符啟位，王爽，肖春雷，劉勇，李秋潔，羅豐，韓曉燕，孔祥義

（海南三亞市南繁科學(xué)技術(shù)研究院，572000）

西瓜不同品種苗期對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定

符啟位，王爽，肖春雷，劉勇，李秋潔，羅豐，韓曉燕，孔祥義

（海南三亞市南繁科學(xué)技術(shù)研究院，572000）

通過對(duì)48份不同西瓜品種開展苗期細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定，探明不同西瓜品種對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病性差異，通過室內(nèi)人工噴霧接種法，篩選出了黑麗人、領(lǐng)秀一號(hào)等29份為中抗品種，農(nóng)人西瓜5號(hào)、抗裂花紅玉等12個(gè)為中感品種，鄂西瓜、精選華蜜冠龍等7個(gè)為感病品種，沒有高抗和免疫材料。

西瓜；細(xì)菌性果斑病；抗性鑒定

西 瓜 [Citrullus lanatus （Thunb.） Matsum.et Nakai]，葫蘆科，一年生蔓生藤本植物，全國(guó)各地均有栽培。西瓜是世界農(nóng)業(yè)中的重要水果作物，播種面積和產(chǎn)量在十大水果中居第4位。中國(guó)是世界西瓜生產(chǎn)大國(guó)，西瓜種植面積占世界總面積的60%以上，產(chǎn)量占 70%以上[1]。近年來，隨著西瓜種植面積的不斷擴(kuò)大，以及氣候的變化，病害的發(fā)生日益嚴(yán)重。細(xì)菌性果斑病是西（甜）瓜生產(chǎn)上的一種毀滅性病害，可以侵染多種葫蘆科作物，如西瓜、甜瓜、南瓜、黃瓜等，自報(bào)道以來已在美國(guó)、澳大利亞、巴西、土耳其、日本、泰國(guó)、以色列、伊朗、匈牙利、希臘和我國(guó)多個(gè)省份發(fā)生，給當(dāng)?shù)氐奈魈鸸戏N植業(yè)造成了嚴(yán)重的損失[2]。細(xì)菌性果斑病的病原菌為西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）[3]，屬國(guó)際檢疫性有害生物之一，其發(fā)生會(huì)導(dǎo)致種植的西瓜生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益嚴(yán)重下降。為減輕該病害的為害，選育抗病品種是防治瓜類細(xì)菌性果斑病比較理想的方法之一。本試驗(yàn)通過室內(nèi)人工噴霧接種法對(duì)48份不同西瓜品種進(jìn)行苗期細(xì)菌性果斑病抗病性評(píng)價(jià)，以期為今后選育抗病性品種提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

①供試病原菌菌株 果斑病病原菌分離自海南省陵水縣西瓜發(fā)病植株，編號(hào)為L(zhǎng)SGB。

②供試西瓜品種 供試48個(gè)西瓜品種主要來自于新疆農(nóng)人種子科技有限公司、武漢慶發(fā)禾盛農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司、湖南博達(dá)隆科技發(fā)展有限公司等15家公司和單位。品種類型為大果有籽，中果有籽和小果有籽3種類型（表1）。

1.2 試驗(yàn)方法

①幼苗栽培 試驗(yàn)開展于2017年3月。選取各個(gè)供試品種飽滿的種子進(jìn)行催芽播種，用福爾馬林100倍液浸種90 min，浸種完成后，用清水沖洗干凈，在培養(yǎng)皿底部墊上濾紙保濕，放入28℃恒溫培養(yǎng)箱下進(jìn)行催芽。選用54孔育苗穴盤和經(jīng)過消毒后的無土育苗基質(zhì)進(jìn)行播種育苗，每個(gè)品種播種54粒，播種前澆水浸透，將發(fā)芽好的種子播入育苗穴盤中，每穴播種1粒種子，播種后放入大棚內(nèi)正常管理，待幼苗生長(zhǎng)至第四片真葉時(shí)進(jìn)行接種。

②接種方法 將LSGB病原菌在LB固體培養(yǎng)基上活化，28℃培養(yǎng) 48 h后挑取單菌落接種于LB液體培養(yǎng)基中，28℃，200 r/min進(jìn)行搖培，將菌液濃度調(diào)至1×108CFU/mL，待第4片真葉完全展開后，采取室內(nèi)人工噴霧法進(jìn)行接種，每個(gè)品種接種54株，接種后套袋保濕48 h，以不接種作為對(duì)照，7 d后病情穩(wěn)定調(diào)查葉片的發(fā)病情況，每株調(diào)查上、中、下三片葉，按 0級(jí)、1級(jí)、3級(jí)、5級(jí)、7級(jí)、9級(jí)分級(jí)記錄。

