馮旭+邱驥鵬+李揚(yáng)+宋舸+陳瑾+王卉+吳玲+韋建華

摘要：利用各種色譜技術(shù)，結(jié)合波譜法鑒定番茄（Lycopersicon esculentum Mill）葉的化學(xué)成分結(jié)構(gòu)。結(jié)果從番茄葉乙醇提取物中分離得到15個(gè)化合物，分別為β-谷甾醇、香草醛、對(duì)羥基苯甲酸、N-反式-對(duì)-香豆?；野贰⒉ょ薮?3-O-β-D-葡萄糖苷、尿嘧啶、番茄堿苷、番茄堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖、蜀羊泉堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷、白英素B、蜀羊泉堿苷、槲皮素、α-菠甾醇、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷、蘆丁，所有化合物均首次從該植物中分離得到。

關(guān)鍵詞：番茄（Lycopersicon esculentum Mill）葉；化學(xué)成分；白英素B

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）21-4127-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.21.033

The Chemical Constituents of Leaf of Lycopersicon esculentum Mill

FENG Xu，QIU Ji-peng，LI Yang，SONG Ge，CHEN Jin，WANG Hui，WU Ling，WEI Jian-hua

（College of Pharmacy，Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530200，China）

Abstract： The structures of chemical constituents of Lycopersicon esculentum Mill were identified by various chromatographic techniques and spectral analysis. Fifteen compounds including β-sitosterole（1），vanillic acid（2），p-hydroxybenzoic acid（3），n-trans-p-coumaroyl tyamine（4），spinasterol-3-O-β-D-glucopyranoside（5），uracil（6），tomatine（7），tomatine-3-O-β-D-glucopyranoside（8），lyratoside A（9），Solalyratine B（10），soladulcidine-3-O-β-lycotetraoside（11），quercetin（12），α-spinasterol（13），n-butyl-O-β-D-fructopyranoside（14），rutin（15） were isolated and indentified from the leaf of Lycopersicon escul-entum，and all the fifteen compounds were obtained for the first time from this plant.

Key words： leaf of Lycopersicon escul-entum Mill； chemical composition； solalyratine B

番茄是茄科茄屬植物番茄（Lycopersicon esculentum Mill）的果實(shí)，在國外素有“愛情果”“金蘋果”的美稱[1]， 番茄也是世界衛(wèi)生組織推薦的保健品和抗癌果蔬之一[2]，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為番茄味甘酸，性微寒，具有涼血養(yǎng)肝，生津止渴，解毒清熱的作用?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，番茄葉含有多種維生素C、生物堿、總黃酮類等物質(zhì)[3]，番茄葉提取物中含有多種可抑制某些病原微生物的抑菌活性成分[4，5]，其中水提取物對(duì)細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)的急性炎癥具有較明顯的抑制作用[6]。目前有關(guān)番茄葉化學(xué)成分的研究較少，為了進(jìn)一步探究番茄葉的活性物質(zhì)，本試驗(yàn)對(duì)番茄葉95%乙醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)分離，從番茄葉的乙醇提取物中分離得到了15個(gè)單體化合物，分別鑒定為β-谷甾醇、香草醛、對(duì)羥基苯甲酸、N-反式-對(duì)-香豆?；野?、菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷、尿嘧啶、番茄堿苷、番茄堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖、蜀羊泉堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷、白英素B、蜀羊泉堿苷、槲皮素、α-菠甾醇、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷、蘆丁。所有化合物均首次從該植物中分離得到。

1 儀器和試劑

Waters Autospec Premier p776質(zhì)譜儀；Bruker AM-400MHz、Drx-500MHz、Avance III-800MHz型核磁共振光譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；日本島津LC-20AR制備液相色譜儀；YMC-Pack ODS-A制備型色譜柱（20 mm×250 mm，S-5 μm）；愛朗N-1100D-WD旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本東京理化公司）；賽多利斯BP211D分析天平（德國賽多利斯股份公司）；薄層色譜硅膠、柱色譜硅膠（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（美國Pharmacia公司）；聚酰胺粉 （上海譜振生物科技有限公司）；D-101大孔吸附樹脂（長(zhǎng)沙市承禹化工公司）；試劑均為分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

番茄葉采于廣西百色國家農(nóng)業(yè)科技園區(qū)無公害優(yōu)質(zhì)蔬菜產(chǎn)業(yè)化示范園，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室的李斌副教授鑒定為茄科茄屬番茄亞屬番茄的葉子。

