王志祥，白華毅，王桂瑛，楊保和，袁明鳳，陳朝勇，廖國周，王雪峰，鄒建華，程志斌*

（ 1.云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站，云南 祿勸 651500；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集團）有限公司，昆明 650217；5.云南省西雙版納州勐臘縣畜牧獸醫(yī)站，云南 勐臘 666300）

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能影響初探

王志祥1，白華毅2，王桂瑛2，楊保和3，袁明鳳3，陳朝勇4，廖國周2，王雪峰2，鄒建華5，程志斌2*

（ 1.云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站，云南 祿勸 651500；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集團）有限公司，昆明 650217；5.云南省西雙版納州勐臘縣畜牧獸醫(yī)站，云南 勐臘 666300）

將28日齡斷奶仔豬32頭（杜×長×大）分為4個處理組：對照組（抗生素組）、試驗組1（凝結(jié)芽孢桿菌組）、試驗組2（枯草芽孢桿菌組）、試驗組3（同時添加凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌組），研究凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能和飼料養(yǎng)分消化率的影響。試驗結(jié)果表明，平均日增重指標(biāo)，試驗組1和試驗組3差異不顯著（P>0.05），均顯著高于對照組和試驗組2（P<0.05）。料肉比指標(biāo)，試驗組1顯著低于其他3個處理組（P<0.05）。試驗組1仔豬對飼料的干物質(zhì)表觀消化率與對照組差異不顯著（P>0.05），均顯著高于試驗組2（P<0.05）。試驗結(jié)果表明，仔豬商業(yè)飼料在組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，然而單一添加枯草芽孢桿菌或凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用均沒有獲得顯著的正效應(yīng)。

凝結(jié)芽孢桿菌；枯草芽孢桿菌；仔豬；生長性能

凝結(jié)芽孢桿菌自2013年12月列入我國農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑品種目錄》以來，動物營養(yǎng)學(xué)家與飼料企業(yè)配方師一直在研究飼用凝結(jié)芽孢桿菌在畜禽飼料中的應(yīng)用技術(shù)[1-2]。尤其在減少斷奶仔豬飼用抗生素使用領(lǐng)域取得一定成果與進(jìn)展[3-6]。充分肯定飼用凝結(jié)芽孢桿菌的應(yīng)用效果與商業(yè)價值[7-9]。

我國農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑品種目錄》規(guī)范使用的飼用微生態(tài)制劑有34種，除了凝結(jié)芽孢桿菌外，市場常見的飼用微生態(tài)制劑種類還包括：酵母菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、屎腸球菌、糞腸球菌、丁酸梭菌等6種，且當(dāng)前商業(yè)推廣的飼用微生態(tài)產(chǎn)品，多為多種菌種的復(fù)合制劑產(chǎn)品。這一趨勢提示，在確定單一飼用凝結(jié)芽孢桿菌使用效果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究凝結(jié)芽孢桿菌與其他飼用微生態(tài)制劑的組合效果，以支持商業(yè)復(fù)合微生態(tài)制劑產(chǎn)品的研發(fā)與推廣，具有現(xiàn)實意義[3-7]。鑒于當(dāng)前這方面的研究報道極少，本試驗探索性開展飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能影響的研究，為“無抗、減抗”仔豬飼料的研發(fā)及復(fù)合飼用微生態(tài)制劑的推廣奠定科學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

飼用凝結(jié)芽孢桿菌制劑1×1010cfu·g-1，飼用枯草芽孢桿菌制劑2×1010cfu·g-1，均由昆明三正生物科技（集團）有限公司提供。

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

按照日齡一致、體重相近的原則，選擇28日齡斷奶健康商品閹公豬（杜×長×大）32只，分為4個處理組，每組8只，開展試驗，所有試驗豬代謝籠飼養(yǎng)。對照組（抗生素組），添加吉他霉素50 mg· kg-1、土霉素50 mg· kg-1、金霉素75 mg·kg-1。在對照組日糧及預(yù)混合飼料基礎(chǔ)上，試驗組1添