葉片發(fā)病情況分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下[4]，0級(jí)：無?。?級(jí)：葉片病斑較少，病斑面積占整片葉面積的5%以下；3級(jí)：病斑較多，病斑面積占整個(gè)面積的5%～30%；5級(jí)：病斑較多，病斑面積占整個(gè)面積的30%～50%；7級(jí)：病斑很多或融合成大斑，病斑面積占整個(gè)面積的50%以上，葉片未焦枯死亡；9級(jí)：病斑很多或融合成大斑，病斑面積占整個(gè)面積的50%以上，常使葉片焦枯死亡。

抗病性劃分標(biāo)準(zhǔn)如下[5]：采用相對(duì)抗病性方法評(píng)價(jià)其抗病程度，抗病程度分為免疫 （I）、高抗（HR）、中抗（MR）、中感（MS）和感病（S）5 類，相對(duì)抗病指數(shù)分別為 1.00、0.80～0.99、0.40～0.79、0.20～0.39和0.20以下。

其中，相對(duì)抗病指數(shù)=1-相對(duì)病情指數(shù)。相對(duì)病情指數(shù)=鑒定品種病情指數(shù)/對(duì)照品種病情指數(shù)（其中，病情指數(shù)最高者為對(duì)照品種）。

2 結(jié)果與分析

2.1 接種后西瓜幼苗的主要表現(xiàn)癥狀

LSGB病原菌菌懸液噴霧接種于不同西瓜品種葉片上，西瓜子葉和真葉均可發(fā)病，子葉發(fā)病時(shí)，病斑向四周擴(kuò)散，出現(xiàn)不規(guī)則淡褐斑，邊緣有黃色暈圈，真葉發(fā)病時(shí)，由接種點(diǎn)向四周形成不規(guī)則斑、水浸狀病斑，病斑沿葉脈發(fā)展，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)展到葉基部，沿葉脈發(fā)展到葉基部并形成褐色壞死斑。病斑周圍有黃色暈圈，略呈多角形，多斑融合使得葉片干枯壞死，病葉不脫落。

2.2 不同西瓜品種苗期對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病性分析

由表2可知，供試的48個(gè)西瓜品種中沒有對(duì)細(xì)菌性果斑病表現(xiàn)免疫和高抗的品種，表現(xiàn)中抗（平均病情指數(shù)在 0.40～0.79）的品種有 WM1、WM2、WM4、WM5、WM8、WM10、WM11 等 29 份 ，占總數(shù)的60.4%；表現(xiàn)中感（平均病情指數(shù)在0.20～0.39） 的 品 種 有 WM3、WM6、WM7、WM9、WM12、WM15等 12份，占總數(shù)的25.0%；表現(xiàn)感?。ㄆ骄∏橹笖?shù)在0.20以下）的品種有WM16、WM17、WM27、WM32、WM35、WM36、WM40 共 7 份， 占總數(shù)的14.6%，未篩選到免疫和高抗品種。

3 結(jié)論與討論

本研究對(duì)48份西瓜品種鑒定結(jié)果表明不同材料之間抗病性存在差異，篩選出了中抗品種 29份，中感品種 12份，感病品種 7份，未篩選獲得免疫和高抗西瓜品種。鄭喜清等[6]通過苗期室內(nèi)噴霧接種法，對(duì)新疆主要的15個(gè)哈密瓜品種或品系、2個(gè)籽瓜及15個(gè)西瓜品種進(jìn)行苗期抗病性鑒定，待測(cè)的所有哈密瓜、籽瓜和西瓜品種或品系在發(fā)病程度上雖有明顯的差別，但均不抗病，其平均病情指數(shù)都在40以上；西瓜和籽瓜的抗病性較哈密瓜要強(qiáng)；品種的染色體的倍型和生育期與抗病性也沒有明顯的相關(guān)性。賈宋楠等[7]通過對(duì)62份來源于籽用西瓜、國(guó)外引進(jìn)的粘籽西瓜及普通西瓜雜交后代的自交純系進(jìn)行苗期抗病性鑒定，篩選出了ES84、ES90等 22份中抗材料，ES30、ES94等 22份中感材料，ES46、ES50等18份高感材料，沒有高抗和免疫材料。劉欣欣等[8]采用室內(nèi)苗期人工接種鑒定方法，對(duì)黑龍江省市售的16份西、甜瓜栽培品種和 84份種質(zhì)資源進(jìn)行了細(xì)菌性果斑病的抗病性鑒定，結(jié)果表明，10份西瓜栽培品種中新紅寶、京欣 1號(hào)、雙抗大地雷、特大慶紅寶、超豐F1、慶發(fā) 7號(hào)等 6個(gè)品種表現(xiàn)為中抗；景豐寶和齊紅西瓜表現(xiàn)為中感；吉福2號(hào)和慶農(nóng)1號(hào)表現(xiàn)為感病，未發(fā)現(xiàn)高抗和免疫的品種。在生產(chǎn)實(shí)踐中，利用抗性強(qiáng)的品種是最經(jīng)濟(jì)、最有效的控病措施，但是迄今并沒有發(fā)現(xiàn)對(duì)果斑病免疫或高抗的品種。因此，選育對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病品種顯得尤為重要。

