郭 楠，顏利求，鄭 曄，曹緒芬

(河北省滄州市中心醫(yī)院心內(nèi)一科 061014)

冠心病不同冠脈病變程度患者外周血Treg細(xì)胞及全球急性冠狀動脈事件注冊評分的關(guān)系

郭 楠，顏利求，鄭 曄，曹緒芬

(河北省滄州市中心醫(yī)院心內(nèi)一科 061014)

冠心??；外周血；Treg細(xì)胞；全球急性冠狀動脈事件注冊評分

冠心病患者心血管事件發(fā)生率明顯增高，心腦血管事件的發(fā)生對社會和家庭造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，控制冠心病患者心血管事件發(fā)生，是當(dāng)前研究的重點(diǎn)課題[1-2]。冠狀動脈病變程度是影響冠心病患者心血管事件的重要因素，早期明確并采取積極的應(yīng)對措施，有助于減少不良事件發(fā)生。全球急性冠狀動脈事件注冊評分(GRACE)和其危險分層的評價是評價冠心病危險分級的重要量表之一，與冠心病臨床預(yù)后密切相關(guān)[3-4]。免疫活化是冠脈病變的主要病理機(jī)制之一，血清中Treg細(xì)胞水平反映機(jī)體免疫活化的程度[5]。本研究探討冠心病患者外周Treg細(xì)胞變化與冠脈病變程度及GRACE的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2012年7月至2014年7月行冠狀動脈造影確診為冠心病的患者150例，其中男74例，女76例；年齡37～61歲，平均(52.4±4.5)歲；單支病變48例，雙支病變78例，多支病變24例；輕度閉塞42例，中度閉塞42例，重度閉塞44例，完全閉塞22例。所有患者行冠狀動脈造影檢查，冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2007年美國心臟病學(xué)會(ACC)和美國心臟協(xié)會(AHA) 指南[6]。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)所有患者均同意參加本研究；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并腎病等其他臟器嚴(yán)重并發(fā)癥患者；(2)精神異常患者；(3)孕婦或哺乳期婦女。根據(jù)150例患者冠狀動脈造影結(jié)果分為單支、雙支、多支病變組。依據(jù)計算機(jī)密度測定法評估冠狀動脈狹窄程度，分為輕度、中度、重度、完全閉塞組，其中50%～<75%為輕度，75%～<90%為中度，90%～<100%為重度，100%為完全閉塞[9]。記錄入選患者的年齡、性別、吸煙史等情況。

1.2方法

1.2.1Treg細(xì)胞及Th17細(xì)胞水平監(jiān)測 收集患者空腹外周靜脈血，用Active motif公司的試劑盒按說明書提取外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)，得到PBMCs后PBS重懸細(xì)胞，取20 μL細(xì)胞懸液，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度，按照流式細(xì)胞檢測說明書加入流式細(xì)胞儀抗體后，按照說明書進(jìn)行相關(guān)操作，流式細(xì)胞儀上檢測Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞水平，Treg細(xì)胞采用Foxp3 Alexa Fluor488/CD25PE/CD4 PerCP，Th17細(xì)胞采用抗人IL-17Alexa Fluor647/CD3 FITC/CD4PE，兩種抗體均購于上海百賽生物科技有限公司。

1.2.2GRACE 所有患者均進(jìn)行GRACE，分值為2～283分，內(nèi)容包括年齡、心律、收縮壓、肌酐、Killip分級、是否發(fā)生心血管事件、心肌酶標(biāo)志物、ST段變化，所有患者均在入院后評估以上臨床資料，最后進(jìn)行GRACE。

2 結(jié) 果

2.1不同冠脈病變患者一般臨床資料比較 多支病變組患者高脂血癥和糖尿病發(fā)病率明顯高于雙支病變組和單支病變組(均P<0.05)，見表1；輕度閉塞組患者高脂血癥及糖尿病發(fā)病率均低于中、重度、完全閉塞組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.2不同冠脈病變患者Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞及Grace比較 多支病變組患者Treg細(xì)胞、Treg/Th17比值、GRSCE分別為(1.42±0.25)%、(0.39±0.08)%、(165.3±28.9)分明顯高于雙支病變和單支病變組，而Th17細(xì)胞為(3.14±0.99)%明顯低于雙支病變和單支病變組(P<0.05)，見表3；完全閉塞組Treg細(xì)胞、Treg/Th17比值、GRACE分別為(1.45±0.31)%、(0.42±0.09)%、(168.4±25.7)分明顯高于輕度、中度、重度狹窄組，而Th17細(xì)胞為3.01±1.03明顯低于輕度、中度、重度狹窄組，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

2.3冠脈病變與Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞及GRACE的關(guān)系 冠脈病變支數(shù)和閉塞程度均與Treg細(xì)胞、Treg/Th17比值及GRACE呈正相關(guān)(r值分別為0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，與Th17水平均呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.387、-0.427，P<0.05)，見表5。