加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1；試驗組2添加飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1；試驗組3同時添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1和飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1。

1.3 試驗飼糧

試驗采用“玉米-豆粕-魚粉”型基礎(chǔ)日糧，參照NRC（1998）豬營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合云南省市場實際情況配制試驗日糧，見表1。試驗飼料由云南快大多畜牧科技有限公司生產(chǎn)。

1.4 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗在云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站豬場進(jìn)行，在試驗期每天8:00、12:30、18:00定時飼喂，自由飲水，免疫、消毒、衛(wèi)生等飼養(yǎng)管理按常規(guī)進(jìn)行。試驗期為28 d。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 生長性能

測定豬體重、采食量，計算平均日增重、平均日采食量、料肉比等指標(biāo)。

1.5.2 飼料表觀消化率試驗

采用內(nèi)源指示劑法測定仔豬對飼料主要營養(yǎng)組分的表觀消化率[10]。試驗從第14天開始，連續(xù)4 d收集糞樣，-20℃保存。待試驗結(jié)束后，糞樣統(tǒng)一解凍，于60±3℃烘干，粉碎后待檢測。實驗室分析測定干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維等表觀消化率，由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)完成。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件One Way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計分析，并進(jìn)行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能的影響見表2。

由表2可知，試驗結(jié)束仔豬56日齡的末體重，單一添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組1仔豬體重顯著高于對照組（抗生素組）（P<0.05），而單一添加枯草芽孢桿菌的試驗組2仔豬體重與對照組差異不顯著（P>0.05），同時使用凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的試驗組3仔豬體重雖然大于對照組，但差異不顯著（P>0.05）。平均日增重指標(biāo)：試驗組1和試驗組3差異不顯著（P>0.05），均顯著高于對照組和試驗組2（P<0.05），且對照組和試驗組2差異不顯著（P>0.05）。料肉比指標(biāo)：試驗組1顯著低于其他3個處理組（P<0.05）。此外，試驗全期4個處理組仔豬腹瀉率均在實際養(yǎng)殖合理的范圍內(nèi)。

表1 試驗基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

表2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對仔豬生長性能的影響

2.2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響見表3。

由表3可知，試驗組1仔豬對飼料的干物質(zhì)表觀消化率與對照組差異不顯著（P>0.05），均顯著高于試驗組2（P<0.05）。試驗組3干物質(zhì)表觀消化率與對照組相比差異不顯著（P>0.05）。粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維等表觀消化率指標(biāo)，4個處理組之間差異不顯著（P>0.05）。

表3 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響%

3 討論

2016年7月26 日，我國農(nóng)業(yè)部公告第2428號公布于2017年4月30日全面禁止使用硫酸黏菌素。2017年9月8日，我國農(nóng)業(yè)部針對高銅、高鋅發(fā)布了《飼料添加劑安全使用規(guī)范》的修訂意見征求稿，將<25 kg仔豬日糧銅的最高添加限量從200 mg·kg-1下調(diào)為125 mg·kg-1，同時將<25 kg仔豬日糧鋅的最高添加限量從2 250 mg·kg-1下調(diào)為150 mg·kg-1。這一修訂意見提示，我國廣大飼料企業(yè)配方師廣泛采用降低仔豬腹瀉的“三大”傳統(tǒng)組合方案：以硫酸黏菌素為主的組合飼用抗生素、高銅配方、高鋅配方，即將退出我國飼料工業(yè)與養(yǎng)豬業(yè)。這也催促廣大飼料企業(yè)及配方師，盡快完善“替抗”方案和選用優(yōu)質(zhì)“替抗”產(chǎn)品，以保障斷奶仔豬生產(chǎn)性能。據(jù)此，本文初步探索了飼用微生態(tài)制劑凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌在斷奶仔豬飼料中的組合使用技術(shù)及效果。

