cè)量不確定度評(píng)定∶ JJF 1135—2005[S]. 北京∶ 中國(guó)計(jì)量出版社, 2005.

[31] 國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. 測(cè)量不確定度評(píng)定與表示∶ JJF 1059.1—2012[S]. 北京∶ 中國(guó)計(jì)量出版社, 2012.

[32] 國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. 蔬菜中異菌脲殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法∶ NY/T 1277—2007[S]. 北京∶ 中國(guó)計(jì)量出版社, 2007.

[33] 國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. 常用玻璃量器檢定規(guī)程∶ JJG 196—2006[S].北京∶ 中國(guó)計(jì)量出版社, 2006.

Uncertainty Evaluation for the Determination of Iprodione Residues in Vegetables by High Performance Liquid Chromatography

PAN Cheng, HU Chaoyang*, WU Ling, XIE Yong, HUANG Yonghui
(China National Quality Supervision and Testing Center for Processed Food (Fuzhou),Fujian Inspection and Research Institute for Product Quality, Fuzhou 350002, China)

The uncertainty of measurement in the determination of iprodione residues in vegetables by high performance liquid chromatography (HPLC) was evaluated. According to the national metrology technical specifications JJF 1135-2005 (Evaluation of Uncertainty in Chemical Analysis Measurement) and JJF 1059.1-1999 (Evaluation and Expression of Uncertainty in Measurement), a mathematical model was established to evaluate the uncertainty for determining iprodione residues in vegetables. The sources of uncertainty that may be introduced were analyzed and each component of uncertainty was quantified and used to calculate combined uncertainty. The results showed that an expended uncertainty of 5.31 mg/kg(k = 2) was obtained for the determination of 0.40 mg/kg of iprodione in vegetables, and the preparation of standard solution,calibration curve fitting and measurement repeatability were the main sources of uncertainty.

high performance liquid chromatography; vegetables; iprodione; uncertainty

10.7506/spkx1002-6630-201724038

O657.7

A

1002-6630（2017）24-0235-06

潘城, 胡朝陽(yáng), 吳凌, 等. 高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中異菌脲殘留量的不確定度分析[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(24)∶235-240. DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201724038. http∶//www.spkx.net.cn

PAN Cheng, HU Chaoyang, WU Ling, et al. Uncertainty evaluation for the determination of iprodione residues in vegetables by high performance liquid chromatography[J]. Food Science, 2017, 38(24)∶ 235-240. (in Chinese with English abstract)DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201724038. http∶//www.spkx.net.cn

2016-11-20

福建省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院項(xiàng)目（KY201527A）

潘城（1983—），男，工程師，碩士，研究方向?yàn)槭称放c飼料安全檢測(cè)。E-mail：pw8877@163.com

*通信作者：胡朝陽(yáng)（1982—），男，工程師，碩士，研究方向?yàn)槭称钒踩珯z測(cè)。E-mail：hzy5520@126.com