2 提取與分離

取番茄葉粗粉10.0 kg，以95%乙醇為溶劑，10倍量滲漉提取，合并提取液，回收溶劑至無醇味，得乙醇總提取物，總提取物用水懸浮后依次用石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，石油醚部位稠浸膏272 g、乙酸乙酯部位稠浸膏104 g、正丁醇部位稠浸膏517 g、水部位稠浸膏910 g。endprint

取乙酸乙酯部位浸膏60 g，用氯仿-甲醇（100：0→0：100）梯度洗脫，收集得到14個(gè)組分（Fr.1～Fr.14）：Fr.1有結(jié)晶析出，經(jīng)重結(jié)晶得到化合物1（30 mg）；Fr.2經(jīng)硅膠H色譜分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，再經(jīng)重結(jié)晶得到化合物2（15 mg）；Fr.5經(jīng)硅膠色譜分離，用氯仿∶甲醇（40∶1→5∶1）梯度洗脫得到化合物3（40 mg）；Fr.7經(jīng)硅膠柱色譜分離，用氯仿∶甲醇（40∶1→5∶1）梯度洗脫，重結(jié)晶得到化合物4（20 g）、化合物5（10 mg）和化合物6（20 mg）。

取正丁醇部位浸膏200 g，經(jīng)D-101大孔吸附樹脂柱色譜進(jìn)行分離，水-乙醇梯度洗脫（水→15%→30%→50%→75%→95%乙醇）。15%乙醇洗脫部分經(jīng)聚酰胺柱色譜（丙酮-水梯度洗脫）分離得到一粗粉，經(jīng)重結(jié)晶得到化合物10（20 mg）；30%乙醇流分經(jīng)聚酰胺柱色譜（丙酮-水梯度洗脫）分離，重結(jié)晶得化合物12（1 g）和化合物15（0.3 g）。50%乙醇流分經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離，重結(jié)晶得到化合物7（1 300 mg）、化合物9（9 mg）、化合物11（50 mg）和化合物14（15 mg）。75%乙醇流分經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離得到化合物8（20 mg）和化合物10（18 mg）。95%乙醇流分經(jīng)硅膠柱色譜分離，以丙酮-甲醇梯度洗脫得到化合物13（6 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色針狀結(jié)晶。10%濃硫酸顯紫紅色。與β-谷甾醇對(duì)照品共薄層，在3種不同的溶劑展開系統(tǒng)中Rf值相同：石油醚-乙酸乙酯（3∶1），Rf=0.51；石油醚-丙酮（4∶1），Rf=0.52；氯仿-乙酸乙酯（8∶1），Rf=0.57。鑒定化合物1為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物2：白色針狀結(jié)晶，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，溴甲酚綠反應(yīng)陽性，Emerson反應(yīng)陰性。EI-MS m/z：168[M]+，分子式為C8H8O4。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：3.88（3H，s，-OCH3），6.83（1H，d，J=8.7，H-5），7.54（1H，d，J=1.9，H-2），7.54（1H，d，J=8.7，1.9 Hz，H-6）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：125.3（C-1），115.8（C-2），152.6（C-3），148.6（C-4），113.7（C-5），123.0（C-6），170.1（-COOH），56.3 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與周琪等[7]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物2為香草醛（Vanillic acid）。

化合物3：白色針晶；三氯化鐵反應(yīng)呈紅棕色，溴酚藍(lán)反應(yīng)呈陽性。EI-MS m/z：139[M+1]+，分子式為C7H6O3。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.87（2H，d，J=7.9 Hz，H-2），6.81（2H，d，J=7.9 Hz，H-3）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：122.6（C-1），116.0（C-2， 6），133.0（C-3，5），163.4（C-4），170.4（-COOH）。以上數(shù)據(jù)與李艷茸等[8]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物3為對(duì)羥基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）。

化合物4：白色針晶，在紫外燈365 nm下呈現(xiàn)黃色熒光，三氯化鐵試液顯陽性。EI-MS m/z：283[M]+，分子式為C17H17NO3。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.05（2H，d，J=8.3 Hz，H-2，6），6.78（1H，d，J=8.3 Hz，H-3，5），7.41（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.78（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：131.2（C-1），130.7（C-2，6），116.6（C-3，5），160.5（C-4），141.7（C-7），118.3（C-8），169.2（C-9），127.6（C-1′），130.5（C-2′，6′），116.2（C-3′，5′），156.9（C-4′），35.8（C-7′），42.5（C-8′）。以上數(shù)據(jù)與舒?zhèn)セ⒌萚9]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物4為N-反式-對(duì)-香豆?；野罚∟-trans-P-coumaroyl tyamine）。