表1 不同冠脈病變支數(shù)患者一般臨床資料比較

a：P<0.05，與單支病變組比較；b：P<0.05，與雙支病變組比較

表2 不同冠脈狹窄程度患者一般臨床資料比較

a：P<0.05，與輕度閉塞比較

表3 不同冠脈病變支數(shù)患者Treg細(xì)胞及Th17細(xì)胞水平比較

a：P<0.05，與單支病變比較；b：P<0.05，與雙支病變比較

表4 冠脈不同狹窄程度患者Treg細(xì)胞及Th17細(xì)胞水平比較

a：P<0.05與輕度閉塞組比較；b：P<0.05，與中度閉塞組比較；c：P<0.05，與重度閉塞組比較

表5 冠脈病變與Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞及 GRACE的關(guān)系

3 討 論

冠狀動脈病變的主要原因是動脈粥樣硬化，動脈粥樣硬化的主要病理機(jī)制之一是炎性反應(yīng)，炎癥細(xì)胞產(chǎn)生的各種炎癥因子可能加重動脈粥樣硬化[6-8]。本研究結(jié)果提示冠心病患者具有較高的高脂血癥及糖尿病發(fā)生率，而且隨著冠脈病變程度的加重，高脂血癥及糖尿病的發(fā)病率也上升，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

炎癥和氧化應(yīng)激是動脈粥樣硬化的主要病因?qū)W說，Treg細(xì)胞具有負(fù)向調(diào)控免疫炎性反應(yīng)的作用，有助于抑制免疫炎性反應(yīng)的形成，而且Treg細(xì)胞可以抑制Th17細(xì)胞，而Th17細(xì)胞在動脈粥樣硬化形成過程中有重要的臨床意義，Th17可促進(jìn)活性氧(ROS)形成，ROS形成過多導(dǎo)致氧化應(yīng)激增強(qiáng)，促進(jìn)動脈粥樣硬化過程中泡沫細(xì)胞形成，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞損傷加速動脈血管損傷[9-11]。Th17細(xì)胞可分泌大量趨化因子活化核因子(NF)-κB信號通路，促進(jìn)炎癥因子活化形成，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-6等炎癥因子可誘發(fā)微炎癥狀態(tài)促進(jìn)動脈損傷[12]。這就意味著冠心病患者冠脈損傷可能與Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞水平密切相關(guān)。

因此本研究通過回顧性分析本院150例冠心病患者的臨床資料，探討血清中Treg及Th17細(xì)胞水平與冠心病冠脈病變程度及GRACE的關(guān)系。本研究結(jié)果提示，冠心病患者冠脈病變程度越嚴(yán)重，患者Treg細(xì)胞的含量越高，Th17細(xì)胞含量越低，而Treg/Th17比值也逐漸升高，表明冠心病患者冠脈病變程度與Treg和Th17細(xì)胞水平密切相關(guān)；進(jìn)一步探討冠脈病變程度與GRACE的關(guān)系，結(jié)果證實冠脈狹窄程度越高和冠脈病變支數(shù)越多GRACE越高，這也進(jìn)一步證實了GRACE與冠心病患者病情的相關(guān)性，能較好地反映患者病情的嚴(yán)重程度。

研究提示Treg細(xì)胞抑制Th17細(xì)胞分化，抑制炎癥因子形成從而抑制動脈粥樣硬化的進(jìn)程，而且Treg細(xì)胞還可以影響膽固醇代謝從而抑制泡沫細(xì)胞形成[13-14]，Treg細(xì)胞水平可能與冠狀動脈粥樣硬化程度相關(guān)的重要因素之一。相關(guān)性分析結(jié)果提示Treg細(xì)胞水平、GRACE與冠脈病變程度呈正相關(guān)，與Th17細(xì)胞水平呈負(fù)相關(guān)。

本研究采用GRACE對患者冠脈風(fēng)險進(jìn)行分層，將T細(xì)胞水平與GRACE進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果提示GRACE與Treg細(xì)胞水平、Treg/Th17比值呈正相關(guān)、與Th17水平呈負(fù)相關(guān)，這就進(jìn)一步提示Treg細(xì)胞水平與患者冠脈風(fēng)險事件密切相關(guān)，積極監(jiān)測Treg細(xì)胞水平有重要的臨床意義。

本研究結(jié)果提示，血清中Treg細(xì)胞水平與冠心病患者動脈粥樣硬化病變程度密切相關(guān)，而且與患者GRACE相關(guān)，Treg細(xì)胞水平越高患者冠脈病變程度越嚴(yán)重、GRCAE越高，Treg細(xì)胞水平越低患者冠狀動脈風(fēng)險事件發(fā)病率越高，檢測患者外周血中Treg細(xì)胞有助于病情監(jiān)測。

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目的探討冠心病不同冠脈病變程度患者外周血Treg細(xì)胞及全球急性冠狀動脈事件注冊評分(GRACE)的關(guān)系。方法選擇2012年7月至2014年7月行冠狀動脈造影確診為冠心病的患者150例作為研究對象，收集患者外周血，檢測外周血中Treg細(xì)胞水平并進(jìn)行GRACE。結(jié)果多支病變組患者Treg細(xì)胞水平及Treg/Th17比值明顯高于雙支病變組和單支病變組，而Th17細(xì)胞水平明顯低于雙支病變組和單支病變組(P<0.05)。完全閉塞組Treg細(xì)胞水平及Treg/Th17比值明顯高于輕度、中度、重度狹窄組，而Th17細(xì)胞水平明顯低于輕度、中度、重度狹窄者(P<0.05)。冠脈病變支數(shù)和閉塞程度均與Treg細(xì)胞水平、Treg/Th17比值及GRACE呈正相關(guān)(r值分別為0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，與Th17細(xì)胞水平均呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.387、-0.427，P<0.05)。結(jié)論冠心病患者外周血Treg細(xì)胞水平與冠脈病變程度及GRACE密切相關(guān)。

R541.4

B

1671-8348(2017)31-4413-03

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.31.033

郭楠(1981-)，在讀博士，副主任醫(yī)師，主要從事冠心病方面的研究。

2017-05-18

2017-06-22)