本試驗對照組參考當(dāng)前飼料企業(yè)預(yù)防斷奶仔豬腹瀉的實際生產(chǎn)配方，添加了吉他霉素、土霉素、金霉素。鑒于當(dāng)前我國飼料工業(yè)與養(yǎng)豬業(yè)水平處于從“減抗”到“無抗”的過渡期，并沒有全面禁止飼用抗生素，因此為了使試驗結(jié)果更接近于真實生產(chǎn)情況，在對照組日糧及預(yù)混合飼料基礎(chǔ)上，試驗組1添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1；試驗組2添加飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1；試驗組3同時添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1和飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1。表3結(jié)果表明，4個處理組仔豬腹瀉率（2%~4%）均在合理的實際養(yǎng)殖生產(chǎn)水平范圍內(nèi)，研究表明試驗日糧配方符合實際生產(chǎn)情況，試驗數(shù)據(jù)能夠滿足廣大飼料企業(yè)配方師逐步實施“減抗”的需求[11-14]。

添加了飼用凝結(jié)芽孢桿菌（5×106cfu·g-1）的試驗組1和試驗組3兩組仔豬的平均日增重差異不顯著，均顯著高于對照組（抗生素組）和試驗組2（枯草芽孢桿菌組）。這一結(jié)果表明，在所有試驗仔豬腹瀉率正常、健康狀況良好的條件下，添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步提高28~56日齡仔豬的生長速度。高書鋒等研究了3個劑量（5×106、7.5×106、1×107cfu·g-1）凝結(jié)芽孢桿菌對28日齡斷奶仔豬（7 kg）生長性能的影響，結(jié)果表明，與對照組（金霉素50 mg·kg-1）相比，3個添加了飼用凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組仔豬平均日增重均顯著提高[4]。本試驗結(jié)果與高書鋒等的報道一致。

試驗4個處理組的試驗仔豬在平均日采食量差異不顯著的條件下，試驗組1料肉比優(yōu)于其他3個處理組。結(jié)果表明，在日糧含有規(guī)范使用的抗生素基礎(chǔ)上，飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善仔豬的飼料轉(zhuǎn)化效率[3-6]。表4分析仔豬對飼料的表觀消化率表明，試驗組1的干物質(zhì)消化率最高，印證了表3生產(chǎn)性能的結(jié)果。在日糧含有抗生素的基礎(chǔ)上，使用較高劑量（1×107cfu·g-1）的飼用枯草芽孢桿菌降低了飼料轉(zhuǎn)化效率。

表3結(jié)果表明，試驗組2添加枯草芽孢桿菌的仔豬料肉比最高，表4進(jìn)一步分析表觀消化率表明，試驗組2的干物質(zhì)消化率最低。在日糧含有抗生素的基礎(chǔ)上，試驗組3同時添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，仔豬綜合生產(chǎn)性能反而略低于單一使用凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組1。造成以上結(jié)果的原因包括：選用優(yōu)質(zhì)的飼用凝結(jié)芽孢桿菌制劑產(chǎn)品是獲得斷奶仔豬良好生產(chǎn)性能的關(guān)鍵。因為按照細(xì)菌功能劃分，凝結(jié)芽孢桿菌在仔豬腸道內(nèi)增殖、增生過程中產(chǎn)生L-乳酸，因此凝結(jié)芽孢桿菌屬于乳酸菌類細(xì)菌，具有直接殺菌抑菌功效[7,15]。研究表明采用牛津杯法實驗表明，凝結(jié)芽孢桿菌體外強效抑制致病大腸桿菌[16-19]。周映華等飼養(yǎng)試驗表明，飼喂凝結(jié)芽孢桿菌能夠顯著降低斷奶仔豬糞便中的致病大腸桿菌數(shù)量[6]?？莶菅挎邨U菌抑制豬腸道大腸桿菌的試驗一直沒有確證?，F(xiàn)有的一些綜述只是假設(shè)為枯草芽孢桿菌的“腸道占位”理論[13]。但在實際生產(chǎn)的復(fù)雜養(yǎng)殖條件下，這一假設(shè)不足以保障仔豬腸道菌群平衡，因為沒有枯草芽孢桿菌的直接抑菌證據(jù)，這也是枯草芽孢桿菌在仔豬斷奶料中使用效果不穩(wěn)定的根本原因[13]。不同微生態(tài)制劑之間是協(xié)同、還是頡頏效應(yīng)決定了復(fù)合飼用微生態(tài)制劑的實際效果[20]。姚曉紅等和趙鈺等采用牛津杯法試驗表明，凝結(jié)芽孢桿菌體外對枯草芽孢桿菌具有一定抑制作用[17-18]。與本試驗的結(jié)果吻合，與對照組添加多種抗生素相比，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，但是凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用時沒有獲得顯著的正效應(yīng)。這一結(jié)果進(jìn)一步表明，當(dāng)前市場大量銷售的凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌復(fù)合產(chǎn)品，其作用效果與機理有待進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