化合物5：白色針晶，三氯化鐵反應(yīng)呈紅棕色，溴酚藍(lán)反應(yīng)呈陽性。EI-MS m/z：573[M-H]+，分子式為C35H58O6。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：0.64（3H，s，H-18），0.83（3H，s，H-19），1.11（3H，d，J=6.0 Hz，H-21），0.96 （3H，d，J=6.0 Hz，H-26），5.01（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′），4.44（1H，dd，J=12.0、5.2 Hz，H-6′a）、4.59（1H，dd，J=12.0、2.0 Hz，H-6′b）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：37.4（C-1），30.2（C-2），78.0（C-3），34.2（C-4），39.9（C-5），30.2（C-6），121.9（C-7），140.9（C-8），50.3（C-9），32.2（C-10），21.3（C-11），39.8（C-12），42.5（C-13），56.2（C-14），23.4（C-15），29.3（C-16），56.9（C-17），12.1（C-18），12.5（C-19），40.8（C-20），21.5（C-21），138.8（C-22），129.4（C-23），51.4（C-24），32.0（C-25），20.0（C-26），19.2（C-27），25.7（C-28），12.0（C-29），102.5（C-1′），75.3（C-2′），78.6（C-3′），71.7（C-4′），78.5（C-5′），62.8（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與李潔等[10]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物5為菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（Spinasterol-3-O-β-D-glucopyranoside）。endprint

化合物6：無色針狀，改良的碘化鉍鉀反應(yīng)呈現(xiàn)陽性，紫外254 nm下呈現(xiàn)淡斑。EI-MS m/z：113[M+H]+，分子式為C4H4N2O2。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：11.01（1H，s，H-3），10.81（1H，s，H-1），5.44（1H，d，J=7.4 Hz，H-5），7.38（1H，d，J=7.4 Hz，H-6）。13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：151.5（C-2），164.4（C-4），100.2（C-5），142.2（C-6）。以上數(shù)據(jù)與周建良等[11]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物6為尿嘧啶。

化合物7：黃色顆粒。碘化鉍鉀反應(yīng)顯陽性，菲林反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，Molish反應(yīng)呈陽性，Rosen-Heimer反應(yīng)呈陽性。EI-MS m/z：1034[M+H]+，分子式為C50H83NO21。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：0.59（3H，s，H-18）、0.79（3H，d，J=6.3 Hz，H-27）、0.82（3H，s，H-19），1.15（3H，d，J=7.1 Hz，H-21）。13C-NMR（125 MHz，C5D5N）數(shù)據(jù)見表1。以上數(shù)據(jù)與古惇文[12]的報(bào)道基本一致，故鑒定化合物7為番茄堿苷（Tomatine）。

化合物8：黃色粉末。菲林反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，Molish反應(yīng)呈陽性，碘化鉍鉀反應(yīng)顯陽性。EI-MS m/z：578[M+H]+，分子式為C33H55O7N。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：0.63（3H，s，H-18）、0.78（3H，d，J=6.5 Hz，H-27）、0.83（3H，s，H-19）、1.07（3H，d，J=7.0 Hz，H-21）。13C-NMR（125 MHz，C5D5N）數(shù)據(jù)見表1。以上數(shù)據(jù)與Maxweil等[13]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物8為番茄堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖（Tomatine-3-O-β-D-glucopy-ranoside）。

化合物9：白色羽毛狀簇晶。菲林反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，Molish反應(yīng)呈陽性，Rosen-Heimer反應(yīng)呈陽性，碘化鉍鉀反應(yīng)顯陽性。EI-MS m/z：902[M+H]+，分子式為C45H75O17N。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：0.84（3H，s，H-18）、0.76（3H，d，J=6.1 Hz，H-27）、0.61（3H，s，H-19）、1.08（3H，d，J=6.5 Hz，H-21）。13C-NMR（125 MHz，C5D5N）數(shù)據(jù)見表1。以上數(shù)據(jù)與尹海龍[14]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物9為蜀羊泉堿-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷（Lyratoside A）。