表2 不同西瓜品種苗期對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定結(jié)果

[1]馬躍.透過國(guó)際分析看中國(guó)西瓜甜瓜的現(xiàn)狀與未來[J].中國(guó)瓜菜，2011，24（2）：64-67.

[2]閻莎莎，王鐵霖，趙廷昌，等.瓜類細(xì)菌性果斑病研究進(jìn)展[J].植物檢疫，2011，25（3）：71-76.

[3]Schaad N W, Postnikova E, Sechler A, et al.Reclassification of subspecies of Acidovorax avenaeasA.Avenae (Manns 1905)emend.,A.cattleyae(Pavarino,1911)comb.nov．,A．citrulli(Schaad et al,1978)comb．Nov.,and proposal ofA.oryzaesp.Nov[J].Syst Appl Microbiol,2008,31(6):434-446.

[4]Hopkins D L,Thompson C M.Evaluation of Citrullus sp.germplasm for resistance to Acidovorax avenaesubsp[J].Citrulli Plant Disease,2002,86:61-64.

[5]王繼華，熊麗，瞿素萍，等.香石竹不同品種對(duì)鐮刀菌枯萎病的抗性評(píng)價(jià)[J].植物保護(hù)，2005，31（1）：34-36.

[6]鄭喜清.哈密瓜品種對(duì)細(xì)菌性果斑病抗性指標(biāo)的研究[D].內(nèi)蒙古：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[7]賈宋楠，王惠林，鄭健，等.籽用西瓜種質(zhì)資源對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，50（5）：864-869.

[8]劉欣欣，王文博，潘春清，等.黑龍江西甜瓜栽培品種及種質(zhì)資源對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定[J].中國(guó)蔬菜，2014（9）：23-26.

Identification on Resistance of Different Varieties of Watermelon at Seedling Stage to Bacterial Fruit Blotch

FU Qiwei,WANG Shuang,XIAO Chunlei,LIU Yong,LI Qiujie,LUO Feng,HAN Xiaoyan,KONG Xiangyi
(Sanya Science and Technology Academy for Crop Winter Multiplication,Hannan 572000)

In order to identify the resistance of different varieties of watermelon to bacterial fruit blotch,the method of artificial spraying inoculation indoor was used to identify 48 watermelon cultivars at seedling stage.The results showed that 29 cultivars including Heiliren,Lingxiu No.1 and so on were middle resistant to bacterial fruit blotch.12 cultivars were middle sensitive including Nongren Xigua No.5,Kangliehuahongyu and so on.7 cultivars were sensitive including Exigua,Jingxuanhuamiguanlong and so on.There were no high resistant and immune cultivars．

Watermelon;Bacterial fruit blotch;Disease resistance

S651

A

1001-3547（2017）22-0076-04

國(guó)家西甜瓜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金 （nycytx-36-02-17）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)南繁區(qū)生物安全監(jiān)測(cè)預(yù)警及控制關(guān)鍵技術(shù)研究與示范（201403075）

符啟位（1997-），男，技術(shù)員，主要研究方向?yàn)楣喜瞬『Ψ乐渭夹g(shù)，電話：18389566325，E-mail：fuqiwei2017@163.com

孔祥義（1980-），男，通訊作者，研究員，碩士，主要研究方向?yàn)槟戏钡貐^(qū)植物病蟲害防治技術(shù)研究

2017-08-22

10.3865/j.issn.1001-3547.2017.22.025