試驗結(jié)果表明，在組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，表現(xiàn)在腹瀉率和料肉比降低、生長速度提高方面。然而，單一添加枯草芽孢桿菌或凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用均沒有獲得顯著的正效應(yīng)。

[1] 程志斌,王春,李云輝,等.日糧添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌對蛋雞生產(chǎn)性能的影響[J].飼料博覽,2015（11）:1-4.

[2]黃遵錫,程志斌.飼用凝結(jié)芽孢桿菌對蛋雞生產(chǎn)性能及血液生化指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè),2015,36（22）:1-5.

[3] 洪文,唐澤華,胡遠(yuǎn)亮.凝結(jié)芽孢桿菌對斷奶仔豬生長性能的影響[J]. 養(yǎng)殖與飼料,2016（3）:19-21.

[4] 高書鋒,郭趙輝,胡新旭,等.凝結(jié)芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬臨床應(yīng)用效果的研究[J].飼料研究,2015（6）:42-47.

[5] 黃海強.凝結(jié)芽孢桿菌制劑對仔豬生長性能的影響[J].福建畜牧獸醫(yī),2014,36（6）:36-37.

[6] 周映華,吳勝蓮,胡新旭,等.不同芽孢桿菌對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].飼料工業(yè),2012,33（3）:21-23.

[7] 鄒梅,黃友解,吳吉安,等.凝結(jié)芽孢桿菌的特點、作用機制及生物學(xué)功能[J].飼料研究,2017（2）:1-5.

[8] Endres J R,Clewell A,Jade K A,et al.Safety assessment of a proprietary preparation of a novel Probiotic,Bacillus coag?ulans,as a food ingredient[J].Food& Chemical Toxicology An International Journal Published for the British Industrial Biological Research Association,2009,47（6）:1 231-1 238.

[9] Endres J R,Qureshi I,Farber T,et al.One-year chronic oral toxicity with combined reproduction toxicity study of a novel probiotic,Bacillus coagulans,as a food ingredient[J].Food & Chemical Toxicology An International Journal Published for the British Industrial Biological Research Association, 2011, 49 （5）: 1 174-1 182.

[10] 程志斌,陳愛民,張紅兵,等.復(fù)合非淀粉多糖酶與植酸酶對仔豬的影響[J].飼料研究,2011（12）:6-8.

[11] 唐受文,黃宇,羅佳捷,等.不同營養(yǎng)水平無抗日糧對中大豬生長性能的影響[J].飼料博覽,2017（6）:1-4.

[12]陳輝,肖定福.殼寡糖的生物學(xué)功能及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 飼料博覽,2017（4）:8-11.

[13] 郭照宙,崔紅霞,武洪志,等.枯草芽孢桿菌在動物飼料中的應(yīng)用[J]. 飼料博覽,2017（6）:26-28.