化合物10：淡黃色無定形粉末。Rosen-Heimer反應(yīng)顯陽性，Molish反應(yīng)顯陽性，碘化鉍鉀反應(yīng)顯陽性。EI-MS m/z：872[M+H]+，分子式為C44H73O16N。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：0.76（3H，d，J=6.1 Hz，H-27），1.08（3H，d，J=6.5 Hz，H-21），0.84（3H，s，H-18），0.61（3H，s，H-19）。13C-NMR（125 MHz，C5D5N）數(shù)據(jù)見表1。以上數(shù)據(jù)與Lee等[15]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物10為白英素B（Solalyratine B）。

化合物11：淺黃色顆粒，Molish反應(yīng)呈陽性，碘化鉍鉀反應(yīng)和Rosen-Heimer反應(yīng)呈陽性。EI-MS m/z：1034[M+H]+，分子式為C50H83O21N。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：0.59（3H，s，H-18）、0.79（3H，d，J=6.3 Hz，H-27）、0.82（3H，s，H-19）、1.15（3H，d，J=7.1 Hz，H-21）。13C-NMR（125 MHz，C5D5N）δ。以上數(shù)據(jù)與Lee等[16]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物11為蜀羊泉堿苷（Soladulcidine-3-O-β-lycotetraoside）。

化合物12：黃色針狀。鈉汞齊還原反應(yīng)顯淡紅色。EI-MS m/z：302[M]+，分子式為C15H10O7。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：12.48（1H，s，-OH），6.40（1H，d，J=1.88 Hz，H-8），6.16（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），7.52（1H，dd，J=2.1 Hz，H-6′）、7.67（1H，d，J=2.1 Hz，H-2′）、6.86（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′）。13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：147.7（C-2），135.8（C-3），175.9（C-4），160.7（C-5），98.2（C-6），163.9（C-7），93.4（C-8），156.2（C-9），103.0（C-10），121.9（C-1′），115.1（C-2′），145.1（C-3′），146.8（C-4′），115.6（C-5′），112.0（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與楊文強(qiáng)等[17]的報(bào)道基本一致，鑒定化合物12為槲皮素（Quercetin）。

化合物13：白色片狀結(jié)晶，與α-菠甾醇標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，碘蒸氣顯色，在三種不同的展開系統(tǒng)中Rf值相同且均為棕黃色的單斑，且混合熔點(diǎn)不下降，故鑒定化合物13為α-菠甾醇（α-spinasterol）。

化合物14：白色針狀結(jié)晶。Fehling反應(yīng)、Molish反應(yīng)均顯陽性。EI-MS m/z：302[M]+，分子式為C27H30O16。1H-NMR（400 MHz，CDCI3）δ：3.7（1H，d，J=8.9 Hz，H-1），1.5（2H，m，H-2），1.3（2H，m，H-3），0.9（3H，d，J=7.3 Hz，H-4）。13C-NMR（100 MHz，CDCI3）δ：61.6（C-1），33.3（C-2），20.5（C-3），14.3（C-4），63.4（C-1′），101.6（C-2′），71.5（C-3′），71.1（C-4′），70.5（C-5′），65.2（C-6′）。其光譜數(shù)據(jù)與李帥等[18]的報(bào)道基本一致，鑒定其為正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷（n-butyl-O-β-D-fructopyranoside）。endprint

化合物15： 黃色簇狀針結(jié)晶。Molish反應(yīng)界面產(chǎn)生紫色環(huán)，四氫硼鈉反應(yīng)顯陽性。EI-MS m/z：610[M]+，分子式為C27H30O16。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：6.1（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），6.3（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），12.6（1H，s，5-OH），4.6（1H，s，H-1？蓯）、5.2（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），0.8（3H，d，J=5.8 Hz，6？蓯-CH3）。13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：156.5（C-2），134.5（C-3），178.1（C-4），161.6（C-5），99.0（C-6），164.5（C-7），94.0（C-8），156.8（C-9），104.4（C-10），121.1（C-1′），115.8（C-2′），145.6（C-3′），148.8（C-4′），116.0（C-5′），121.5（C-6′），101.2（C-1″），74.1（C-2″），70.4（C-4″），75.8（C-5″），67.9（C-6″），100.8（C-1？蓯），70.5（C-2？蓯），70.7（C-3？蓯），71.5（C-4？蓯），68.1（C-5？蓯），17.7（C-6？蓯）。以上數(shù)據(jù)與張清華等[19]報(bào)道的基本一致，鑒定化合物15為蘆丁（Rutin）。

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