[14] 劉化偉,曲全業(yè),張曉杰,等.活性酵母對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響研究[J].飼料博覽,2017（1）:26-28.

[15] 趙樹平,包維臣.凝結(jié)芽孢桿菌的特性及研究進(jìn)展[J].家畜生態(tài)學(xué)報,2014,35（2）:6-11.

[16]李剛,傅玲琳,王彥波.益生菌凝結(jié)芽孢桿菌胞外產(chǎn)物抑菌特性研究[J]. 食品科技,2013,38（10）:20-24.

[17] 姚曉紅,吳逸飛,楊家?guī)?等.凝結(jié)芽孢桿菌的篩選、鑒定及抑菌特性的初步研究[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,56（7）:1 091-1 094.

[18]趙鈺,傅玲琳,王彥波.凝結(jié)芽孢桿菌抑菌物質(zhì)的理化特性研究[J]. 食品研究與開發(fā),2015,36（1）:20-25.

[19] 王磊,呂陽,張越,等.抑制大腸桿菌K88的益生菌體外篩選[J].中國畜牧獸醫(yī),2016,43（5）:1 355-1 360.

[20] 華洵璐,錢仁界,張憲中,等.芽孢桿菌復(fù)合制劑對斷奶仔豬生長、腹瀉、和飼料消化率的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43（3）:166-170.

Effects of Combined Use of Bacillus Coagulans and Bacillus Subtilis on Growth Performance of Piglets

WANG Zhixiang1,BAI Huayi2,WANG Guiying2,YANG Baohe3,YUAN Mingfeng3,CHEN Chaoyong4,LIAO Guozhou2,WANG Xuefeng2,ZOU Jianhua5,CHENG Zhibin2*

（1.Animal Husbandry and Veterinary Station of Luquan County,Luquan 651500,Yunnan China;2.Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,Yunnan China;3.Yunnan Kuaidaduo Animal Husbandry Technology Co.,Ltd.,Yuxi 653100,Yunnan China;4.Kunming Sanzheng Biotechnology Co.,Ltd.,Kunming 650217,Yunnan China;5.Animal Husbandry and Veterinary Station of Mengla County,Mengla 666300,Yunnan China）

The objective of this experiment was to study the effects of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis on the growth performance and the nutrient utilization in weaned piglets.Thirty two Duroc×Landrance×York piglets at the age of 28 d were devided into four treatment groups,including the control group(antibiotic treatment),group 1(addition of Bacillus coagulans),group 2(addition of Bacillus subtilis),and group 3(combination use of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis).The results showed that in the aspect of the average daily gain index,the difference between the experimental group 1 and the test group 3 was not significant(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group and the experimental group 2(P<0.05).In the aspect of feed to meat ratio,the experimental group 1 was significantly lower than the other three treatment groups(P<0.05).The dry matter apparent digestibility of the piglets in the test group 1 was not significantly different from that of the control group(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group(P<0.05),and the experimental group 2 was significantly higher than that of the control group.These findings suggested the Bacillus coagulans additive in weaned piglet diets could enhance the growth performance and nutrient utilization,but the addition of Bacillus subtilis or the combination use of Bacillus subtilis and Bacillus coagulans could not achieve the further improvement of the growth performance on the base of the conventional antibiotic diet.

Bacillus coagulans;Bacillus subtilis;weaned piglet;growth performance

S816.7；S828

A

1001-0084（2017）11-0008-05

2017-09-10

云南省省院省?？萍己献鲗ｍ棧?015IB011）；昆明三正生物科技（集團）有限公司云南省創(chuàng)新型企業(yè)試點項目、昆明市科技計劃項目（昆科計字：2013-02-06-A-G-02-3053）

王志祥（1965-），男，云南祿勸人，高級畜牧師，主要從事畜牧學(xué)研究。

*

E-mail:chengzb99@163.com。